1、课后定时检测案43细胞工程基础对点练考纲对点夯基础考点一植物的组织培养()1下图是某组织培养过程的简图。下列有关说法,正确的是()花粉粒愈伤组织胚状体植株A花药离体培养的条件与种子萌发的条件完全相同B若花粉粒核中有两个或多个染色体组,则所得植株为二倍体或多倍体C过程都是细胞分化的过程,因此起作用的激素只有生长素D该过程体现了植物细胞的全能性2“白菜甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种,它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜甘蓝”的杂交过程示意图。以下说法正确的是()A除去细胞壁以形成原生质体,该过程可运用的酶是纤维素酶、淀粉酶和果胶酶B通常诱导上述原生质体相互融合的方法
2、是PEG诱导和灭活的病毒诱导C杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁D.从愈伤组织形成“白菜甘蓝”植物体必须经过脱分化和再分化两个过程考点二动物的细胞培养与体细胞克隆()细胞融合与单克隆抗体()3下列关于动物细胞培养的叙述,错误的是()A培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B克隆培养法培养过程中少数细胞的基因型会发生改变C.二倍体细胞的传代培养次数通常是有限的D恶性细胞系的细胞可进行传代培养42022山东师大附中高三一模下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程,有关叙述错误的是()A.图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原B利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法可
3、诱导细胞融合获得乙C用特定的选择培养基对乙筛选,融合细胞均能生长,未融合细胞均不能生长D丙需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁大题冲关练综合创新求突破5海南卷,31甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料,利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题:(1)以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体,在一定条件下进行组织培养,均能获得试管苗,其原理是_。(2)甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中,均加入一定量的蔗糖,蔗糖水解后可得到。若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗,该细胞应具备的条件是(填“具有完整的细胞核”“具有叶绿体”或“已转入抗性基因”)。
4、(3)图中A、B、C所示的是不同的培养结果,该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的,这两种激素是。A中的愈伤组织是叶肉细胞经形成的。(4)若该种植物是一种杂合体的名贵花卉,要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉,可用组织培养方法繁殖,在培养时,(填“能”或“不能”)采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体,原因是_。62022云南省昆明市高三二模玉米和高粱均为二倍体,染色体数目均为20条。科研人员经过长期实验,培育出“玉米高粱”杂种植株。回答下列问题:(1)科研人员尝试利用技术,获得“玉米一高粱”杂种植株。此过程中常用去除细胞壁,获取原生质体。(2)杂种细胞通过脱分化
5、过程形成,继续进行培养,通过过程形成杂种植株。此过程中杂菌污染会导致培养物死亡,原因是(答出2点即可)。杂种植株体细胞中最多有条染色体。(3)“玉米高粱”植株的一个体细胞同时具备了玉米和高粱的全部基因,但因为,基因不一定都能够表达。(4)玉米和高粱染色体数目相同,自然条件下,它们能否(填“能”或“不能”)相互杂交产生可育后代,理由是_。72022安徽省池州高三一模 2月19日,Science在线发表了新冠病毒表面S蛋白三聚体的高清结构,这为研发治疗和预防新冠病毒的抗体和疫苗提供了新的依据。请据此回答下列问题:(1)单克隆抗体技术是建立在和技术基础之上的,单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优
6、越性是_。(2)在制备单抗过程中,研究人员将新冠病毒S蛋白注射到小鼠体内才可以获得能产生相应单一抗体的浆细胞,其原理是:_。(3)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合过程中可获得多种类型的细胞,需要用特定的培养基进行筛选,才能得到杂交瘤细胞。(4)杂交瘤细胞在培养过程中需要定期更换培养液,其主要目的是_。(5)疫苗形式多样包括灭活苗、减毒苗、DNA疫苗和mRNA疫苗等,有人说利用新冠病毒S蛋白的mRNA制备的mRNA疫苗,注射人体后可以通过逆转录,将病毒的基因嵌入人体染色体中,你信吗?请简述你的理由。_,_。82022河北省唐山市高三三模球姜酮是一种新型抗肿瘤药物。某研究小组以鼠肝癌细胞和正常肝细胞为材
