1、云南省西盟佤族自治县第一中学高考生物总复习现代生物技术知识整理1 新人教版选修3一、基因工程的诞生1、20世纪中叶，基础理论取得了重大突破 DNA是遗传物质的证明：1944艾弗里等人 DNA双螺旋结构和中心法则的确立：1953年沃森和克里克建立了DNA双螺旋结构模型。1958年，梅塞尔松和斯塔尔用实验证明了DNA的半保留复制，随后不久确立了中心法则。 遗传密码的破译：1963年，尼伦贝格等破译了遗传密码。2、技术的发明使基因工程的实施成为可能 基因转移载体的发现 工具酶的发明 DNA合成和测序技术的发明 DNA体外重组的实现 重组DNA表达实验的成功：1973年，博耶和科恩将两种不同来源的DN
2、A 分子进行体外重组，并首次实现了在大肠杆菌中的表达，至此，基因工程正式问世。 第一例转基因动物问世：1980年，科学家首次通过显微注射法，培育出世界上第一个转基因动物。这一实验被认为是基因工程发展史上的一个里程碑。 PCR技术的发明：1985年，科学家莫里斯发明。二、基因工程的概念是指在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞并使重组基因在受体细胞中表达，产生人类需要的基因产物的技术。又称重组DNA技术。思考：（1）基因工程的物质基础是：所有生物的DNA均由四种脱氧核苷酸组成。（2）基因工程的结构基础是：所有生物的DNA均为双螺旋结构。（3）一种
3、生物的DNA上的基因之所以能在其他生物体内得以进行相同的表达，是因为它们共用一套遗传密码子。1.2 基因工程的原理及技术一、基因工程的工具酶与载体1、分子手术刀：限制性核酸内切酶（简称限制酶）。（1）来源：主要从原核生物中分离和纯化。（2）特点：每种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的位点上切割DNA分子。 （切割的化学键：磷酸二酯键）（2）切割方式错位切：产生黏性末端。平切： 产生平口末端。2、分子针线：DNA连接酶。（1）类型：EcoliDNA连接酶、T4DNA连接酶等。（2）作用：可以将两个DNA 片段之间的2各缺口通过磷酸二酯键同时连接起来。3、运载工具：载体。（1）种类：质
4、粒（常用）、噬菌体、可起载体作用的动植物病毒。（2）质粒：来源：是细菌细胞质中一种很小的环状、双链DNA分子。条件：具有一个至多个限制酶切割位点。能在受体细胞中自我复制，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行同步复制。具有某些标记基因。（供重组DNA的 鉴定和选择）能“友好”地“借居”在受体细胞内；二、 基因工程的一般过程与技术 1、目的基因的获取从基因文库中获取目的基因利用PCR技术扩增目的基因逆转录（1）目的基因：主要是指编码蛋白质的结构基因。（2）获取方法从自然界已有物种中分离人工合成附：聚合酶链式反应技术（PCR技术）（1）PCR：即聚合酶链式反应（2）PCR技术：在体外通过酶促反
5、应有选择地大量扩增目的基因或序列的技术。（3）方法：2、基因表达载体的构建（核心）（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因可以能够表达和发挥作用。（2）组成：目的基因 + 启动子 + 终止子 + 标记基因RNA聚合酶识别和结合部位，位于基因的首端。 终止信号，位于基因的尾端。鉴别受体细胞中是否含有目的基因。（3）构建步骤：用同一种限制酶切割目的基因和载体，从而产生相同的黏性末端，再用DNA连接酶连接。（形成的分子称：重组DNA分子或重组质粒。） Ps：作载体的质粒前需有启动子，后需有终止子。3、将目的基因导入受体细胞（转化）（1）受体种类不同，导入方法
6、不同导入植物细胞：农杆菌转化法（双子叶植物常用）、基因枪法（单子叶植物常用）、花粉管通道法。导入动物细胞：显微注射法。导入微生物细胞：Ca2+处理法。（2）受体细胞的种类植物：可以是受精卵、体细胞（可经组织培养成完整个体）动物：受精卵（因为动物细胞的全能性受到抑制）（3）转化实质：目的基因整合到受体细胞的染色体DNA上。4、目的基因的检测与鉴定（1）分子检测检测转基因生物的染色体DNA是否插入了目的基因（DNA分子杂交法）检测目的基因是否转录出了mRNA（分子杂交法）检测目的基因是否翻译出了蛋白质（抗原抗体杂交法）（2）个体生物学水平鉴定检测转基因生物是否具有了我们所需要的遗传特性。三、基因工
