1、课题3 血红蛋白的提取与分离一、选择题1凝胶色谱法是根据(B)分离蛋白质的有效方法。A分子的大小B相对分子质量的大小C带电荷的多少D溶解度解析由凝胶色谱法分离蛋白质的原理可知,凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。2缓冲液的作用是:在一定范围内,抵制外界的影响来维持(B)基本不变A温度BpHC渗透压D氧气浓度解析缓冲物质能维持pH的相对稳定。3电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷(B)的电极移动A相同B相反C相对D相向解析许多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团会带上正电或负电。在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相
2、反的电极移动。故选B。4在蛋白质的提取和分离中,关于对样品处理过程中,分析无误的是(D)A洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B洗涤时离心速度过低,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果C洗涤过程选用0.1%的生理盐水D透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质解析洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白,A错误;洗涤时要低速短时离心,以防止白细胞沉淀,B错误;洗涤红细胞选用0.9%的生理盐水,C错误;透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质,D正确。故选D。5蛋白质的分离与提纯技术是蛋白质研究的重要技术,下列有关叙述不正确的是(A)A根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性,可将样品中各种不
3、同蛋白质分离B根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小,可通过电泳分离蛋白质C根据蛋白质相对分子质量的大小,可通过凝胶色谱法分离蛋白质D根据蛋白质的分子大小、密度不同,可通过离心沉降法分离蛋白质解析蛋白质分子不能透过半透膜,据此可利用半透膜除去样品中相对分子质量小的杂质,而不是分离样品中的蛋白质;根据蛋白质的带电荷性质,可通过电泳分离蛋白质;根据蛋白质的相对分子质量的大小,可通过凝胶色谱法分离蛋白质;根据蛋白质的分子大小、密度不同,可用离心沉降法分离蛋白质。二、非选择题6红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的,血红蛋白的主要功能是携带O2,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物
4、的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白,请回答下列有关问题:(1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四步:_样品处理_、_粗分离_、_纯化_和_纯度鉴定_。(2)实验前取新鲜的血液,切记要在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是_防止血液的凝固_。以上所述的过程即是样品处理,它包括_红细胞的洗涤_、_血红蛋白的释放_、收集血红蛋白溶液。(3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析,这就是样品的粗分离。透析的目的是_除去相对分子质量较小的杂质_。透析的原理是_透析袋能使小分子物质自由进出,而大分子物质被保留在袋内_。(4)纯度鉴定时最常用的方法是SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。样品纯化的目的是_通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去_。血红蛋白有什么特点_血红蛋白呈现红色_。这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义?_在用凝胶色谱法分离时可以通过观察颜色来判断什么时期应该收集洗脱液;同时通过观察颜色使血红蛋白的分离过程非常直观,大大简化了实验操作_。解析本题主要考查蛋白质提取和分离的相关知识,具体分析如下: