1、第三节蛋白质工程1简述蛋白质工程。2蛋白质的分子设计。(难点)3蛋白质工程的应用。(重点)蛋 白 质 的 分 子 设 计1蛋白质工程(1)依据:蛋白质的精细结构和生物活性之间的关系。(2)改造对象:利用生物技术手段对蛋白质的DNA编码序列或直接对蛋白质进行有目的的改造。(3)产物:创造出自然界本不存在的、具有优良特性的蛋白质分子,也就是产生新的蛋白质。(4)本质:改造控制该蛋白质合成的基因结构。2蛋白质的分子设计(1)小范围改造对已知结构的蛋白质进行少数氨基酸的替换。(2)蛋白质拼接组装对不同来源的蛋白质进行拼接组装。(3)蛋白质从头设计从氨基酸的排列顺序出发,设计制造出自然界不存在的全新蛋白
2、质。3蛋白质工程的基础蛋白质工程的基础是基因工程。所以蛋白质工程又叫第二代基因工程。蛋白质分子的设计是一项复杂而艰巨的工程,其基本流程可以用下图表示:探讨:构建新的蛋白质模型是分子设计的关键环节,你认为构建蛋白质模型的依据是什么?提示:构建蛋白质模型的依据是控制这种蛋白质合成的基因以及蛋白质的空间结构。探讨:通过DNA合成形成的新基因怎样才能得到准确的表达?提示:通过基因工程技术,将新基因导入大肠杆菌等受体细胞中,新基因在受体细胞中指导合成新的蛋白质。探讨:有的学者认为,蛋白质工程本身也是研究蛋白质结构和功能的一种有力工具。你是怎么看待的?提示:这些学者认识恰当,蛋白质结构直接影响其功能活性,
3、要想研究蛋白质结构与功能的关系,蛋白质工程就是有力工具,利用这种工具可以改变蛋白质的空间结构,探究功能的改变而做出相应的科学结论。1蛋白质工程的概念蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。2蛋白质工程的目标是根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计。由于基因决定蛋白质,因此要对蛋白质的结构进行设计改造,最终还必须通过改造基因来完成。3蛋白质工程的基本途径从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)。1下
4、列关于蛋白质工程的基本流程中正确的是()蛋白质分子结构设计DNA合成预期蛋白质功能根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列ABCD【解析】蛋白质工程根据人们的需要首先要预期相应功能,然后对其空间结构进行设计,目前这一步是科学家们仍未完全掌握的,根据相应的氨基酸推导出基因中碱基序列,再利用人工合成法合成相应的目的基因。【答案】C2胰岛素可以用于治疗糖尿病,但是胰岛素被注射到人体后,会堆积在皮下,要经过较长的时间才能进入血液,而进入血液的胰岛素又容易分解,因此,治疗效果受到影响。如图是用蛋白质工程设计速效胰岛素的生产过程,请据图回答有关问题: 【导学号:99310012】(1)构建新的蛋白质模型是蛋白质工
5、程的关键,图中构建新的胰岛素模型的主要依据是_。(2)通过DNA合成形成的新基因应与_结合后转移到_中才能得到准确表达。(3)若要利用大肠杆菌生产速效胰岛素,需用到的生物工程有_、_和发酵工程。(4)图解中从新的胰岛素模型到新的胰岛素基因的合成的基本思路是什么?_【解析】(1)蛋白质工程首先要根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计,因此,题图中构建新的胰岛素模型的主要依据是预期胰岛素的功能,即速效胰岛素。(2)合成的目的基因应与载体结合,构建基因表达载体后导入受体细胞中才能表达。(3)利用蛋白质工程生产速效胰岛素,需合成新的胰岛素基因,改造好的目的基因需要通过基因工程来生产
6、基因产物,并在生产中要借助工程菌,所以还需要发酵过程,因此,此过程涉及蛋白质工程、基因工程、发酵工程。(4)由新的胰岛素模型到构建新的胰岛素基因,其基本思路是根据新的胰岛素中氨基酸的序列,推测出其基因中的脱氧核苷酸序列,然后利用DNA合成仪来合成出新的胰岛素基因。【答案】(1)胰岛素的预期功能(2)载体大肠杆菌等受体细胞(3)蛋白质工程基因工程(4)根据新的胰岛素中氨基酸的序列,推测出其基因中的脱氧核苷酸序列,然后利用DNA合成仪合成出新的胰岛素基因。蛋 白 质 工 程 的 应 用 及 与 基 因 工 程 的 比 较蛋白质工程的应用1提高蛋白质的稳定性实例:将T4溶菌酶第3位上的异亮氨酸改成半
