1、微生物的基本培养技术(建议用时：40分钟)题组一制备培养基1(2020北京顺义区期末)下列有关培养基的叙述，正确的是()A培养基所含物质的成分都相同B培养基只能用于培养微生物C向固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D微生物在固体培养基上生长时可形成肉眼可见的菌落D培养基的成分不一定都相同，根据培养物的不同可进行调整，A错误；培养基既能用于培养微生物，也可用于微生物的分离、纯化和鉴定，B错误；固体培养基中去除琼脂即可制成液体培养基，C错误。2下列关于微生物的营养的说法，正确的是()A同一种物质不可能既作碳源又作氮源B凡是碳源都能提供能量C除水以外的无机物仅提供无机盐D无机氮源也可能提供能量D
2、对一些微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源。CO2是光能自养细菌的碳源，但不能提供能量。CO2和N2都是无机物，也是微生物的碳源和氮源。硝化细菌所利用的氮源是氨，氨为无机氮源，同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源。3(2020四川自贡高二期末)培养自养型微生物和培养异养型微生物的主要区别是()A培养过程对氧气的需求不同B培养基中碳源不同C培养基中氮源不同D培养基中无机盐不同B自养型微生物可以把无机物合成为有机物，在培养过程中不需要添加有机碳化合物，异养型微生物需要利用现成的有机物，在培养过程中需要添加有机碳化合物，B项符合题意。题组二无菌技术4下列操作与消毒或灭菌无关
3、的是()A接种前用酒精灯火焰灼烧接种环B接种前用酒精擦拭双手C将平板倒置，放入培养箱中培养D在酒精灯的火焰旁完成接种C接种用具、器皿、空气中都存在大量微生物，必须进行严格地消毒或灭菌。A、B、D三项都是实验操作过程中涉及的消毒或灭菌的措施。将平板倒置，放入培养箱中培养与灭菌无关。5(2020广东东莞高二月考)下列关于灭菌和消毒的理解，不正确的是()A灭菌是指杀灭物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子B常用消毒方法有加热法、紫外线法、化学药剂法C接种环用灼烧法灭菌D消毒和灭菌实质上是相同的D灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A项正确；常用消毒方法有煮沸消毒法(加热
4、法)、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法等，B项正确；接种环用灼烧法灭菌，C项正确；灭菌是将物体内外的所有微生物全部杀灭，包括芽孢和孢子，消毒是杀死物体表面或内部的一部分微生物，D项错误。6防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是()A实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，防止被微生物感染D使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境B接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰部位灼烧灭菌，B错误。题组三微生物
5、的纯培养7下列有关倒平板操作的叙述，错误的是()A将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上D等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置C整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵，因此灭过菌的培养皿应放在火焰旁，打开的锥形瓶瓶口应迅速通过火焰，培养皿应打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不能将培养皿盖完全打开，等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置。8将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37 恒温箱的目的是()A对比观察培养基有没有被微生物利用B对比分析培养基是否被杂菌污染C没必要放入未接种的培养基D为了下次接种时再使用B对未接种的培养基进行培养，起到对
6、照作用，可用来确定培养基是否被杂菌污染。9下列关于平板划线操作的叙述，错误的是()A每次划线前都要灼烧接种环B灼烧接种环后，要立即用接种环接种，防止杂菌污染接种环C要在酒精灯火焰旁进行D接种前，要将菌种试管口通过火焰B灼烧接种环后，将接种环伸入管内，让环端先接触培养基上未长菌的部位，使其冷却，然后轻轻挑取少量菌体，再进行接种。灼烧接种环后，不可立即用接种环接种，以免接种环温度过高，将菌种杀死。10下图是某同学分离和培养土壤中微生物的部分操作步骤和实验结果示意图。回答下列问题：ABCDEF(1)利用固体培养基培养土壤中的微生物时，除考虑各种营养条件外，还需要控制的培养条件有_(至少写两点)等。接
7、种前应该先检测固体培养基是否被污染，检测的具体方法是_。(2)图示中用平板划线法接种的操作顺序是AB_；以上操作步骤中存在明显错误的是_(用字母表示)，该操作的正确方法是_。解析(1)若用该培养基培养土壤中的微生物，除考虑各种营养条件外，还要考虑温度、pH、氧气、无菌和渗透压等条件。检测固体培养基是否被污染的方法是将未接种的培养基在适宜的环境中放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。(2)图示是平板划线法接种操作示意图，其操作顺序是ABEDCF；为了防止杂菌污染，接种应该在酒精灯的火焰旁进行，因此以上操作中存在错误的步骤是C。答案(1)温度、pH、氧气、无菌将未接种的培养基在适宜的环境中放置
