1、2021届高三复习生物名校联考质检卷精编（12）生物技术实践1.下列有关生物技术实践的叙述正确的是( )A. 用平板培养基测定细菌数量需要设置不接种的平板培养基作为对照B. 用浓度过低的海藻酸钠固定酵母菌，会导致出现拖尾的现象C. 如用植物材料提取DNA需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水胀破D. 加酶洗衣粉中酶制剂可以被重复利用，提高了酶的利用率2.通过传统发酵工艺制作的果酒深受人们喜爱，如图为某同学酿制葡萄酒的两个简易装置，下列说法错误的是( )A. 在葡萄酒的自然发酵过程中，酵母菌的来源是附着在葡萄皮表面的野生酵母菌B. 厌氧呼吸中乙醇和CO2是在酵母菌的细胞溶胶中产生的C. 若用乙装置，在发酵
2、过程中，必须进行的操作是定期拧松瓶盖D. 甲装置中，A液体是发酵液，瓶内要留有大约1/3的空间是为了提供氧气3.研究小组利用稀释涂布平板法来探究某河流中大肠杆菌的数量,每一个浓度涂布四个平板,并且设置空白对照组。下列关于操作步骤的叙述正确的是()A.涂布前, 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃, 燃尽后还要冷却810sB.涂布完成后, 在培养皿的皿盖上做标记, 以避免混淆, 并将培养皿倒置培养C.计算平板上的菌落数时, 四个培养皿上的菌落数无论多少, 都要全部平均D.若空白对照组上有7个菌落, 则在实验组数据基础上减去7, 以获得最准确数据4.高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者
3、从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养,得到若干菌落后用嫔液作显色处理,看到如图2所示情况。下列选项正确的是()A.过程合称为稀释涂布平板法B.甲乙试管中的液体均为选择培养基C.号培养基上的接种方法为平板划线法D.图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种5.药物敏感试验简称药敏试验，旨在了解病原微生物对各种抗生素的敏感程度，以指导临床合理选用抗生素。纸片扩散法（Kirby-Bauer test）是药敏试验一种常用的方法，它将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片所含的药物吸取平板中的水分溶解后
4、便不断向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌生长被抑制，形成透明的抑菌圈。（平板的制备）（1）关于药敏试验所用的琼脂平板制备过程，正确的顺序是_A.称量、溶解、定容、调pH、倒平板、灭菌B.称量、溶解、调pH、定容、倒平板、灭菌C.称量、溶解、定容、调pH、灭菌、倒平板D.称量、溶解、调pH、定容、灭菌、倒平板（2）培养基的灭菌条件应该设定为_。（测试菌接种）（3）若使用纸片扩散法进行药敏试验，在平板制备及测试菌接种环节，无需使用的工具是_。（抑菌圈观察）某研究小组将含有相同浓度抗生素IIV的四个纸片分别贴放在生长有测试菌的琼脂平板上，在合适的温度条件下孵育16
5、h，结果如图所示：（4）MIC是药敏试验中评价抗生素药效的常用指标，其定义为某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。根据上图的试验结果可知，对于该试验所用测试菌而言，抗生素I的MIC_（选填“大于”“小于”或“等于”）抗生素III的MIC。（5）在相关试验操作均严谨规范的情况下，在含有抗生素IV的纸片周围出现了较大的抑菌圈，抑菌圈中存在有若干个测试菌的菌落。试对上述现象的成因作出分析：_。6.生物选修1：生物技术实践为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行了如图A所示的实验。(1)步骤的培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是步骤培养基中 。从功能上讲，步骤中使用的培
6、养基属于 培养基。培养基的灭菌时间应该从 开始计时。(2)同学甲进行步骤的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是 ，出现图B结果可能的失误操作是 。(3)同学乙采用平板划线法纯化菌株，培养后的菌落分布如图C，平板中部分菌落越来越稀少，因为是 。(4)步骤后取样测定石油含量的目的是 。7.【生物一选修1：生物技术实践】血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要成分，负责血液中O2或CO2的运输。下面是血红蛋白的提取和分离的流程图。回答下列问题。(1)红细胞中血红蛋白的作用，体现了蛋白质的_功能。(2)提取血红蛋白最好用哺乳动物的红细胞，主要原因是_。采集新鲜血液前，要在采
