1、第一章第一节一、选择题1下列关于生物技术手段的操作水平的叙述，错误的是()A杂交育种个体水平B多倍体育种细胞水平C基因工程原子水平D诱变育种分子水平【解析】基因工程又称DNA重组技术，即操作水平为分子水平。【答案】C2(2016浙江瑞安市高二检测)下面是4种限制性核酸内切酶所识别的DNA分子序列和剪切位点(表示剪切位点，切出的断面为粘性末端)：限制性核酸内切酶1：GATC限制性核酸内切酶2：CATG限制性核酸内切酶3：GGATCC限制性核酸内切酶4：CCGCGG下列表达正确的是()A限制性核酸内切酶1和3剪出的粘性末端相同B在使用限制性核酸内切酶的同时还需要解旋酶C限制性核酸内切酶1、2、4识
2、别的序列都是由4个脱氧核苷酸组成的D限制性核酸内切酶1和2切出的DNA片段可通过T4DNA连接酶拼接【解析】使用限制性核酸内切酶时不需要解旋酶解旋，一般用加热解旋；限制性核酸内切酶4识别的序列是由6个 脱氧核苷酸组成的；限制性核酸内切酶1和2切出的DNA片段不互补，不能连接。【答案】A3下列对基因工程的理解错误的是()A基因工程又叫转基因技术或重组DNA技术B基因工程可以将一种生物的DNA片段转移到另一种生物细胞内并让其表达C基因工程的出现受到技术发展的推动D基因工程技术已经比较成熟，每次转基因都可以成功，并且达到满意的结果【解析】基因工程技术尚不是很完善，每次转基因时都需要转移大量的片段，然
3、后再进行筛选，不能精确转移，也不能让目的基因百分之百表达。【答案】D4(201 6苏州高二检测)基因工程中所用到的工具酶包括()DNA解旋酶限制性核酸内切酶DNA连接酶质粒ABCD【解析】DNA解旋酶用于DNA复制过程中，不用于基因工程；质粒是基因工程的载体，但不是酶。因此C项正确。【答案】C5已知某种限制性核酸内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切割后，这些线性DNA分子最多能产
4、生的不同长度DNA片段的种类数是()线性DNA分子的酶切示意图A1B2 C4D9【解析】若每个DNA分子上至少有1个酶切位点被酶切断，则多个线性DNA可以切得的种类有：a、b、c、d、ab、bc、cd、abc、bcd九种。【答案】D6作为基因的运输工具载体，必须具备的条件之一及理由是()A能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B具有多个限制性核酸内切酶切点，以便于目的基因的表达C具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件D能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选【解析】作为载体要携带目的基因进入受体细胞并使之表达，必须能够在宿主细胞内稳定地保存并大量复制，以
5、便通过复制提供大量的目的基因。同时要具有某些标记基因，是为了通过标记基因是否表达来判断目的基因是否进入了受体细胞，从而进行筛选受体细胞。载体要具有多个限制性核酸内切酶切点，则是为了便于与外源基因连接。综上所述，正确答案应为A。【答案】A7限制性核酸内切酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制性核酸内切酶BamH 、EcoR 、Hind 以及Bgl 的辨识序列。箭头表示每一种限制性核酸内切酶的特定切割部位，其中哪两种限制性核酸内切酶所切割出来的DNA片段末端可以互补，其正确的末端互补序列是怎样的()ABamH 和EcoR ；末端互补序列为AATTBBamH 和
6、Hind；末端互补序列为GATCCEcoR 和Hind；末端互补序列为AATTDBamH 和Bgl ；末端互补序列为GATC【解析】分析每种限制性内切酶切割位点可知，BamH 和Bgl 切割核苷酸序列后，能产生互补的粘性末端。【答案】D8下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示某种限制性核酸内切酶的酶切位点。下列质粒中不能作为基因工程载体的是()【解析】质粒作为基因工程的载体，有两个作用：一是通过标记基因对重组DNA分子是否进入受体细胞进行鉴定；二是在受体细胞中通过自我复制完成目的基因的扩增。图中ori为复制必需序列，
7、该序列不能被破坏，否则重组质粒就无法在受体细胞中进行自我复制；图中的amp、tet均为标记基因，只需保留1个即可。【答案】C9.质粒是基因工程中最常用的载体，它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转入成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置(插入点有a、b、c)，请根据表中提供的细菌生长情况，推测三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是()细菌在含氨苄青霉素的培养基上的生长状况细菌在含四环素的培养基上的生长状况能生长能生长能生长不能生长不能生长能生长 A.是c；是b；是aB是a和b；是a；是b