7、程育种1、方法：提取目的基因装入载体导入受体细胞基因表达筛选出符合要求的新品种2、原理：基因重组。3、优点：目的性强，可以按照人们的意愿定向改造生物；育种周期短。4、缺点：技术复杂，存在安全性问题。5、实例：抗软化番茄的培育。1.3 基因工程的应用一、转基因生物是指利用基因工程技术导入外源基因培育出的、能够将新性状稳定地遗传给后代的基因工程生物。二、基因工程的应用1、植物基因工程 抗虫转基因植物减轻农药对环境的污染 抗病转基因植物 抗逆转基因植物 利用转基因改良植物的品质2、动物基因工程 提高动物的生长速度 改善畜产品的品质 用转基因动物生产药物（乳腺生物反应器） 用转基因动物作器官移植的供体
8、3、基因工程药物的生产如用转基因工程菌生产细胞因子、抗体、疫苗、激素等。4、基因诊断和基因治疗（1）方法l 基因诊断：采用基因检测的方法（DNA分子杂交技术）来判断患者是否出现了基因异常（如遗传病患者的基因缺陷）或是否携带病原体（如乙型肝炎病毒）等。l 基因治疗：是指利用正常基因置换或弥补缺陷基因的的治疗方法。途径 体外基因治疗：先从病人体内获得某种细胞，进行培养，然后在体外完成基因转移，再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内。 体内基因治疗：用基因工程的方法，直接向人体组织细胞中转移基因的方法。（2）实例：ADA基因缺陷症基因治疗机理1.4 蛋白质工程一、蛋白质工程崛起的缘由基因
9、工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，这些天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的，它们的结构和功能符合物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。二、蛋白质工程的概念指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求。基因工程是其中的关键技术，因此，蛋白质工程又被称为第二代基因工程。三、蛋白质工程的原理1、天然蛋白质合成：基因表达（转录和翻译）形成氨基酸序列的多肽链形成具有高级结构的蛋白质行使生物功能。（中心法则）2、蛋白质工程：从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸
10、序列找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）四、蛋白质工程的类型（1）根据氨基酸的性质和特点，设计并制造出自然界中不存在的全新蛋白质，使之具有特定的氨基酸序列、空间结构和预期的功能。（2）在蛋白质分子中替代某一肽段或一个特定的结构域。（3）指通过基因工程中的定点诱变技术，有目的地改造蛋白质分子中某活性部位的1个或几个氨基酸残基，以改善蛋白质的性质和功能。五、蛋白质工程的应用1、通过改造酶的结构，有目的地提高酶的热稳定性。2、在生物工程制药领域，蛋白质工程也有广泛的应用。一、细胞工程的概念是指以细胞为基本单位，在体外无菌条件下，进行培养、繁殖或利用细胞融合、核移植等技术，使细胞某些生物学特性按照人们的
11、意愿发生改变，从而改良生物品种、创造新品种和加速繁育生物个体，以及获得某些有用的细胞代谢产物的技术。二、细胞工程的类型1、按研究对象可分为：植物细胞工程、动物细胞工程、微生物细胞工程2、按所用技术可分为：l 植物组织培养、植物体细胞杂交l 动物细胞培养、动物细胞融合和单克隆抗体制备、细胞核移植技术和动物体细胞克隆2.2 植物的组织培养一、植物细胞的全能性1、概念：生物体内几乎每一个细胞内都含有该物种的全套遗传物质，具有发育成为完整个体所必需的全部基因，因此，这些细胞都具有发育成为一个新的生物个体的潜能。细胞的这种特性称为细胞全能性。2、理论依据：生物体内几乎每一个细胞内都含有该物种的全套遗传物
12、质，具有发育成为完整个体所必需的全部基因。3、全能性大小的判断（1）受精卵配子体细胞（2）植物细胞动物细胞（3）分化程度低的细胞分化程度高的细胞4、实现全能性的条件（1）离体状态。（2）环境条件条件适宜（如营养物质、激素、温度等）。5、体细胞未表现出全能性的原因 基因的表达具有选择性。即未离体细胞只能在机体的调控下定向分化，不能表达其全能性。6、植物细胞的全能性是植物细胞工程的基础。Ps：目前的实验证明，离体的植物体细胞的全能性得到了充分的体现（如植物组织培养），而离体的动物体细胞，其全能性受到限制，但其细胞核仍然保持全能性（如克隆技术培养动物个体），然而需要卵细胞质才能体现出来。二、植物细胞
