1、高考资源网（） 您身边的高考专家第38讲微生物的实验室培养课时训练知能提升 限时式检测 梯级式提升 (时间:40分钟分值:90分)测控导航表知识点题号及难易度1.微生物的营养和培养基2,3,4,52.无菌操作6(中)3.微生物的纯化1,7(中)一、选择题:本在题共5小题,每小题8分,共40分。1. 用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时(C)可以用相同的培养基都需要使用接种针进行接种都需要在酒精灯火焰旁进行接种都可以用来计数活菌A.B.C.D.解析:平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基;平板划线法可采用接种针进行操作,而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作;纯化时,要进行无菌操作,需要在
2、酒精灯火焰旁接种,以避免空气中的微生物混入培养基;平板划线法一般用于分离而不是用于计数。2.(2014江苏南通模拟)有关培养基配制原则表述正确的是(C)A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水等B.碳源和氮源必须具有一定比例,碳元素的含量最多,其次为氮元素C.微生物的生长除受营养因素影响外,还受到pH、氧浓度、渗透压的影响D.营养物质的浓度越高越好解析:培养自养型微生物的培养基中不需加入碳源,分离自生固氮菌的培养基中,不需加入氮源;一般来说,在培养基中碳源、氮源具有一定比例,但培养基中含量最多的应该是水;在培养基中,营养物质的浓度过高,会导致微生物不能吸水而死亡,因此,营养物质的浓度要
3、适宜,而不是越高越好;对于微生物的生长来说,在营养物质供应充分的基础上,pH、渗透压、氧浓度适宜对于其生长繁殖都是有利的。3.(2013自贡月考)下列操作不正确的是(C)A.接种前用肥皂洗双手,再用酒精擦拭双手B.接种前用火焰灼烧接种针(环)C.培养基倒入培养皿后应立即倒置平板D.在酒精灯的火焰旁完成倒平板的操作解析:培养基倒入培养皿后,要等待平板冷却凝固后再倒置平板,防止培养基流淌下来。4.甲、乙、丙是三种微生物,下表、是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖;甲能在中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是(D)粉状硫10 gK
4、2HPO44 gFeSO40.5 g蔗糖10 g(NH4)2SO40.4 gH2O 100 mLMgSO49.25 gCaCl20.5 g+-+-+注:“+”表示培养基中加入了这种物质,“-”表示培养基中没有加入这种物质。A.甲、乙、丙都是异养型微生物B.甲、乙都是自养型微生物,丙是异养型微生物C.甲是异养型微生物、乙是固氮微生物、丙是自养型微生物D.甲是固氮微生物、乙是自养型微生物、丙是异养型微生物解析:培养基缺少氮元素, 培养基缺少有机物,营养全面。N是微生物生长的必需元素,每一种微生物正常生长都需要N,但自己能够固氮的微生物可以生活在无氮培养基上。甲能在上生长繁殖,而乙、丙都不能,说明甲
5、是能够固氮的微生物;乙能在中生长繁殖,甲、丙不能,说明乙不需要培养基为它的正常生命活动提供能源物质,乙一定为自养型微生物,甲、丙一定都为异养型微生物。5.下列为某同学在培养金黄色葡萄球菌实验中的部分操作步骤,其中正确的是(C)A.培养基中蛋白胨、牛肉膏溶化后,直接补充蒸馏水至100 mLB.用1 mol/L NaOH溶液调试pH,使pH为5.06.0C.加压至98 kPa之前,要彻底排出锅内的冷空气D.将接种环放在酒精灯上灼烧,灭菌后立即伸入菌种试管内挑取少量菌种解析:A选项应该先加水,后加热溶化,否则培养基会被烧焦;B选项用1 mol/L NaOH溶液调试pH是正确的,但金黄色葡萄球菌是细菌
6、,本实验应把pH调至7.47.6;C选项加压至98 kPa之前,要彻底排出锅内的冷空气,是为了使高压锅能够在很短的时间内达到较高的温度,使锅内充满水蒸气,并使水蒸气分子运动达到尽可能快的速度,穿透各微生物菌体及芽孢等;D选项接种环放在酒精灯上灼烧灭菌是应该的,但不能立即伸入菌种试管内,这样会烫死菌种。二、非选择题:本大题共2小题,共50分。6.(25分)(1)由于大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。 (2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行(填“消毒”或“灭菌”);操作者的双手需要进行清洗和;空气中的细菌可用紫外线
7、杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能 。(3)通常对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的 。(4)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是 。解析:(1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点。(2)灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,所以对培养基和培养皿进行灭菌,消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分微生物,操作者的双手需要进行清洗和消毒,紫外线能使蛋白质变性,还能损伤DNA的结构。(3)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初
8、步的鉴定。(4)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生。答案:(1)易培养生活周期短 (2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3)鉴定(或分类)(4)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生7.(2014山东青岛质检)(25分)微生物与人类关系密切。虽然有些微生物能使动植物患病,但多数微生物对人类是有益的。请回答下列问题:(1)培养微生物的培养基配方中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。从土壤中分离分解尿素的细菌时,培养基中加的唯一氮源为,这种培养基称为培养基
9、。(2)在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 。(3)微生物接种的方法很多,最常用的是平板划线法和法。在用平板划线法接种时,为什么在操作的第一步以及以后每次划线之前都要灼烧接种环? 。在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么? 。解析:从土壤中分离出分解尿素的细菌,需用选择性培养基,唯一的氮源是尿素。接种过程中,最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法两种方法。以后每次划线前都要灼烧接种环的目的是杀死上次接种时留下的菌种,使下一次划线时接种环上的菌种直接来自上次划线的末端,以便通过多次划线后,得到单个的菌落。操作的第一步和最后一步需灼烧接种环的目的分别是防止接种环上有其他微生物而污染培养物、以免菌种对环境造成污染和感染操作者。答案:(1)尿素选择(2)防止皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染,还可使培养基表面的水分更好地挥发(3)稀释涂布平板第一步灼烧接种环是防止接种环上有其他微生物而污染培养物,以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种,使下一次划线时接种环上的菌种直接来自上次划线的末端,以便通过多次划线后,得到单个的菌落需要,目的是防止菌种对环境造成污染和感染操作者- 7 - 版权所有高考资源网