7、血容器中加入柠檬酸钠溶液，其目的是_。(3)红细胞的洗涤要用_反复冲洗、离心，洗涤好的红细胞在蒸馏水和甲苯的作用下破裂，释放出血红蛋白。将分离的血红蛋白溶液进行透析的目的是去除_的杂质。(4)凝胶色谱法是根据_分离蛋白质的有效方法。血红蛋白呈红色这一特点在凝胶色谱法分离血红蛋白中的作用是_。8.回答下列问题(1)山西老陈醋的天然发酵醋醅中存在多种醋杆菌，拟从醋醅中分离高产酸的醋杆菌。取10g样品加人装有90 mL_的锥形瓶中，混匀，用_法接种于平板分离培养基(用溴甲酚紫做指示剂，根据有无变色圈判断是否产酸)上，30下_培养48h，挑取_的菌落，纯化培养。(2)天然发酵醋醅中除了醋杆菌，还有酵母
8、菌、红曲霉菌等微生物，这些微生物赋予了食醋独特的风味，若要分离醋醅中的红曲霉菌，可用_培养基(ALB培养基 BMS培养基 C土豆培养基 D牛肉汤培养基)。山西老陈醋一般采用高粱等粮食作物，红曲霉菌中具有酯化酶、糖化酶等，因此，除了能赋予食醋独特风味以外，还能_，以增加产量。(3)影响食醋风味的主要因素除了温度、氧气、pH 等环境因素外，还有_(答出两点即可)。9.幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素，其不良预后是胃癌.据研究发现，目前我国有超过50%人感染了Hp病菌.Hp是微需氧菌，环境氧要求5%8%，在大气或绝对厌氧环境下均能生长，Hp的尿素酶极为丰富，尿素酶催化尿素
9、水解形成“氨云”保护细菌在高酸环境下生存。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养.实验基本步骤如下：配制培养基灭菌、倒平板X培养观察.请回答：(1)在配制培养基时，要加入尿素和 指示剂，这是因为Hp能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现红色环带。(2)步骤X的操作如图所示：图中所用微生物接种的方法是 图示每次取样前需用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，目的是 。下列关于此实验的操作，正确的是 。A.高压蒸汽灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B.含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基灭菌后，冷却至室温倒平板C.取103、104、105倍的稀释液和无菌水各0.1m
10、L，分别涂布于各组平板上D.在皿盖上用记号笔做标记(3)在培养时，需将培养皿 并放在恒温培养箱中，否则将可能导致无法形成单一菌落。(4)临床上14C呼气试验检测是一种安全、准确的检测Hp的方法，其基本原理是当被检测者服用含有 的胶囊后，如患者的胃内存在Hp感染，则可将其分解为氨和14CO2。(5)某同学将分离得到的Hp扩大培养,对其进行计数。取1 mL菌液稀释106倍后再各取0.1 mL分别涂布在3个培养基上,培养一段时间后,其菌落数分别为180、220、200个,则每升菌液中Hp的数量 个,此方法测定的活菌数比实际活菌数少的原因为 。10.生物选修1：生物技术实践研究发现沙棘提取物具有抑菌和
11、降解亚硝酸盐的效果。沙棘提取物制备过程如下：沙棘果(叶)粉碎加有机溶剂搅拌收集滤液浓缩加溶剂萃取过滤浓缩成品。回答下列问题：(1)提取沙棘果(叶)的有效成分时，对沙棘果(叶)进行粉碎处理的目的是 。粉碎后添加的有机溶剂不宜选用 (填“甲醇”或“乙醇”)，原因是 。为了提升萃取效率需要加热，采用水浴加热而不是直接明火加热，原因是 。(2)研究者利用滤纸片法初步测定提取物的抑菌效果，将灭菌后的滤纸片分别放入准备好的提取物溶液及 (对照)中浸泡后，取出滤纸片并将其贴在涂布好菌液的平板上，培养一定时间后，通过比较 判断抑菌效果。(3)若要验证沙棘提取物的浓度与降解亚硝酸盐的效果有关，请写出简要实验思路
12、_。11.生物一选修1: 生物技术实践 D-阿洛酮糖是近年发现的一种具有特殊 保健功能的新型功能性因子，它具有改善肠道菌群、降低血糖、抗龋齿等生理功能。 科研人员以重组大肠杆菌为实验材料、对利用固定化细胞技术生产D-阿洛酮糖进行了相关研究回答下列问题:(1)科研人员在研究中以D一果糖做为底物，说明该重组大肠杆菌能合成_的酶。(2)实验中科研人员利用海藻酸钠为载体，说明该实验是用_来固定细胞的，而该方法一一般不用于酶固定化的原因是_.用该方法固定细胞时要在溶化好的海藻酸钠中加人重组大肠杆菌后进行充分搅拌的目的是_. (3)为研究固定化细胞的pH稳定性进行了相关实验，结果见图:该实验中的对照组是_