13、工程（一）植物组织培养1、概念：是指依据细胞全能性的原理，在无菌条件下，分离植物的器官、组织、细胞或原生质体（称为外植体），并在培养基上培养，在适宜的条件下使其长成部分或完整植株的技术。2、理论基础：植物细胞的全能性。3、过程：愈伤组织胚状体试管苗植物体再分化（分化培养基）离体的器官、组织、细胞脱分化附：相关概念l 愈伤组织：是一团没有特定结构和功能并处于旺盛分裂状态的薄壁细胞。l 脱分化：由已分化的植物细胞形成愈伤组织的过程。l 再分化：愈伤组织生长一段时间后再移植到新的培养基（人教版：分化培养基）上继续培 养，重新诱导分化形成根、芽等器官的过程。4、条件：首先用消毒剂除去外植体表面的微生物
14、，在无菌条件下将其放到适宜的培养基上。培养基一般有五类成分：（1）水（2）无机营养：包括大量元素和微量元素。（3）有机营养：主要有糖、维生素、氨基酸。（4）生长物质：指植物激素，常用的有生长素和细胞分裂素，离体培养物的根芽分化取决于激素间的比例。此外，赤霉素对刺激细胞的伸长也有一定的作用。（5）天然附加物：如椰子乳、酵母提取物等。5、应用（1）微型繁殖：不仅可以保持优良品种的遗传特性，还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。（2）作物脱毒：植物分生区附近，如茎尖、根尖，很少被病毒感染，甚至无病毒，因而被用来培育无病毒植株。（3）制备人工种子概念：是指在植物组织培养中得到的体细胞胚状体，包埋在含有营
15、养物质和保护物质的包被中，在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。优点： l 不受环境因素的制约，一年四季都可以进行工厂化生产；l 繁殖速度快，可在短时间内提供大量种苗；l 有利于保存该种系的优良性状。（4）转基因植物的培育（5）生产药物、杀虫剂等。6、细胞工程育种之一植物组织培养育种方法：离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽等器官植物体 原理：植物细胞的全能性 优点：快速繁殖、培育无病毒植株等 缺点：技术要求高、培养条件严格 实例：制备人工种子（二）植物体细胞杂交1、概念：就是将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 2、理论基础：植物细胞的全能性
16、。3、过程附：（1）原生质体：是指去除植物细胞壁后获得的裸露的植物细胞结构等。（2）诱导植物细胞融合的方法：物理法：离心、振动、电激等。化学法：一般用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。4、意义：克服远源杂交不亲和的障碍。5、细胞工程育种之二植物体细胞杂交育种方法：去掉细胞壁诱导原生质体融合组织培养 植物体 原理：植物细胞的全能性 （变异原理：染色体变异；融合原理：细胞膜具有一定的流动性）优点：克服远源杂交不亲和的障碍，培育出作物新品种。缺点：技术复杂，不能按人们的需要表现出亲代的优良性状。实例：番茄马铃薯的培育2.3 动物细胞的培养与体细胞克隆一、动物细胞培养1、概念：就是从动物机体中取出相关的组
17、织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。这项技术是动物细胞工程的基础。用于培养的动物细胞和组织大多取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织。2、过程：见下图相关概念细胞贴壁：培养时悬液中分散的细胞很快就会贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。原代培养：是指从供体获取组织或细胞后的初次培养。传代培养：将原代培养的细胞分离稀释后转入新的培养瓶中继续培养。（一般情况下，传代培养10-50次后，细胞增殖会明显放缓，甚至完全停止，但有少部分细胞克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，
18、这些细胞已经发生了突变，正在朝着等同于癌细胞的方向发展。）3、条件：（1）无菌、无毒的环境 培养液和培养用具进行无菌处理 培养液中添加一定量的抗生素 定期更换培养液（2）营养 葡萄糖、氨基酸、维生素、无机盐、微量元素、促生长因子等。 合成培养基中还需加入动物血清、血浆等（3）温度和PH 温度：细胞体外培养的温度一般与动物的体温相近，哺乳动物多以36.50.5为宜。 PH：多数细胞最适PH为7.2-7.4。（4）气体环境 细胞培养所需气体主要是O2和CO2，O2 是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的PH。 进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于95%空气加5% CO2
