1、【选修1第一轮复习导学案】专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养【考点1】相关核心概念1、微生物:是指肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。主要包括:细菌(原核生物 如大肠杆菌、枯草杆菌、乳酸菌、硝化细菌、醋酸菌);真菌(真核生物 如酵母菌、毛霉菌);病毒(非细胞生物 如噬菌体、HIV、烟草花叶病毒)2、 菌落 细菌(真菌)在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的子细胞群体。3、 微生物培养目的 获得纯化菌种用于生产或科学研究;4、 微生物培养成功的关键,需要注意什么?(1)、 ;(2)、 ;【考点2】、培养基1、概念:人们按照微生物对 不同需求,配制出满足其 的营养基质
2、。2、营养成分成分水无机盐碳源氮源备注举例水Nacl、KHPO4、MgSO4等无机物:无机物:还需满足微生物生长对PH、氧气、特殊营养的要求有机物:有机物:2、种类、按物理性质分类分类不同点用途例子液体培养基 琼脂(凝固剂)工业生产酒、醋、泡菜葡萄糖溶液培养酵母菌固体培养基 琼脂(凝固剂)微生物的分离、鉴定培养肺炎双球菌、按用途(功能)分类分类用途例子选择培养基加入某物质,抑制杂菌生长,促进所需微生物生长以尿素作为唯一氮源的培养基筛选出分解尿素细菌鉴别培养基根据微生物代谢特点,加入指示剂或化学试剂鉴定加入伊红-美蓝鉴定大肠杆菌、按成分分类分类概念例子天然培养基化学成分不明确的天然物质枯草、牛粪
3、等配制培养基合成培养基化学成分已知的化学物质牛肉膏蛋白胨培养基【考点3】、无菌技术1、 定义:指在微生物培养过程中,所有防止 的方法。2、 类型无菌技术定义方法消毒通过物理或化学方法,杀死 和一部分芽孢。乳制品消毒食具、刀剪、注射器的消毒手、水源消毒灭菌通过物理或化学方法,杀死 包括 适用于实验室的金属器械(镊、剪、接种环等)、玻璃试管口和瓶口等适用于耐高温的玻璃器皿、瓷器、玻璃注射器等适用于普通培养基、生理盐水等【考点4】、实验操作(大肠杆菌的纯化培养)步骤(一)、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1、制备原则 根据培养微生物的营养和环境条件考虑(1)、目的明确:根据培养微生物的种类及培养目的选择材
4、料不同制备培养基。比如:培养硝化细菌需要加入有机碳源吗? 。(2)、根据微生物种类,营养要协调 (3)、PH适宜; 真菌最适PH:5.06.0 细菌最适PH:6.57.5 2、制备过程(5个步骤)(1)、计算:根据培养基配方比例注意事项:、该培养基含 类营养,从同化作用角度考虑,培养的大肠杆菌属于 生物。、蛋白胨(蛋白胨富含有机氮化合物,也含有一些维生素和糖类)可以为微生物提供 营养。、牛肉膏(含有肌酸、肌酸酐、多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、矿物质类及维生素类的水溶性物质)可以为微生物提供 营养。(2)、称量注意事项:、用天平称取牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂时,应用在天平两边托盘放质量
5、相等的 。、用量筒量取 100mL(3)、溶化步骤:、溶解牛肉膏后,溶解蛋白胨和氯化钠。、加入 溶解,补加蒸馏水至 mL。、调节 。若溶解后,溶液呈酸性则用1mol/mL 调节。呈碱性,用1mol/mL 调节。(4)、灭菌 步骤:、用 方法对装有培养基的锥形瓶进行灭菌、用 方法对培养皿进行灭菌。思考:如何检测制备出的培养基灭菌成功? (5)、倒平板讨论P17问题:(二)、纯化大肠杆菌1、目的:获得由一个大肠杆菌繁殖而形成的菌落。2、方法:(接种) 、 ;讨论P18问题;讨论P19问题; 【高考题模拟】 专题二 微生物的培养与应用第1节 微生物的实验室培养1、将接种后的培养基和一个未接种的培养基
6、都放入37 恒温箱的目的是()A对比观察培养基有没有被微生物利用 B对比分析培养基是否被杂菌污染C没必要放入未接种的培养基 D为了下次接种时再使用2、下列描述正确的是()A同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B除水以外的无机物仅提供无机盐C凡是碳源都能提供能量 D有些无机氮源也能提供能量3、稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是()A操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面C不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理4、“筛选”是生物学中培育生物新类型常用的手段,下列
7、有关技术过程中不可能筛选成功的有()A在无氮培养基上筛选根瘤菌 B在不含碳源的培养基中筛选大肠杆菌C用含青霉素的培养基筛选酵母菌和霉菌 D用不含碳源的培养基筛选硝化细菌5、平板冷凝后,要将平板倒置,其原因是()A接种时再拿起来方便 B在皿底上标记日期等方便C正着放置容易破碎 D防止皿盖上的冷凝水珠落入培养基造成污染6、产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是()A一个细菌、液体培养基 B许多细菌、液体培养基C一个细菌、固体培养基 D许多细菌、固体培养基7、下列有关微生物培养的叙述,正确的是()A在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C向
8、液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D在牛肉膏蛋白胨培养基中接种HIV培养后可以观察其运动8、为了保存菌种的纯净需要进行菌种的保藏,下列有关叙述错误的是()A对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法B临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C临时保藏菌种容易被污染或发生变异D对于需要长期保存的菌种,可以采用低温4 保藏的方法9、下面的甲图表示酵母菌、硝化细菌和乳酸菌在半固体培养基中的生长情况,乙图表示这三种菌的增殖速度与氧气浓度之间的关系,请据图回答:(1)、乙图中c三条曲线依次表示甲图_号试管中微生物在不同氧气浓度中的增殖速度。(2)、研究发现,青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌细
9、胞的繁殖期起杀菌作用。如果培养基中混杂了这三类微生物,请设计实验,利用改变培养基成分等培养条件,将酵母菌和硝化细菌分离出来。、主要步骤:a分别配制不含_的培养基(A)和加入 的培养基(B),分别灭菌。b分别接种混合液放在适宜条件下培养。c观察结果。、结果:在A培养基上生存的是_,在B培养基上生存的是_。(3)、微生物培养过程中,获得纯净培养物的关键是_。(4)、若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数,可采用的接种方法是_。10、某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题:(1)、培养基中含有蛋白胨、淀粉,分
10、别为细菌培养提供了氮源和_。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是_和_。(2)、对培养基进行灭菌,应该采用的方法是_。(3)、为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于_中培养,培养的温度设定在37 。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。(4)、如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐_细菌,这种培养基(按功能分)被称为_培养基。(5)、从以下哪些微生物中可以提取到能够分解玉米秸秆的酶?_。(多选)A酿制果醋的醋酸菌 B生长在腐木上的霉菌C制作酸奶的乳酸菌 D反刍动物瘤胃中生存的某些微生物11、炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传
11、染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。(1)、细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。(2)、细菌鉴定:实验流程如图所示:、对配制的液体培养基等需采取_方法灭菌;实验所用液体培养基的碳源为_(填“无机碳”或“有机碳”)。、挑选可疑菌落制片后,用_观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。、接种可疑菌后,35 培养24 h,液体培养基变浑浊,原因是_。对照组试管中应加入_,与实验组同时培养6 h后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_(填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。、对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体,与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有_。第 6 页