1、课题1 微生物的实验室培养1细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于哪些部位的消毒或灭菌？（）A接种针、手、培养基B高压锅、手、接种针C培养基、手、接种针D接种针、手、高压锅2高温灭菌的原理是（）A每种微生物生长的最适温度是一定的B微生物对高温环境不适应C高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动D高温降低了环境中氧的浓度3产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（）A一个细菌、液体培养基B许多细菌、液体培养基C一个细菌、固体培养基D许多细菌、固体培养基4下列关于倒平板及对菌种纯化的说法正确的是（）A倒平板时左手将灭过菌的培养皿盖完全打开，右
2、手将锥形瓶中培养基倒入培养皿（1020 mL），左手立即盖上培养皿盖B使用已灭菌的接种环，培养基不需要再灭菌C平板冷凝后要将平板倒置，以防皿盖上的冷却水倒流入培养基D涂布器用火焰灼烧灭菌5某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是（）A培养基分装到培养皿后进行灭菌B转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D培养过程中每隔一周观察一次6下列依次表示倒平板、接种的位置，以及划线法接种的路径示意图，其中错误的是（）7实验时务必注意安全，对此下列叙述不正确的是（）A规范操作，以防被致病微生物感染B规范操作，防火、防烫伤C实验中不能吃东西，但可以说话
3、、喝水，实验后一定要洗手D丢弃前一定灭菌以免污染环境8下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的说法，错误的是（）A操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C待培养基冷却至50 左右时进行倒平板D待平板冷却凝固510 min 后将平板倒过来放置9稀释涂布平板法是微生物培养中常用的一种接种方法。下列相关叙述错误的是（）A操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面C不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理10为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的
4、是（）A对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D对于需要长期保存的菌种，可以采用低温4 保藏的方法11某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和_。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_和_。（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于_中培养，培养的温度设定在37 。要使该实验所得结果可靠，还应
5、该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。12下列是有关微生物的培养与应用的问题，请分析作答。（1）图中是利用_法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步_分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意_（答出一点即可）。（2）菌落形成的根本原因是_。将乳酸菌接种到彻底灭菌的固体培养基上，要使其正常生长必须给予的条件是_。（3）下表是一种培养基配方，请回答下列问题。成分KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O葡萄糖尿素琼脂含量1.4 g2.1 g0.2 g10
6、.0 g1.0 g15.0 g该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供_。如果要对培养基的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行_。13检验饮用水中细菌、病毒的含量是有效监控部分疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水中大肠杆菌有关的问题。（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为_。下图所示的四种菌落分布图中，图_不是由该方法得到的，而是利用_得到的。（2）有三种材料或用具需要消毒或灭菌：培养细菌用的培养基与培养皿（A
7、）；玻璃棒、试管、烧瓶和吸管（B）；实验操作者的双手（C）。其中需要消毒的是_，需要灭菌的是_。（填代号）（3）该培养基中的碳源是_，氮源是_。琼脂_（填“提供”或“不提供”）营养成分。成分含量蛋白胨10.0 g乳糖5.0 g蔗糖5.0 gK2HPO42.0 g显色剂0.2 g琼脂12.0 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL参考答案1解析：高压蒸气灭菌锅是灭菌的一个设备，通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物接种工具（如接种环）的灭菌。答案：C2解析：相对于动植物来说，微生物的耐高温能力是很强的。灭菌即杀死各种微生物及其他
8、生命形态（如芽孢），所以要采用更高温度以破坏微生物体内蛋白质、核酸的分子活性，以使其永远丧失生活能力。答案：C3解析：菌落是一个细菌或几个细菌的子细胞群体，形成于固体培养基上，有一定的形态结构，肉眼可见。同种细菌形成的菌落，形态结构是相同的。如果有许多细菌形成的菌落，就不可能有比较标准的形态。答案：C4解析：倒平板时用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不是直接将盖完全打开；使用灭过菌的接种环，培养基仍需进行灭菌处理，以免污染环境或感染操作者；涂布器灭菌时需沾少量酒精引燃。答案：C5解析：培养基灭菌应在分装到培养皿之前进行，A项错误。划线结束后，接种环上残留菌种，必须灼烧接种环
9、，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，B项正确。从有机废水中分离的微生物是异养型生物，其培养不需要光照，C项错误。培养过程中应每隔12 h或24 h观察一次，D项错误。答案：B6解析：在划线法接种时，第二次划线应从第一次划线的线末开始。D图第二次划线与第一次划线、第三次划线与第二次划线都有间隙。答案：D7解析：实验中不能吃东西，也不能说话、喝水，以防止污染培养的微生物或微生物污染实验者。答案：C8解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。待培养基冷却至50 左右时，
10、进行倒平板。平板冷却几分钟后还需倒置。答案：A9解析：若菌液浓度过大，形成的菌落连在一起，则得不到单个的菌落。答案：C10解析：对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法，保存于20 的冷冻箱中。答案：D11解析：微生物生长繁殖过程中需要氮源、碳源、水分、无机盐等营养物质，有些微生物还需要特殊营养物质。培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌，该过程一般在高压蒸汽灭菌锅中进行。影响微生物生长繁殖的因素主要是营养和温度，因此培养微生物时除提供适宜的营养外，还要提供合适的温度。为便于控制温度，一般置于恒温培养箱中培养。为排除无关变量的影响，该实验要设置空白对照，用无菌水代替样品来进行对照。答案：（1）
11、氮源（或氮源、碳源）碳源无机盐水（2）高压蒸汽灭菌（3）恒温培养箱无菌水（4）多大12解析：（1）根据图示是平板划线法。每次划线前要灼烧接种环；冷却后从上一区划线末端开始划；首尾区不重叠等。（2）乳酸菌是厌氧菌，要在无氧条件下培养。（3）葡萄糖是微生物的能源物质，还提供碳源。接种环进行灼烧，目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养基。答案：（1）平板划线稀释每次划线前要灼烧接种环；冷却后从上一区划线末端开始划；首尾区不重叠（答出其中一点即可）（2）子细胞成为群体隔绝空气（3）碳源和能源灭菌13解析：（1）图中A、B、C为稀释涂布平板法得到的结果，D为平板划线法得到的结果。（2）实验者的手要进行消毒，实验用具都要灭菌。（3）含碳物质是碳源，含氮物质是氮源。琼脂是凝固剂，不提供营养成分。答案：（1）稀释涂布平板法D平板划线法（2）CA、B（3）乳糖、蔗糖和蛋白胨蛋白胨不提供