19、的混合气体的培养箱 中进行培养。附：培养基的的种类（按来源分）天然培养基：主要取自动物血清、动物组织提取液和鸡胚汁等，具有营养价值高、成分复杂的特点。合成培养基：是人工配制的，具有成分明确、便于控制实验条件的特点。4、应用：（1）许多有重要价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等，都可以借助动物细胞的大规模培养来生产。（2）作为基因工程的受体细胞。（3）用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。（4）用于医学研究二、细胞核移植和动物体细胞克隆（一）细胞核移植：是一种利用显微操作技术将某种动物细胞的细胞核移入同种或异种动物的去除细胞核的成熟卵细胞内的技术。（二）动物体细胞克隆1、概念：将供体
20、体细胞的细胞核与受体去核卵细胞的细胞质进行人工组合，借助于卵细胞的发育能力，经过培养发育成胚胎，进而形成个体的技术。（关键：细胞核移植）（克隆：是指遗传上完全相同的分子、细胞或来自同一祖先的生物个体的无性繁殖群体。）2、过程：（克隆羊“多利”的产生过程）3、 应用前景4、（1） 在畜牧生产中，可以加速家畜遗传改良进程，促进优良（2） 畜群繁育；（2）在保护濒危物种方面，可以增加这些动物的存活数量；（3）在医疗卫生领域：n 转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产许多珍贵的医用蛋白；n 在治疗人类疾病时，转基因克隆动物细胞、组织和器官可以作为异体移植的供体；n 人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化，形
21、成相应的组织、器官后可以用于组织、器官的移植。（4） 研究克隆动物和克隆细胞可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程；（5） 用克隆动物做疾病模型，能使人们更好的追中踪研究疾病的发展过程和治疗疾病。4、细胞工程育种之三动物细胞核移植育种方法：细胞核移植重组细胞培养成早期胚胎胚胎移植 原理：动物细胞核的全能性 优点：快速繁殖优良品种，保存濒危物种，有选择地繁殖某性别的动物。 缺点：导致生物品系减少，个体生存能力下降。 实例：“多利”羊等克隆动物的培育 现代生物技术育种小结 类型 比较 基因工程育种细胞工程育种植物组织培养育种植物体细胞杂交育种动物细胞核移植育种原理基因重组植物细胞的全能性植物细胞的
22、全能性（变异原理：染色体变异；融合原理：细胞膜具有一定的流动性）动物细胞核的全能性方法提取目的基因装入载体导入受体细胞基因表达筛选出符合要求的新品种离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽植物体去掉细胞壁诱导原生质体融合组织培养细胞核移植重组细胞培养成早期胚胎胚胎移植优点目的性强，可以按照人们的意愿定向改造生物；育种周期短。快速繁殖、培育无病毒植株等克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出作物新品种。快速繁殖优良品种，保存濒危物种，有选择地繁殖某性别的动物。缺点技术复杂，存在安全性问题。技术要求高、培养条件严格。技术复杂，不能按人们的需要表现出亲代的优良性状。导致生物品系减少，个体生存能力下降。举例抗
23、软化番茄、转基因鲤鱼等。制备人工种子、试管苗的培育、培养转基因植物等。白菜甘蓝的培育、“番茄马铃薯”的培育。“多利”羊等克隆动物的培育。2.4 动物细胞融合与单克隆抗体（一）动物细胞融合1、概念：指在一定条件下将2个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程。（融合成的细胞称为杂交细胞）杂交细胞诱导因素2、过程不同来源的细胞 附：诱导动物细胞融合的方法主要有物理法（如电激）、化学法（如聚乙二醇）、生物法（如灭活的病毒）3、意义：克服远源杂交的不亲和性。 2、优点：特异强、灵敏度高、并可能大量制备。3、应用：（1）作为诊断试剂l 单克隆抗体特异强、灵敏度高，所以能准确识别各种抗原物质的差异，并跟一定抗原