7、料进行了相关实验。回答下列问题:(1)与正常肝细胞相比,肝癌细胞的特点是_(答出两点即可)。(2)进行实验前,常用胰蛋白酶处理肝组织块以获得分散的单个细胞,这说明细胞间的物质主要是。该处理不能选用胃蛋白酶,请从动物细胞培养的条件角度进行解释_。实验所需肝组织一般取自幼龄小鼠的原因是_。(3)在动物细胞培养时,细胞培养所需气体主要有和CO2,其中前者的作用是_。(4)已知肝细胞中X基因的过量表达与肝癌的发生密切相关。若要检测球姜酮的抑癌效果,应该如何设计实验?请写出实验的主要思路_。92022黑龙江省哈尔滨市高三月考科学家利用单克隆抗体技术,分别获得鼠抗体与人抗体,再将抗体进行改造,生产出效果更
8、好的鼠人嵌合抗体,用于癌症治疗。下图表示形成鼠人嵌合抗体的过程。请据图回答:(1)培养骨髓瘤细胞时,需用处理一段时间,这样组织就会分散成单个细胞,此外还应定期更换,以清除代谢产物。(2)制备单克隆抗体时,先用特定的选择性培养基进行筛选,获得;然后对上述细胞进行抗体检测,选取的细胞进行克隆化培养;最终获得单克隆抗体,其优点是。(3)有人提出:将经特定抗原刺激产生的B淋巴细胞的细胞核移植到去核骨髓瘤细胞中来产生单克隆抗体,该技术称为_。(4)改造鼠源杂交瘤抗体,生产鼠人嵌合抗体,属于(生物工程)的范畴。该过程要根据,设计嵌合抗体的结构,最终对基因进行操作。10某研究人员设计了下列技术路线,以期获得
9、甘蓝和萝卜体细胞杂交植株。请回答下列问题:(1)制备原生质体时,常用两种酶处理,分别是。诱导原生质体融合常用的化学诱导剂是。原生质体融合成功的标志是。图中X是,除了被直接诱导出芽生根外,还可以通过形成获得再生植株。(2)为诱导融合体产生不定芽,通常应在培养基中加入两类植物激素,其中起主要作用的是。(3)若想获得抗盐植株,可选用融合原生质体作为人工诱变的材料,原因是_,且需在含较高浓度的NaCl培养基中筛选。112022辽宁大连普兰店高三考试近年来,我国死于狂犬病的人数有上升趋势。狂犬病病毒的核酸是RNA,机体感染病毒后产生的特异性IgC抗体,能消除狂犬病病毒,这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和
10、特异性抗体的重要依据。我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗,已取得良好效果。请根据上述材料,回答下列问题:(1)巴斯德利用固定毒株制成减毒活疫苗,预防狂犬病。制成减毒活疫苗需要用培养,这是因为病毒的生活方式为。(2)特异性抗体获取可用单克隆抗体制备。在制备克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程技术是_。(3)下面是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:图中过程A从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是细胞,该细胞能够产生。从小鼠体内提取分离该细胞之前,给小鼠注射的特定的物质是。图中过程B是细胞融合,该过程需要用灭活的、聚乙二醇或电激等诱导。特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原,使动物
11、产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比,单克隆抗体具有的优点。(4)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有无菌、无毒、适宜的温度、适宜的pH值、营养物质和_。课后定时检测案431解析:花药离体培养所需条件要求更高,需用MS培养基,另外还需要适宜的pH、温度和光照,而种子萌发需要适宜的温度、水分等,A错误;花粉培养形成的植株称为单倍体,B错误;在细胞分化过程中有多种激素起作用,其中起主要作用的是细胞分裂素和生长素,C错误;在该过程中,单个细胞最终培养成了植株,这体现了植物细胞的全能性,D正确。答案:D2解析:除去细胞壁的酶有纤维素酶和果胶酶;诱导植物原生质体融合不能用灭活
12、的病毒;杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁;从愈伤组织形成“白菜甘蓝”植物体属于再分化过程。答案:C3解析:动物细胞在培养过程中有接触抑制现象,细胞在培养瓶中会贴壁生长,最终会形成一层细胞,相互接触后停止生长;克隆培养法培养的过程中,仅有极少数细胞的基因型会发生改变;二倍体细胞的传代培养一般传至10代后就不易传下去了;恶性增殖细胞系的细胞具有不死性,可以进行传代培养。答案:A4解析:图中小鼠注射甲,产生能分泌特异性抗体的B淋巴细胞,则甲属于抗原,A正确;利用聚乙二醇(化学法)、灭活的病毒(生物法)和电激(物理法)可诱导细胞融合获得杂种细胞,B正确;用特定的选择培养基对乙筛选,融合具有同种
