1、专题2微生物的培养与应用一、巩固提升1.(2011课标全国高考理综,39)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题。(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于培养基。(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即和。(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力。(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。2.纤维
2、素分解菌能够产生纤维素酶分解纤维素。回答下列问题。(1)在筛选纤维素分解菌的过程中,通常用染色法,这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。甲同学在实验时得到了如图所示的结果,则纤维素分解菌位于()。A.B.C.D.(2)乙同学打算从牛胃中分离纤维素分解菌并计数,与分离醋酸菌相比,进行培养时除了营养不同外,最主要的实验条件差别是,该同学采用活菌计数法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目。(3)丙同学在提取和分离纤维素酶的过程中,为了抵制外界酸和碱对酶活性的影响,采取的措施是向提取液和分离液中添加。若探究纤维素酶活性的最适温度,如何设置对照?。3.从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是
3、:采集菌样富集培养纯种分离性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从环境采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其群落中的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的培养基,并在条件下培养。(3)下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解,请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是,获得图B效果的接种方法是。(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行,接种前要进行,在整个微生物的分离和培养中,一定要
4、注意在条件下进行。4.(2011济南二模)生产实践中应用的菌种主要来自土壤,从土壤中分离微生物的实验流程如下:土壤取样选择培养梯度稀释鉴别培养。请回答下列有关问题。(1)将土壤浸出液接种到特定培养基上,可以将酵母菌从混杂的微生物群体中分离出来,获得纯种酵母菌,这一过程叫做。在培养酵母菌的过程中,对培养基、接种环常采用的灭菌方法分别是。(2)在使用酵母菌发酵生产酒精的过程中,影响酵母菌酒精发酵的主要因素有,常使用的方法从发酵液中提取纯酒精。(3)从土壤中分离纤维素分解菌,最好选择在环境中采集土样,所选择的培养基应以作为唯一碳源。(4)纤维素分解菌能够合成纤维素酶,为了使纤维素酶反复使用,可以对纤
5、维素酶进行处理,处理的方法有吸附法、共价键结合法和法。5.白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一,应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子附着在寄主表皮、气孔或消化道上,遇适宜条件开始萌发,生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮,通过芽管入侵虫体,在虫体内生长繁殖,消耗寄主体内养分,产生各种毒素,形成大量菌丝和孢子,布满虫体全身。请回答下面的问题。(1)从自然菌样中筛选较理想生产用菌种的一般步骤是:采集菌样富集培养性能测定。白僵菌的菌样应从处采集。(2)分离白僵菌菌种的培养基属于培养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分,蔗糖属于营养物质
6、。(3)白僵菌纯培养常用的接种方法是和。(4)分离与培养过程中,培养基和接种工具都要进行处理,利用高温可以使微生物的等物质发生变性。6.(2011浙江绍兴一模)研究人员测试新抗生素对某种链球菌的杀菌效果,这种链球菌能引起人的咽喉感染,将此链球菌分别接种在三个培养皿中,在2号培养皿中放入一片浸过新型抗生素的圆纸片,3号作为对照,三只培养皿如下图。(1)请对本实验作出假设:。(2)“细菌喜荤,霉菌喜素”,所以该细菌培养基一般用来配制,制备培养基的操作顺序是。(用下列字母排序)a.倒置培养基b.计算和称量c.灭菌d.调pHe.溶解和熔化(3)为能彻底消灭培养基中的其他微生物,科学家研究出间隙灭菌法。
