1、细胞工程基础巩固练学业水平一、二考点一植物的组织培养1下图是某组织培养过程的简图。下列有关说法，正确的是()花粉粒愈伤组织胚状体植株A花药离体培养的条件与种子萌发的条件完全相同B若花粉粒核中有两个或多个染色体组，则所得植株为二倍体或多倍体C过程都是细胞分化的过程，因此起作用的激素只有生长素D该过程体现了植物细胞的全能性2(多选)“白菜甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜甘蓝”的杂交过程示意图。以下说法正确的是()A除去细胞壁形成原生质体，可运用的酶是纤维素酶和果胶酶B通常诱导上述原生质体相互融合的方法是PEG诱导和灭活的病毒诱导C
2、杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁D从愈伤组织形成“白菜甘蓝”植物体必须经过脱分化和再分化两个过程考点二动物的细胞培养与体细胞克隆细胞融合与单克隆抗体3下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是()A培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B克隆培养法培养过程中少数细胞的基因型会发生改变C二倍体细胞的传代培养次数通常是有限的D恶性细胞系的细胞可进行传代培养4下图为单克隆抗体制备过程示意图，图中X、Y细胞分别是()AT淋巴细胞、骨髓瘤细胞BT淋巴细胞、杂交瘤细胞CB淋巴细胞、骨髓瘤细胞DB淋巴细胞、杂交瘤细胞52021山东师大附中高三一模下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述
3、错误的是()A图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原B利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法可诱导细胞融合获得乙C用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长D丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁提能强化练学业水平三、四62021汾湖高级中学反馈测试人体感染新冠病毒后，机体会产生多种特异性抗体。我国科学家从康复者的浆细胞中克隆出针对病毒表面抗原的抗体基因的相关序列，构建表达载体并在相应系统中表达，可制备出全人源单克隆抗体。以下表述错误的是()A该单抗可直接用于新冠病毒的核酸检测B在该单抗制备过程中利用了基因工程技术C该单抗
4、可与新冠病毒相应蛋白特异性结合D可用抗原抗体反应检测抗体基因表达产物7(多选)下列关于动物细胞工程的叙述，不正确的是()A用胰蛋白酶处理动物组织后，可用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液B少数细胞在连续培养50代后可获得不死性，是某些基因选择性表达的结果C根据在高倍镜下观察到基因突变的比例可推知某化学药品的毒性DPEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养能得到优良动物个体8(多选)2021江苏省扬州中学高三检测下图是利用甲、乙两种植物各自的优势，通过植物细胞工程技术培育高产、耐盐的杂种植株的实验流程图。下列相关叙述中，正确的是()A进行a处理时能用胰蛋白酶Bb是诱导融合后得到的杂种细
5、胞Cc是培养后得到的具有耐盐性状的幼芽D进行d选择时，要将植株种在高盐环境中大题冲关练综合创新求突破9经典高考甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质。为了改善黄瓜的品质，科学家采用农杆菌转化法将一种甜蛋白基因成功导入黄瓜细胞，得到了转基因植株。回答下列问题：(1)用农杆菌感染时，应优先选用黄瓜_(填“受伤的”或“完好的”)叶片与含重组质粒的农杆菌共培养，选用这种叶片的理由是_。(2)若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白，则表明该重组质粒中_已转移到植物细胞中且能够表达；用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交，发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为11，则说明甜蛋白基因已经整合到_(填“核