13、核的细胞和未融合细胞均不能生长,只有杂交瘤细胞能生长,C错误;杂交瘤细胞经过选择培养基的筛选并经单一抗体检测后,培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可制备单克隆抗体,D正确。答案:C5解析:(1)植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。(2)蔗糖水解后可得到葡萄糖、果糖。用细胞作为材料进行培养获得幼苗,细胞必须具有完整细胞核,才具有发育为完整个体的一整套遗传信息。(3)影响植物组织培养的两种主要激素是细胞分裂素和生长素。愈伤组织是叶肉细胞经脱分化形成的。(4)由于花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同,组织培养得到花卉基因型不同于原植株,导致不能保留亲本性状。答案:(1)绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全
14、能性,在一定条件下能发育成完整的植株(2)葡萄糖、果糖具有完整的细胞核(3)细胞分裂素、生长素脱分化(4)不能对杂合体的植株来说,其体细胞的基因型相同,而花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同。用花粉粒进行组织培养得到的花卉基因型不同于原植株6解析:(1)玉米和高粱是两个物种,不能进行杂交,而植物体细胞杂交技术能将不同种的植物体细胞原生质体融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成完整的植物体,故科研人员尝试利用植物体细胞杂交技术,获得“玉米高粱”杂种植株,此过程中常用酶解法去除细胞壁,即用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,获取原生质体。(2)杂种细胞形成愈伤组织的过程属于植物组织培养过程中的脱分化,愈伤组织形
15、成杂种植株的过程属于再分化;植物组织培养要在无菌条件下进行,因为杂菌和培养物竞争获得营养的能力更强,同时杂菌生长过程中可能会产生对培养物有害的物质,而导致培养物死亡。杂种植株体细胞的染色体数为融合前两种细胞染色体数之和,为40条;在体细胞有丝分裂的后期,着丝点分裂,染色单体分开成为子染色体,细胞中染色体数最多,为80条。(3)“玉米高粱”植株的一个体细胞虽然同时具备了玉米和高粱的全部基因,但由于基因的选择性表达,玉米和高粱的基因不一定都能够表达。(4)玉米和高粱体细胞中的染色体数目相同,但不是同一个物种,且不同物种之间存在生殖隔离,因此在自然条件下,这两个物种间不能通过有性杂交的方式产生可育后
16、代。答案:(1)植物体细胞杂交纤维素酶和果胶酶(2)愈伤组织再分化杂菌和培养物竞争获得营养的能力更强;杂菌生长过程中可能会产生对培养物有害的物质80(3)基因的选择性表达(4)不能不同物种之间存在生殖隔离7解析:(1)单克隆抗体的制备需要动物细胞培养和动物细胞融合技术。单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高,可大量制备,与常规的血清抗体相比,最大的优越性是特异性强、灵敏度高。(2)在制备单抗过程中,将新冠病毒S蛋白注射到小鼠体内,刺激B淋巴细胞增殖分化形成特异性的浆细胞,产生相应的单一抗体。(3)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合过程中可获得B淋巴细胞B淋巴细胞、骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞、B淋巴细胞骨
17、髓瘤细胞等类型的杂交细胞,需要用特定的选择性培养基进行筛选,才能得到杂交瘤细胞。(4)杂交瘤细胞在培养过程中会不断吸收营养物质,产生代谢产物,因此需要定期更换培养液以防止积累代谢产物毒害细胞。(5)由RNA逆转录形成DNA的过程,需要逆转录酶,但人体正常细胞中不含逆转录酶,无法逆转录合成相应的DNA。答案:(1)动物细胞培养动物细胞融合特性强、灵敏度高(2)B淋巴细胞只有受到相应的抗原刺激才能产生相应抗体,且一种浆细胞只能产生一种抗体(3)选择性(4)为了避免细胞代谢产物的积累对细胞造成危害(5)不信因为人体正常细胞中不含有逆转录酶,无法逆转录合成DNA8解析:(1)一般而言,癌细胞的特点有:
18、在适宜的条件下,肝癌细胞能够无限增殖;肝癌细胞的形态结构发生显著变化;肝癌细胞的表面发生了变化,糖蛋白减少,易于扩散和转移等。(2)酶具有专一性,进行实验前,常用胰蛋白酶处理肝组织块以获得分散的单个细胞,这说明细胞间的物质主要是蛋白质;酶作用的发挥需要适宜的条件,胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,而多数细胞生存的适宜pH为7.27.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性,故动物细胞培养过程中不能选用胃蛋白酶;一般来说,幼龄动物的细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛,老龄动物的细胞则相反,故实验所需肝组织一般取自幼龄小鼠。(3)动物细胞培养需要一定的气体环境,主要是氧气和CO2,其中氧气是细胞代谢所必需的。(4)结