13、细胞组，在实验中要用到不同PH的缓冲液，缓冲液除了能用来控制发酵所需pH外，还能_.为了防止其他做生物的污染对实验结果的影响，细胞固定化要_ 条件下进行 根据实验结果，该实验的结论是固定化细胞比游离细胞的pH稳定性高，得出这一结论的依据是_.答案以及解析1.答案：A解析：A、用平板培养基测定细菌数量需要设置不接种的平板培养基作为对照，A正确；B、用浓度过高的海藻酸钠固定酵母菌，会导致出现拖尾的现象，B错误；C、如用植物材料提取DNA需先用洗涤剂瓦解细胞膜，C错误；D、加酶洗衣粉中酶制剂不能重复利用，D错误。故选：A。2.答案：D解析：A. 在葡萄酒的自然发酵过程中，所需的菌种是附着在葡萄皮上的
14、野生型酵母菌，A正确；B. 厌氧呼吸中乙醇和 CO2是在酵母菌无氧呼吸产物，发生在细胞溶胶中，B正确；C. 若用乙装置，在发酵过程中会产生二氧化碳，故必须定期拧松瓶盖，C正确；D. 甲装置中，A 液体是发酵液，要留有大约 1/3 的空间为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气，又防止发酵旺盛时汁液溢出，D错误。3.答案：A解析： 本题主要考查某种微生物数量的测定选项分析:A项,进行涂布平板操作前,要对涂布器进行灭菌,一般做法是先将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中,然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待燃尽后冷却,故A项正确。B项,用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底,因为如果把标签写在盖子上,培养皿倒
15、置后,标签就看不到,故B项错误。C项,计数时应选取菌落数在30300之间的平板,若有二个稀释度均在30300之间时,按国家标准方法要求应以二者比值决定,比值小于或等于2取平均数,比值大于2则其较小数字,故C项错误。D项,实验的变量是有无细菌,若空白对照组上有7个菌落,说明高温灭菌不彻底,需要重新进行实验,故D项错误。综上所述,本题正确答案为A。4.答案：ACD解析：本题主要考查微生物的分离和培养选项分析:A项,稀释涂布平板法得到的稀释菌落会分布均匀,由号培养基上菌落分布情况可知,过程为稀释涂布平板法,故A项正确。C项,平板划线法一般多用于纯化菌株。由图可知,号培养基上的菌落是从号培养基上挑选接
16、种的,所以号培养基上的接种方法为平板划线法,故C项正确。D项,不显蓝色的菌落是因为淀粉被淀粉酶水解了,所以其菌落中含有所需菌种,故D项正确。B项,梯度稀释是用移液管把菌液从一支试管转移到下一支装有无菌水的试管,所以甲乙试管中的液体均为无菌水,故B项错误。综上所述,本题正确答案为A项、C项和D项。5.答案：（1）C （2）100KPa，121，1530min（3）D （4）大于 （5）抗生素IV 对于野生型测试菌具有较强的抑制作用，但测试菌中已经出现能抵抗抗生素IV的抗性突变株解析：6.答案：（1）石油为碳源 选择 达到设定的温度或压力值（2）稀释涂布平板法 涂布不均匀（3）划线过程接种环上的菌
17、种逐渐减少（4）筛选出分解石油能力最好的细菌解析：(1)步骤 与普通液体培养基成分相比,最大的区别 培养基中是以石油是唯一碳源的选择培养基,用以筛选高效分解石油的细菌,对于培养基常用高压蒸汽灭菌法,灭菌时间应从达到设定的温度或压力值开始计时。(2)图B平板中菌落密集处呈片状分布,是稀释涂布平板法的结果,操作过程中可能是涂布不均匀导致结果不是特别明显。(3)图C采用的平板划线法,平板中部分菌落越来越稀少,是因为随着划线次数的增加,接种环上的菌种逐渐减少,最终分离得到单个细胞繁殖而来的菌落。(4)步骤 后取样测定石油含量的目的是筛选出分解石油能力最强的细菌。7.答案：(1)运输(或运输载体)(2)
18、哺乳动物的红细胞没有细胞核，血红蛋白含量高(或血红蛋白含量高) 防止血液凝固(3)生理盐水 分子量较小(4)相对分子质量的大小 能通过观察颜色来判断收集洗脱液的时间，使得血红蛋白的分离过程非常直观解析：（1）红细胞中血红蛋白能运输氧气，这体现了蛋白质的运输（或运输载体）功能。（2）由于哺乳动物的红细胞没有细胞核，血红蛋白含量高（或血红蛋白含量高），因此提取血红蛋白最好用哺乳动物的红细胞。柠檬酸钠的作用是防止血液凝固。（3）洗涤红细胞用的是生理盐水。透析的目的是去除分子量较小的杂质。（4）凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。血红蛋白呈红色这一特点在凝胶色谱法分离血红蛋白中的作