6、基因组”“线粒体基因组”或“叶绿体基因组”)中。(3)假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产，若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗，应选用_作为外植体进行组织培养。(4)通常，基因工程操作主要有4个步骤，即目的基因获取、重组表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。因此，基因工程的含义可概括为_。102021江苏省扬州中学高三检测面对2019新型冠状病毒在全球的肆虐，包括我国在内的各国都在想方设法积极应对。下图为科研人员研发冠状病毒疫苗的几种技术思路。(1)途径和都需要通过动物细胞培养获得足够数量的病毒株。在动物细胞培养中，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条
7、件是_与5%二氧化碳的混合气体，二氧化碳的主要作用是_。途径与途径相比，生产的疫苗安全性更高的是途径_。(2)途径中，过程的操作需要_酶。途径中所示技术的核心是_(用图中数字作答)。(3)途径生产的DNA疫苗在动物细胞中表达引起机体免疫应答。与DNA疫苗相比，mRNA疫苗的安全性更有优势，这是因为mRNA不需要进入_，无整合到宿主细胞染色体基因组中的风险，且易被_水解，不会遗传给子细胞。(4)该病毒表面蛋白A为主要抗原，由病毒的A基因控制合成，为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体，科研人员对抗体结构进行精细研究，找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的_序列，通过基因工程技术对抗体结构进行人
8、源化改造。112020广东省汕尾市城区统考细胞融合技术已在农业、工业、医药等领域取得了开创性的研究成果，且应用领域在不断扩大。请回答下列有关细胞融合技术及其应用的问题：(1)与植物细胞融合相比，动物细胞融合特有的方法是_。(2)在植物体细胞杂交过程中，要先去除细胞壁，以获得原生质体。原生质体融合的过程不能在低渗溶液中进行，目的是防止_。植物细胞融合成功的标志是_。细胞融合打破了不同物种之间的_，使远缘杂交成为可能。(3)制备单克隆抗体时通常选择骨髓瘤细胞和免疫的B淋巴细胞进行融合，原因之一是骨髓瘤细胞具有_的特点，细胞融合后要置于选择培养基上进行选择培养，以去除_。(4)单克隆抗体可用于诊断人
9、体是否携带某种病毒，其诊断原理是_。122021云南省文山州高三月教学质量检测动物细胞工程技术在农牧业生产、医药卫生等领域有着广泛的用途。请回答下列问题：(1)动物细胞工程技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、_、生产单克隆抗体等，其中_是其他动物细胞工程技术的基础。(2)用幼龄动物的组织进行动物细胞培养时，需要先对动物组织块进行_处理，再用_处理分散成单个细胞。(3)在进行动物细胞培养时，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_。(4)目前用哺乳动物体细胞克隆动物，实际上是通过核移植来实现的，哺乳动物核移植可以分为_和_。(5)诱导动物细胞融合的方法有
10、_、_、电融合等。利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造_开辟了新途径。132021浙江金华东阳中学高三检测西瓜花叶病毒(WMV)主要侵害西瓜、甜瓜等各种瓜类作物，造成瓜类发病或减产。科研人员利用单克隆技术制备出抗WMV的特异性单抗，并以其为核心建立能快速有效地检测WMV的方法，可用于田间西瓜花叶病毒病的诊断和检测。回答下列问题。(1)以提纯的WMV病毒作为抗原，对小鼠进行免疫，常用化学诱导剂_将小鼠的_和骨髓瘤细胞进行细胞融合。(2)可利用选择培养基对融合细胞进行初步筛选，需要淘汰的融合细胞为_。随后将选出的细胞多倍稀释，接种在特定细胞培养板上，使这些单细胞克隆生长，最终选出能稳
11、定分泌_的杂交瘤细胞。(3)将选出的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔制备单抗腹水，一段时间后收集并纯化腹水，进行抗体效价和类型的测定。也可对克隆的杂交瘤细胞进行_，更能持久地得到单一的抗体。单抗比一般抗体优越得多，原因是_。(4)抗WMV的单克隆抗体还可作为特异性探针，利用_方法找出能与探针特异性结合的基因表达产物，进而实现从抗病性强的西瓜植株中获取抗病目的基因，该目的基因能否在其他植物体内稳定存在并遗传的关键是_。课后定时检测案401解析：花药离体培养所需条件要求更高，需用MS培养基，另外还需要适宜的pH、温度和光照，而种子萌发需要适宜的温度、水分等，A错误；花粉培养形成的植株称为单倍体，B错误；在细