8、一段时间，观察培养基上是否有菌落产生(2)EDCFC在酒精灯的火焰旁划线11(2020河北唐山期中)下列关于微生物实验操作的叙述，正确的是()A配制细菌培养基过程中，需要在倒平板时调节培养基的pHB配制固体培养基时加入琼脂，其作用是为微生物生长提供碳源C平板划线法接种时，每次划线之前都需对接种环进行灭菌D实验结束后，使用完的培养基可以直接丢弃C配制细菌培养基过程中，需要在灭菌前调节培养基的pH，A错误；配制固体培养基时加入琼脂，其作用是作为凝固剂，而不是为微生物生长提供碳源，B错误；平板划线法接种时，每次划线之前和之后都需对接种环进行灭菌，C正确；实验结束后，使用完的培养基需要经过灭菌操作后才
9、可以丢弃，D错误。12(2020陕西延安吴起高中高二期末)下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是()A对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌处理B步骤倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置C步骤应多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落D步骤划线结束后在培养皿盖上做好标注C图中是倒平板，是进行平板划线，是培养。对实验操作的空间、操作者的衣着和手需要进行消毒处理，A项错误；倒完平板后立即盖上培养皿盖，冷却后将平板倒过来放置，B项错误；步骤应多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落，C项正确；图中操作结束后需在培养皿底标注菌种及接种日期等信息，而不是
10、在培养皿盖上做标注，D项错误。13下列有关平板划线操作的叙述，错误的是()A第一次操作前灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物B每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种C在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液D划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境或感染操作者C平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，以形成单菌落。因此，每次划线时，都应将接种环上原有的菌体杀死，划线时分散的菌体来自上次划线结束时的菌体。14请回答下列与大肠杆菌纯培养有关的问题：(1)制备培养基：配
11、制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行_，培养基在接种前要进行_灭菌。(2)纯化大肠杆菌通过接种环在琼脂固体培养基的表面进行连续划线的操作，将聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这种方法称为_。用该方法统计样本菌落数时_(填“需要”或“不需要”)设置对照组，为什么？_。(3)讨论分析纯化大肠杆菌时，_(填“可”或“不可”)用加入抗生素的方法防止杂菌感染。用该方法分离大肠杆菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是_。大肠杆菌与酵母菌的最本质区别是_。解析(1)配制培养基时各种成分在溶
12、化后分装前必须进行调节pH，培养基在接种前要进行高压蒸汽灭菌。(2)题干所述接种方法为平板划线法。平板划线法接种微生物时，需要进行不接种的空白培养实验，以判断培养基是否被污染，所以用该方法统计样本菌落数时需要设置对照组。(3)大肠杆菌属于细菌，对抗生素敏感，培养大肠杆菌时不能用加入抗生素的方法防止杂菌感染。平板划线法分离大肠杆菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是线条的末端的细菌数量少，最终可以得到由单个细菌繁殖而形成的菌落。大肠杆菌属于原核生物，酵母菌属于真核生物，它们最本质的区别是大肠杆菌无成形的细胞核。答案(1)调节pH高压蒸汽(2)平板划线
13、法需要可用来判断培养基是否被污染(3)不可线条末端的细菌数量少，最终可得到由单个细菌繁殖而形成的菌落大肠杆菌无成形的细胞核 不明确消毒与灭菌的方法与适用对象15(2020湖北襄阳四校联考)微生物培养过程中，要重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作，正确的是()A煮沸消毒法中100 煮沸56 min可以杀死全部微生物的细胞和芽孢、孢子B将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌C加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌D家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌B煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢，而灭菌能杀灭环境中一切微生物，包括孢子和芽孢，A错误；指示剂和染料可能混有微生物，因此加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，C错误；家庭制作葡萄酒时，要将容器进行灭菌或消毒，但是葡萄不能灭菌，因为发酵用的酵母菌来自葡萄，D错误。