19、用是：能通过观察颜色来判断收集洗脱液的时间，使得血红蛋白的分离过程非常直观。8.答案：(1)无菌水；涂布分离；倒置；变色圈较大(2)C；提高淀粉或原料的利用率(3)不同的菌株、不同的原料解析：(1)从醋醅中分离高产酸的醋杆菌，为减少其他杂菌的影响，在溶化醋醅时需用无菌水；用涂布分离法可将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，接种于用溴甲酚紫做指示剂的平板分离培养基上，在培养的过程细菌呼吸会产生水，如果不倒置，水蒸气遇到冰冷的培养皿盖就会形成水珠，滴在培养皿的菌株上会让细菌沿水传播生长,会影响每一个单独菌株的纯性，故需要倒置培养，由于溴甲酚紫能与酸进行反应变色，挑取变色圈大的菌落进行纯化培养。(
20、2)根据红曲霉菌的性质，可知其可利用淀粉，因此可用土豆培养基进行分离培养。红曲霉菌中具有酯化酶、糖化酶等，能将淀粉分解产生麦芽糖，从而提高淀粉或原料的利用率，增加产量。(3)制醋过程中的影响因素包括温度、氧气、pH等环境因素，还包括菌株、原料的种类等。9.答案：(1)酚红指示剂(2)稀释涂布平板法 使微生物和无菌水混合均匀 C(3)倒置 (4)14C标记尿素 (5)21012 当两个或多个细胞连在一起时,平板上只能观察到一个菌落 解析：(1)由于Hp含有尿素酶，尿素酶能将尿素分解成氨而氨会使培养基碱性增强，即PH升高，导致酚红指示剂变红。(2) 微生物接种的方法很多，但都要注意防止杂菌的污染；
21、接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，图示所示为稀释涂布平板法； 图示每次取样前需用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，目的是使微生物和无菌水混合均匀； 高压蒸汽灭菌加热结束时，等待压力表指针回到零后，才能开启锅盖，不能打开放气阀使压力表指针回到零，A错误；含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基灭菌后，冷却至50左右倒平板，不需要冷却到室温 ，B错误；取103、104、105倍的稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，C正确；用记号笔标记培养皿中的菌落时，应标记在皿底上，D错误。(3)在培养时，需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中，倒置培养基的目的也是为了获得单一菌落。(4)如果人感染
22、了Hp，能将尿素分解为NH3和CO2，因而标记尿素中的C，可通过呼吸产物来判断是否感染Hp。(5)1 L菌液中Hp的数量=(180+220+200)30.1106103=21012(个),用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低的原因是当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。10.答案：（1）原料与有机溶剂充分接触，提高提取率 甲醇 甲醇毒性较大 避免引起有机溶剂燃烧爆炸（2）溶解提取液的溶剂 透明圈的大小（3）取等量一定浓度的亚硝酸盐溶液置于标记好的试管中，分别加入等量不同浓度的沙棘提取液，置于相同且适宜环境中，一段时间，检测并比较个试管亚硝酸盐的含量解析：(1)为
23、了提高提取率,提取前应对沙棘果(叶)材料进行预处理,即对其进行粉碎和干燥;粉粹处理的目的是原料与有机溶剂充分接触,提高提取率。粉碎后添加的有机溶剂不宜选用甲醇,原因是甲醇毒性较大。由于有机溶剂易燃,直接明火加热容易燃烧爆炸,因此采用萃取法提取某有效成分时加热一般不用酒精灯直接加热而用水浴加热。(2)利用滤纸片法初步测定提取物的抑菌效果,将灭菌后的滤纸片分别放入准备好的提取物溶液及溶解提取液的溶剂(对照)中浸泡后,取出滤纸片并将其贴在涂布好菌液的平板上,培养一定时间后,通过比较透明圈的大小判断抑菌效果,透明圈越大,抑菌效果越好。(3)验证沙棘提取物的浓度与降解亚硝酸盐的效果有关的实验思路:取等量一定浓度的亚硝酸盐溶液置于标记好的试管中,分别加入等量不同浓度的沙棘提取液,置于相同且适宜环境中,一段时间,检测并比较个试管亚硝酸盐的含量。11.答案：(1)催化D-果糖转化为D-阿洛酮糖(2) 包埋法酶分子小容易从包埋材料中漏出使其混合均匀(3) 游离； 维持发酵过程中pH的稳定；严格的无菌；在一定pH范围内,随pH值改变,固定化细胞酶活性变化幅度显著低于游离细胞的解析：