12、胞分化过程中有多种激素起作用，其中起主要作用的是细胞分裂素和生长素，C错误；在该过程中，单个细胞最终培养成了植株，这体现了植物细胞的全能性，D正确。答案：D2解析：除去细胞壁的酶有纤维素酶和果胶酶；诱导植物原生质体融合不能用灭活的病毒；杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁；从愈伤组织形成“白菜甘蓝”植物体属于再分化过程。答案：AC3解析：动物细胞在培养过程中有接触抑制现象，细胞在培养瓶中会贴壁生长，最终会形成一层细胞，相互接触后停止生长；克隆培养法培养的过程中，仅有极少数细胞的基因型会发生改变；二倍体细胞的传代培养一般传至10代后就不易传下去了；恶性增殖细胞系的细胞具有不死性，可以进行传代
13、培养。答案：A4解析：制备单克隆抗体的细胞来源于B淋巴细胞和骨髓瘤细胞。据图分析，给小鼠注射抗原，使得小鼠产生免疫反应，形成能产生抗体的B淋巴细胞，因此X是B淋巴细胞，Y是体外培养的骨髓瘤细胞。答案：C5解析：图中小鼠注射甲，产生能分泌特异性抗体的B淋巴细胞，则甲属于抗原，A正确；利用聚乙二醇(化学法)、灭活的病毒(生物法)和电激(物理法)可诱导细胞融合获得杂种细胞，B正确；用特定的选择培养基对乙筛选，融合具有同种核的细胞和未融合细胞均不能生长，只有杂交瘤细胞能生长，C错误；杂交瘤细胞经过选择培养基的筛选并经单一抗体检测后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可制备单克隆抗体，D正确。答案：C6解
14、析：由分析可知，该单抗是蛋白质，不能直接用于新冠病毒的核酸检测，A错误；由题“针对病毒表面抗原的抗体基因的相关序列，构建表达载体并在相应系统中表达，制备出全人源单克隆抗体”可知，在该单抗制备过程中利用了基因工程技术，B正确；针对新冠病毒表面抗原制备出的单抗，可与新冠病毒相应蛋白特异性结合，C正确；抗体基因表达产物检测的方法是采用抗原抗体杂交反应，若呈阳性，则说明已翻译出相应的蛋白质，D正确。答案：A7解析：用胰蛋白酶处理动物组织后，可用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液，A正确；少数细胞在连续培养50代后可获得不死性，这是某些基因突变的结果，B错误；基因突变在高倍镜下是观察不到的，C错误；由于
15、动物细胞的全能性受到限制，动物细胞融合形成的杂种细胞不能培育成动物，D错误。答案：BCD8解析：a为果胶酶和纤维素酶处理得到原生质体，A错误；b是甲乙融合的杂交细胞，B正确；c是培养后得到的耐盐的幼芽，C正确；进行d选择时需在高盐环境中进行，D正确。答案：BCD9解析：(1)用农杆菌感染时，应优先选用黄瓜受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共培养，理由是叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞。(2)若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白，则表明该重组质粒中甜蛋白基因已转移到植物细胞中且能够表达；用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交，发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数
16、之比为1:1，则说明甜蛋白基因已经整合到核基因组中。(3)假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产，若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗，应选用茎尖作为外植体进行组织培养。(4)基因工程的含义可概括为按照人们的愿望进行设计，并通过体外重组和转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出符合人们需要的新生物类型。答案：(1)受伤的叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞(2)甜蛋白基因核基因组(3)茎尖(4)按照人们的愿望进行设计，并通过体外重组和转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出符合人们需要的新生物类型10解析：(1)动物细胞培养需要一定的气体条件，即95%空气与5%二氧