8、C是a和b；是b；是aD是c；是a；是b 【解析】对细菌来说，能在含氨苄青霉素的培养基上生长，也能在含四环素的培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因和抗四环素基因都没有被破坏，插入点是c；对细菌来说，能在含氨苄青霉素的培养基上生长，说明其抗氨苄青霉素基因正常，不能在含四环素的培养基上生长，说明其抗四环素基因被破坏，插入点应为b；对细菌来说，不能在含氨苄青霉素的培养基上生长，说明其抗氨苄青霉素基因被插入而破坏，故插入点为a。【答案】A10下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。下图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamH 或EcoR 或Pst 的酶切位点。现用BamH 和
9、EcoR 两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开)。下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是()限制性核酸内切酶BamHEcoRPst识别序列和切割位点A1为BamH，2为EcoR，3为BamH，4为PstB1为EcoR，2为BamH，3为BamH，4为PstC1为Pst，2为EcoR，3为EcoR，4为BamHD1为BamH，2为EcoR，3为Pst，4为EcoR【解析】本题建议采用排除法。现用BamH和EcoR两种酶同时切割该DNA片段，若“2为BamH，3为BamH”，则酶切后单个含目的基因的DNA片段(23)自身连接成环
10、状，故B项错误；若“2为EcoR，3为EcoR”，则酶切后单个含目的基因的DNA片段(23)自身连接成环状，故C项错误；若“2为EcoR ,4为EcoR”，则酶切后单个含目的基因的DNA片段(24)自身连接成环状，故D项错误。【答案】A二、非选择题11如图为DNA分子的切割和连接过程，请据图回答：(1)EcoR是一种_酶，其识别序列是_，切割位点是_与_之间的_键，切割产生的DNA片段的末端形式为_。(2)不同来源的DNA片段结合，在这里需要的酶应是_酶，此酶的作用是在_与_之间形成_而起“缝合”作用的。【解析】本题考查限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用。(1)从图中可以看出EcoR 将DN
11、A片段切割，应为限制性核酸内切酶，其识别序列是GAATTC，切点是G与A之间的磷酸二酯键，切割后产生的DNA片段的末端是粘性末端。(2)DNA连接酶可将不同来源的DNA片段连接，从图中可以看出，此酶是通过在G与A之间形成磷酸二酯键的形式连接两个片段，连接粘性末端的连接酶是Ecoli DNA连接酶。还有一种T4DNA连接酶，既可连接粘性末端，也可连接平末端。【答案】(1)限制性核酸内切GAATTC鸟嘌呤脱氧核苷酸(G)腺嘌呤脱氧核苷酸磷酸二酯粘性末端(2)DNA连接鸟嘌呤脱氧核苷酸(G)腺嘌呤脱氧核苷酸(A)磷酸二酯键12(2016全国丙卷)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoR 、B
12、amH 和Sau3A 三种限制性核酸内切酶的识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoR、Sau3A的切点是唯一的)。图(a)图(b)根据基因工程的有关知识，回答下列问题：(1)经BamH 酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被_酶切后的产物连接，理由是_。(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图(c)所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有_，不能表达的原因是_。图(c)(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有_和_，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是_。【解析】(1)由题图可知，B
13、amH 和Sau3A 两种限制性核酸内切酶的共同识别序列是，二者切割可以形成相同的黏性末端，因此经BamH 酶切得到的目的基因可以与图(b)所示表达载体被Sau3A 酶切后的产物连接。(2)在基因表达载体中，启动子应位于目的基因的首端，终止子应位于目的基因的尾端，这样基因才能顺利地转录，再完成翻译过程，即顺利表达。图中甲所示的目的基因插入在启动子的上游，丙所示目的基因插入在终止子的下游，二者的目的基因均不能被转录，因此目的基因不能表达。(3)常见的DNA连接酶有E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，其中T4DNA连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端。【答案】(1)Sau3A 两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端(2)甲和丙甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终止子的下游，二者的目的基因均不能被转录(其他合理答案可酌情给分)(3)E.coliDNA连接酶T4DNA连接酶T4DNA连接酶(其他合理答案可酌情给分)