7、其程序是:第一天,将培养基在100 下维持30 min,然后在3637 下放置24 h;第二天、第三天重复第一天的操作。请分析:培养基在100 下维持30 min的目的是。在3637 下放置24 h后再加热的目的是。怎样证明间隙灭菌法的效果?。(4)对照组培养皿3中的圆片应作怎样的处理?。(5)利用对培养皿1进行该链球菌接种,把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。待长出菌落后,利用无菌绒布将培养皿1中的菌落转移到培养皿2和3中,转移过程中要注意。(6)三只培养皿都放在37 的温度条件下培养24 h,其中1号培养皿的变化结果如下图,在2号培养皿中画出假设的变化结果。#参考答案1.答案:(1)原油选
8、择(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰解析:(1)从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株,使用的培养基应是以原油为唯一碳源的选择培养基,通过控制碳源这种营养成分,来促进能高效降解原油的菌株的生长,抑制其他微生物的生长。(2)菌种纯化培养时,常采用平板划线法和稀释涂布平板法接种。(3)当固体培养基上长出单菌落后,可通过比较菌落周围分解圈的大小,来判断菌株降解原油能力的大小。一般来说,分解圈越大说明该菌株的降解能力越强,反之则越弱。(4)实验室培养微生物的过程中,常用灼烧灭菌法对接种环、接种针、试管口、瓶口等进行灭菌;用高压蒸汽灭菌法对培养基、试管等进行灭菌
9、;用干热灭菌法对玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等进行灭菌。实验操作应在酒精灯火焰旁进行,因为酒精灯火焰旁可形成一个无菌环境,可防止微生物的污染。2.答案:(1)刚果红A(2)保证无氧环境小(低)(3)缓冲溶液不同的温度梯度之间相互对照解析:(1)刚果红与纤维素形成的红色复合物在纤维素被分解后将不再形成,则在培养基上出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。(2)牛胃是一个厌氧的环境,所以其中的纤维素分解菌与需氧的醋酸菌培养条件有所不同。因是活菌计数法,当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到一个菌落,所以偏小。(3)探究最适温度可设置一系列的温度梯度相互对照,其他无关变量要适宜。3.答案:(1)海滩
10、等高盐(2)以淀粉为唯一碳源高温(3)稀释涂布平板法平板划线法(4)pH调整高压蒸汽灭菌无菌解析:噬盐菌的菌样应从高盐环境采集。微生物产生淀粉酶说明其碳源是淀粉,应选择以淀粉为唯一碳源的培养基,并在高温条件下培养。图A菌落分布较均匀,接种方法是稀释涂布平板法,图B菌落集中呈线状,接种方法是平板划线法。配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH,接种前要进行高压蒸汽灭菌,在实验中要注意在无菌条件下进行。4.答案:(1)纯培养高压蒸汽灭菌、灼烧(2)温度、pH、氧气浓度等蒸馏(3)富含纤维素的纤维素(4)固定化包埋解析:(1)在微生物培养过程中,培养基常用高压蒸汽灭菌,接种环常用灼烧灭菌。
11、(2)温度、pH影响酶的活性,氧气浓度影响发酵产物。因酒精沸点较低,故可用蒸馏法对酒精进行提纯。(3)纤维素分解菌生活在富含纤维素的环境中,分离所用的培养基应以纤维素作为唯一碳源,以抑制以其他有机碳为碳源的菌类生长。(4)对酶进行固定化处理可以使酶重复使用,提高利用率。5.答案:(1)纯种分离感病昆虫(2)选择碳源(3)平板划线法稀释涂布平板法(或稀释混合平板法)(4)灭菌蛋白质和核酸解析:(2)选择培养基用于选择分离菌种。蔗糖属于微生物的碳源。(4)微生物分离培养过程中,培养基、接种工具都要进行灭菌处理,其原理是高温使蛋白质、核酸变性而使细胞失去活性。6.答案:(1)这种新型抗生素对细菌生长
12、无影响;或这种新型抗生素对细菌的生长有抑制作用(写出一种即可)(2)蛋白胨和酵母提取物bedca(3)杀死活的微生物杀死24 h中由细菌芽孢萌发而生长的微生物将培养基处于37 下放置35 d,如仍无微生物生长,证明培养基已达到灭菌效果(4)将圆片在不添加任何抗生素的无菌水中浸泡一段时间(5)平板划线法或稀释涂布平板法不能转动绒布(6)解析:(1)根据题图看出,该实验是探究这种新型抗生素的抑菌效果。(2)链球菌是细菌,应用蛋白胨、酵母菌提取物(如酵母膏)培养。(3)间隙灭菌法培养基在100 下维持30 min能杀灭细菌,但芽孢生命力强,可能未被杀死,在3637 下放置24 h后,由于温度适宜,芽孢萌发,再加热容易杀死。杂菌是否全被杀死,通过对培养基进一步培养判断,若再生长出菌落,说明还有杂菌。(4)对照组3应不加任何抗生素。(5)对培养皿1进行接种用平板划线法或稀释涂布平板法。将培养皿1中的菌落转移到培养皿2和3中,各菌落对应位置应相同,绒布不能转动。(6)2号培养皿中间放入浸过新型抗生素的圆纸片,围绕圆纸片周围无菌落。高考资源网w w 高 考 资源 网
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