24、发生特异性结合。因此单克隆抗体在诊断的应用上具有准确、高效、简易、快速的特点。（2）治疗疾病和运载药物l 主要用于癌症治疗，也有少量用于其他疾病治疗。l 可把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，制成“生物导弹”。专题3 胚胎工程3.1 动物胚胎发育的基本过程一、哺乳动物生殖细胞的发生和受精作用（一）精子的发生1、场所：睾丸2、时间：初情期3、过程：第一阶段：位于曲细精管管壁的精原细胞进行数次有丝分裂，产生多个初级精母细胞。第二阶段：初级精母细胞连续进行两次分裂（即减数分裂，包括M和M），第一次分裂产生2个次级精母细胞，每个次级精母细胞再分裂一次产生2个精子细胞。第三阶
25、段：圆形的精子细胞经过变形成为精子。（二）卵子的发生1、场所：卵巢2、时间及过程：l 胎儿期动物的胚胎在性别分化后以后，卵原细胞通过有丝分裂不断增加数量，并进一步演变为初级卵母细胞，这时，它被卵泡细胞包围，形成卵泡。l 初情期后（苏教版：性成熟）减数第一次分裂：是在雌性动物排卵前后完成的，结果产生1个初级卵母细胞和1个第一极体，进入输卵管，准备与精子受精。减数第二次分裂：是在精子和次级卵母细胞（减中期）结合的过程中形成的，次级卵母细胞经分裂产生1个卵子和1个第二极体。（当在卵黄膜和透明带的间隙观察到2个极体时，说明卵子已经完成了受精，这是判断卵子是否受精的重要标志）（三）受精准备阶段1精子获能
26、刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物的生殖道（子宫和输卵管）发生相应的生理变化后，才能获得受精的能力，这种现象称为“精子获能”。（苏教版：卵泡液、输卵管分泌物、血清等液体可使精子获能）准备阶段2卵子的准备 卵子在受精前也要经历类似精子获能的过程。动物排出的卵子成熟程度不同，有的可能是次级卵母细胞，有的可能是初级卵母细胞，它们都要在输卵管内进一步成熟，当达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。受精阶段（1）场所：输卵管（2）主要过程（哺乳动物）：精子穿越放射冠和透明带，进入卵黄膜，原核形成和配子结合。获能后的精子与卵子相遇时，首先发生顶体反应，使顶体内的顶体酶释放出来，以
27、溶解透明带外面的放射冠（由卵泡细胞构成的放射状结构），形成精子穿越的通道。精子穿越透明带后，在接触卵黄膜的瞬间，会产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应，这个反应称作透明带反应。这是防止多精子入卵受精的第一道屏障。精子外膜与卵黄膜相互融合，精子入卵。精子入卵后，卵黄膜会立即发生一种生理反应，拒绝其他精子再进入卵内，这种生理反应称作卵黄膜封闭作用。这是防止多精子入卵受精的第二道屏障。精子入卵后的另一个变化，是尾部脱离，并且原有的核膜破裂；随后，精子形成一个新的核膜，最后形成一个比原来精子核还大的雄原核。与此同时，精子入卵后被激活的卵子完成减数第二次分裂，排出第二极体后，形成雌原核。 雄、雌原核充
28、分发育后，相向移动，彼此接触，二者体积缩小、合并，形成一个含二倍染色体的合子，即受精卵。受精过程至此结束，受精卵的发育也由此开始。二、哺乳动物胚胎发育的基本过程1、胚胎发育概念：是指受精卵发育成幼体的过程，包括卵裂、囊胚、原肠胚、胚层分化等主要阶段。（卵裂期细胞数目为32个左右时的胚胎，叫做桑椹胚）2、胚胎发育过程：（1）受精场所是母体的输卵管上段。（2）卵裂期：特点：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积并不增加，或略有减小。 （3）桑椹胚：特点：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。是全能细胞。（4）囊 胚：特点：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较
29、高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为囊胚腔。（5）原肠胚：特点：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。3.2 胚胎工程的理论基础一、胚胎工程的概念：是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和技术处理，经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足人类的各种需求。二、胚胎工程概念的理解：技术：体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术、胚胎干细胞移植技术等操作对象：生殖细胞、受精卵和早期胚胎细胞三、胚胎工程的理论基础：胚胎发育学3.3 胚胎干细胞的移植（一）干细胞1、概念：是动物（包括人）胚胎及某些器官中具有自我复制和多向分化潜