17、化碳的混合气体；二氧化碳的作用主要是维持培养液的pH，途径与途径相比，生产的疫苗安全性更高的是途径。(2)途径中，为逆转录过程，需要逆转录酶。途径采用的是基因工程技术，该技术的核心是基因表达载体的构建。(3)与DNA疫苗相比，mRNA疫苗的安全性更有优势，这是因为mRNA不需要进入细胞核，无整合到宿主细胞染色体基因组中的风险，且易被RNA(水解)酶水解，不会遗传给子细胞。(4)该病毒表面蛋白A为主要抗原，由病毒的A基因控制合成，为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体，科研人员对抗体结构进行精细研究，找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的氨基酸序列，通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造。这
18、种人源单克隆抗体属于蛋白质工程的产物。答案：(1)95%空气维持培养液的pH(2)逆转录(3)细胞核RNA(水解)酶(4)氨基酸11解析：(1)与植物细胞融合相比，动物细胞融合特有的方法是灭活的病毒诱导融合。(2)在植物体细胞杂交过程中，要先去除细胞壁，以获得原生质体。原生质体融合的过程不能在低渗溶液中进行，目的是防止原生质体吸水涨破。植物细胞融合成功的标志是形成新的细胞壁。细胞融合打破了不同物种之间的生殖隔离，使远缘杂交成为可能。(3)制备单克隆抗体时通常选择骨髓瘤细胞和免疫的B淋巴细胞进行融合，原因之一是骨髓瘤细胞具有无限增殖的特点，细胞融合后要置于选择培养基上进行选择培养，以去除非杂交瘤
19、细胞。(4)单克隆抗体可用于诊断人体是否携带某种病毒，其诊断原理是与相应抗原发生特异性结合。答案：(1)灭活的病毒诱导(2)原生质体吸水涨破形成新的细胞壁生殖隔离(3)无限增殖非杂交瘤细胞(4)与相应抗原发生特异性结合12解析：(1)动物细胞工程技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础。(2)用幼龄动物的组织进行动物细胞培养时，需要先剪碎动物组织块，再用胰蛋白酶处理分散成单个细胞制成单细胞悬液，然后进行培养。(3)在进行动物细胞培养过程中，经常表现为接触抑制的特征，即当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂
20、增殖。(4)目前用哺乳动物体细胞克隆动物，实际上是通过核移植来实现的，哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植两种类型。(5)诱导动物细胞融合的方法有物理、化学和生物因素，即为电激、聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒等方法。利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为单克隆抗体的制备提高了新途径。答案：(1)动物细胞融合动物细胞培养(2)剪碎胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)(3)接触抑制(4)胚胎细胞核移植体细胞核移植(5)聚乙二醇(PEG)灭活的病毒单克隆抗体13解析：(1)以提纯的WMV病毒作为抗原，对小鼠进行免疫。可用物理、化学或生物方法诱导细胞融合，常用化学诱导剂聚乙二醇将小鼠免疫的B
21、淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行细胞融合。(2)可利用选择培养基对融合细胞进行初步筛选，需要淘汰的融合细胞为B淋巴细胞B淋巴细胞以及骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞，而保留融合的B细胞瘤细胞即杂交瘤细胞；随后将选出的细胞多倍稀释，接种在特定细胞培养板上，使这些单细胞克隆生长，最终选出能稳定分泌特定抗体(抗WMV单克隆抗体)的杂交瘤细胞。(3)将选出的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔制备单抗腹水，一段时间后收集并纯化腹水，进行抗体效价和类型的测定。也可对克隆的杂交瘤细胞进行体外培养，更能持久地得到单一的抗体。单抗比一般抗体优越得多，其纯度高、灵敏度高、识别抗原部位专一。(4)抗WMV的单克隆抗体还可作为特异性探针，利用抗原抗体杂交方法找出能与探针特异性结合的基因表达产物，进而实现从抗病性强的西瓜植株中获取抗病目的基因，该目的基因能否在其他植物体内稳定存在并遗传的关键是目的基因是否整合到受体细胞的染色体上。答案：(1)聚乙二醇(或PEG)B淋巴细胞(2)融合的B淋巴细胞B淋巴细胞、融合的骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞抗WMV单克隆抗体(3)体外培养纯度高、灵敏度高、识别抗原部位专一(4)抗原抗体杂交目的基因是否整合到受体细胞的染色体上