19、合题意分析,本实验的目的“检测球姜酮的抑癌效果”,则实验的自变量为球姜酮的有无,因变量为X基因的表达情况,实验设计应遵循对照与单一变量原则,故可设计实验如下:将鼠肝癌细胞分为甲、乙两组(无关变量一致);甲组细胞培养液中加入一定量球姜酮,乙组细胞培养液中加入无菌生理盐水(单一变量);经适宜条件培养后,(从甲、乙两组收集等量细胞,)通过分别检测X基因在甲、乙两组细胞中表达的蛋白质水平的差异(检测因变量)。答案:(1) 在适宜的条件下,肝癌细胞能够无限增殖;肝癌细胞的形态结构发生显著变化;肝癌细胞的表面发生了变化(2)蛋白质多数细胞生存的适宜pH为7.27.4,而胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,胃蛋白
20、酶在此环境中没有活性幼龄动物的细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛,老龄动物的细胞则相反(一般来说,幼龄动物的细胞比老龄动物的细胞易于培养)(3)O2细胞代谢所必需的(4)将鼠肝癌细胞分为甲、乙两组(无关变量一致),甲组细胞培养液中加入一定量球姜酮,乙组细胞培养液中加入无菌生理盐水,经适宜条件培养后,(从甲、乙两组收集等量细胞,)通过分别检测X基因在甲、乙两组细胞中表达的蛋白质水平的差异9解析:(1)培养骨髓瘤细胞时,需要将所选取的组织细胞分散开,以利于细胞融合,可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理离体组织细胞使之分散开,此外还应定期更换培养液,以清除代谢产物,有利于细胞的生长。(2)分析可知,制备单克隆抗体
21、时,因为细胞的融合过程是随机的,因此融合后需要先用特定的选择性培养基进行筛选,获得杂交瘤细胞;然后对上述细胞进行抗体检测,选取专一抗体检验阳性(或能产生专一抗体)的细胞进行克隆化培养;最终获得单克隆抗体,单克隆抗体表现的优点为特异性强、灵敏度高、可大量制备。(3)有人设计用体细胞核移植技术将经特定抗原刺激产生的B淋巴细胞的细胞核移植到去核骨髓瘤细胞中来产生单克隆抗体,这是获得单克隆抗体的新举措。(4)从免疫的角度考虑,对人体来说鼠源抗体为抗原,若利用人的抗体与之嵌合,则排斥作用会减轻,对人体的副作用会减少,因此设计改造鼠源杂交瘤抗体,生产鼠人嵌合抗体,这属于蛋白质工程的技术范畴。该过程首先需要
22、根据预期的嵌合抗体功能,设计嵌合抗体的结构,然后推测相应的基因片段,最终对基因进行操作,因此该工程又叫做第二代基因工程。答案:(1)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)培养液(2)杂交瘤细胞专一抗体检验阳性(或能产生专一抗体)特异性强、灵敏度高、可大量制备(3)动物体细胞核移植技术(4)蛋白质工程预期的嵌合抗体功能10解析:(1)植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,所以制备原生质体,需要用纤维素酶和果胶酶将细胞壁去除,诱导原生质体融合常用的化学诱导剂是PEG(聚乙二醇)。原生质体融合成功的标志是杂种细胞再次生成细胞壁;图中X经过离体培养,可以形成试管苗,所以X是愈伤组织,除了被直接诱导出芽生根外,还可以通
23、过形成胚状体制成人工种子获得再生植株。(2)植物组织培养中常加入植物激素,主要是细胞分裂素和生长素,当生长素和细胞分裂素的比值低时,有利于芽的形成,所以起主要作用的是细胞分裂素。(3)由于融合的原生质体包含了两个物种的全部遗传信息,且具有全能性,所以可选用融合原生质体作为人工诱变的材料。答案:(1)纤维素酶和果胶酶PEG(聚乙二醇)杂种细胞再生成细胞壁愈伤组织人工种子(2)细胞分裂素(3)具有分裂分化能力,突变频率高,融合原生质体包含了两个物种的全部遗传信息,且具有全能性11解析:(1)病毒营寄生生活,所以在体外必须用活细胞来培养。(2)在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程技术是动物细
24、胞融合和动物细胞培养。(3)图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是已免疫的B(或浆)细胞,该细胞能够产生抗体,从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射特定的物质是抗原。图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活的病毒、聚乙二醇或电激等诱导。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高并可大量制备等优点。(4)动物细胞体外培养需要满足的条件有:无菌、无毒的环境:消毒、灭菌;添加一定量的抗生素;定期更换培养液,以清除代谢废物;营养物质;适宜的温度和pH;一定的气体环境:95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2(维持培养液的pH)。答案:(1)活细胞寄生(2)动物细胞融合和动物细胞培养(3)已免疫的B淋巴(浆)抗体抗原(或狂犬病病毒)病毒(或仙台病毒)特异性强、灵敏度高并可以大量制备(4)一定的气体环境(95%空气和5%的CO2)