30、能的原始细胞，是重建、修复病损或衰老组织、器官功能的种子细胞。2、类型：专能干细胞：只能分化为一种或功能密切相关的两种细胞。如上皮组织基底层的干细胞，肌肉中的成肌细胞。多能干细胞：能分化为多种细胞或组织。如造血干细胞。全能干细胞：能分化为各种细胞、组织或器官。如胚胎干细胞。（二）胚胎干细胞1、概念：是在人胚胎发育早期的囊胚（受精后约56d）中未分化的细胞。（是由早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞，简称ES或EK细胞。）2、特点形态上：体积小，细胞核大、核仁明显。功能上：具有发育的全能性。3、胚胎干细胞的分离途径：见下图囊胚受精胎儿全能细胞生殖腺细胞内细胞团细胞胚胎干细胞分离培养4、胚胎干细胞
31、的应用可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；是在体外条件下研究细胞分化的理想材料，在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段；可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、少年糖尿病等；利用可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能；随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，定向培育出人造组织器官，用于官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题3.4 胚胎工程的应用一、体外受精1、概念：是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中
32、完成受精过程的技术。主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等几个主要步骤。 人工模拟体内环境，包括营养、温度、PH等，使初级卵母细胞成熟，同时使精子获能，最终完成受精作用，并有计划地保存胚胎等。2、过程：（1）卵母细胞的采集和培养：主要方法：用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。第二种方法：从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；第三种方法是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精。（2）精子的采集和获能：在体外受精前，要对精子进行获能处理。（3）受精：获能的
33、精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。3、意义：加快优良家畜的繁殖速度。二、胚胎早期培养1、概念：精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。当胚胎发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。2、胚胎培养液：成分包括无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，及血清等物质。三、胚胎移植1、概念：是指将良种母畜（供体）配种后，从其生殖道取出受精卵或早期胚胎（人教版：或通过体外受精及其他方式得到的胚胎），移植到生理状态相同的同种母畜（受体）体内，使之继续发育成为新个体的技术。2、过程：见右图 【特别提示】
34、用于移植的胚胎应为桑葚胚或囊胚。胚胎移植的供体和受体必须是同种生物，同一物种的动物才有可能具有相同的生理特征。作为供体的是优良品种，受体的雌性动物则是常见或存量大的品种。3、 关键技术：超数排卵（促性腺激素处理）、人工授精、同期发情、胚胎采集等。4、 意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能。 5、胚胎移植的生理学基础（1）供、受体生殖器官的生理变化是相同的（2）哺乳动物的早期胚胎形成后，在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能。（3）受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。（
35、4）供体胚胎可与子宫建立正常的生理和组织联系，但移入受体的供体胚胎的遗传特性，在孕育过程中不受任何影响。四、胚胎分割1、概念：用显微手术的方法将一枚胚胎分割成二分胚、四分胚甚至八分胚，经体内或体外培养后植入受体，以得到同卵双生或同卵多生后代的技术。这种方法可视为一种胚胎克隆方法。2、材料：发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚。（注意：对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育）3、 意义：提高家畜的胚胎利用率。五、其它胚胎工程的技术胚胎冷冻保存技术1、概念：将动物的早期胚胎，通过特殊的保护剂和降温措施，使其长期保存在超低温环境下。2、意义：可以使胚
36、胎移植不受时间和地域的限制，简化引种过程。性别控制技术1、概念：通过人为干预，使动物按照人们的愿望繁衍所需性别的后代的技术。2、应用： 在临床上，避免与性别有关的遗传病胎儿的出生； 在畜牧业生产上，按生产需要控制动物性别以提高经济效益。专题4 生物技术的安全性和伦理问题 一、转基因生物的安全性问题1、对转基因生物安全性的担忧：（1）食用是否安全： 转基因生物可能产生毒性蛋白、新的过敏原，导致营养成分的改变。（2）对生态系统的影响； 对生物多样性的影响； 导入的目的基因是否会扩散到其他物种而导致自然界的混乱； 转基因植物的残体分解物、根际分泌物等是否会对生态与环境造成大规模的负面效应等。2、我们
37、应该采取的态度和措施（1）对于转基因生物及其产品，我们应该科学地认识、评估和利用，保障公众的知情权；（2）国家应建立相应的评估及预警机制，更加理性地利用转基因生物。二、生物武器对人类的威胁1、生物武器的危害性（1）许多细菌和病毒具有强大的感染力和致病力；（2）利用转基因技术，在一些不致病的微生物体内插入致病基因，或在一些致病的细菌或病毒中插入能对抗普通疫苗或药物的基因；（3）人类基因组计划的完成也为生物武器的研制创造了条件。如，不同种群基因组成的特性的阐明，就有可能被用于研制针对特定种群的生物武器。2、禁止生物武器的措施（1）1972年4月10日，苏、美、英签署了禁止生物武器公约，我国1984
38、年加入。（2）全球刑警合作，共防生物袭击。三、生物技术中的伦理问题1、热点讨论1克隆人（1）争论焦点 反对者认为，克隆人严重违反了人类伦理道德，是克隆技术的滥用，克隆人冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念，克隆人是在人为地制造在心理上和社会地位上都不健全的人等；由于克隆技术尚不成熟，很有可能孕育出有严重生理缺陷的孩子。 支持者认为，克隆人是一项科学研究，既然是科学，就应该允许科学家研究克隆人；担心可能孕育出有生理缺陷孩子的问题可以通过基因诊断、染色体检查等方法得到解决，不成熟的技术只有通过实践，才能使之成熟。（2）中国政府的态度： 禁止生殖性克隆人，不反对治疗性克隆。 四不原则
39、：不赞成、不允许、不支持、不接受。2、 热点讨论2设计试管婴儿（1）设计试管婴儿与为解决不孕夫妇的生育问题的试管婴儿区别：设计试管婴儿需要对胚胎进行基因检测，选择符合配型要求的胚胎，然后用其干细胞（如造血干细胞）进行移植，从而治疗白血病、贫血病等疾病。而为解决不孕夫妇的生育问题的试管婴儿则不需要。（2）争论焦点l 反对者认为，把试管婴儿当作人体零配件工厂，是对生命的不尊重，那些配型不合适的胚胎又将如何处理？l 大部分人则认为，设计试管婴儿是符合伦理道德的，因为这是父母出于强烈的爱子之心，千方百计救治自己孩子的行为。3、热点讨论3是否需要“基因身份证”（1）基因身份证：记录有个人某些基因（如致病基因和易感基因）资讯的身份证，便于医生对疾病进行诊治。（2）争论焦点l 反对者认为，完全没有必要，因为：目前人类对基因结构及基因间相互作用，要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的，况且人类的多基因病，既与基因有关，由于环境与习惯有关；个人基因资讯的泄露所造成的基因歧视已经在社会上出现了。l 支持者认为，有必要，因为：虽然基因不是决定一切的，但是有一些遗传性疾病在后代中复现率很高，通过基因检测可以及早采取预防措施，适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的；对于基因歧视现象，可以通过正确的科学知识传播、伦理道德教育和立法得以解决。17