7、胱氨酸,使其获得了较强的耐热特征。2改变蛋白质的活性实例:利用蛋白质工程技术对组织纤溶酶原激活物(tPA)进行改造,可增加其溶栓效能。3合成嵌合抗体嵌合抗体是指保留鼠单克隆抗体的可变区,用人抗体的恒定区替换鼠单克隆抗体的恒定区,特点是嵌合抗体的抗原性显著下降,而抗体的特异识别功能没有丧失。探讨:猪的胰岛素用于降低人体血糖浓度效果不明显,原因是猪胰岛素分子中有一个氨基酸与人的不同。为了使猪胰岛素用于临床治疗糖尿病,用蛋白质工程中蛋白质分子设计的最佳方案是什么?提示:对猪胰岛素进行一个不同氨基酸的替换。探讨:对天然蛋白质进行改造,是直接对蛋白质分子进行操作来实现的吗?提示:不是,由于基因决定蛋白质
8、,因此要对蛋白质的结构进行设计改造,最终必须通过基因改造来完成。探讨:蛋白质工程是新崛起的一项生物工程,又称第二代基因工程。上图为蛋白质工程流程图,图中A、B在遗传学上依次表示了什么过程?提示:转录和翻译。蛋白质工程与基因工程的比较比较项目基因工程蛋白质工程操作对象基因基因操作水平DNA分子水平DNA分子水平操作过程获取目的基因构建基因表达载体将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定确定蛋白质的功能蛋白质应有的高级结构蛋白质应具备的折叠状态蛋白质应有的氨基酸序列应有的碱基序列合成DNA表达出蛋白质实质定向改造生物的遗传特性,以获得人类需要的生物类型或生物产品定向改造或生产人类所需的蛋白质结果
9、生产人类需要的基因产物(自然界已有的蛋白质)可以生产自然界没有的、不存在的新蛋白质联系蛋白质工程是以基因工程为基础的1科学家将干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达,使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸,结果大大提高了干扰素的抗病活性,并且提高了储存稳定性。该生物技术为()A基因工程B蛋白质工程C基因突变D细胞工程【解析】由于对蛋白质工程和基因工程之间关系的不明确,可能导致误选A。基因工程是通过对基因的操作,将符合人们需要的目的基因导入适宜的生物体,使其高效表达,从中提取所需蛋白质,或表现出某种性状,蛋白质产品仍然为天然存在的蛋白质。而蛋白质工程却是对控制蛋白质合成的基因进行改造,从而实现对
10、其编码的蛋白质的改变,所得到的已不是天然蛋白质。题目中的操作涉及的基因显然不再是原来的基因,其合成的干扰素也不是天然的干扰素,而是经过改造的人类所需要的蛋白质,因而整个过程利用的生物技术为蛋白质工程。【答案】B2.干扰素是动物体内合成的一种蛋白质,可以用于治疗病毒感染和癌症,但体外保存相当困难,如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸,就可在70 条件下保存半年,给广大患者带来福音。(1)蛋白质的合成是受基因控制的,因此获得能够控制合成“可以保存的干扰素”的基因是生产的关键,依据蛋白质工程原理,设计实验流程,让动物生产“可以保存的干扰素”:(2)基因工程和蛋白质工程相比较,基因工程在原则上只能生
11、产_的蛋白质,不一定符合_需要。而蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过_或_,对现有蛋白质进行_或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活需要。(3)蛋白质工程实施的难度很大,原因是蛋白质具有十分复杂的_结构。(4)对天然蛋白质进行改造,应该直接对蛋白质分子进行操作,还是通过对基因的操作来实现?其原因是什么?_【解析】蛋白质工程的操作流程是:预期蛋白质的功能设计预期的蛋白质结构推测氨基酸序列确定相对应的脱氧核苷酸序列。基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质,而蛋白质工程却可以生产自然界不存在的蛋白质。蛋白质工程直接操作的对象是基因。【答案】(1)预期蛋白质的功能
12、预期的蛋白质结构应有的氨基酸序列相对应的脱氧核苷酸序列(基因)(2)自然界已存在人类生产和生活基因修饰基因合成改造(3)空间(或高级)(4)应该通过对基因的操作来实现对天然蛋白质的改造。首先,任何一种天然蛋白质都是由基因编码的,改造了基因也就是对蛋白质进行了改造,而且改造过的蛋白质可以通过改造过的基因遗传下去;如果对蛋白质直接改造,即使改造成功,被改造过的蛋白质分子也无法遗传。其次,对基因进行改造比对蛋白质直接进行改造要容易操作,难度要小得多。1下列哪项不是蛋白质工程的研究内容()A分析蛋白质分子的精细结构B对蛋白质进行有目的的改造C分析氨基酸的化学组成D按照人的意愿将天然蛋白质改造成新的蛋白
13、质【解析】蛋白质工程就是指根据蛋白质的精细结构和功能之间的关系,按照人的意愿改造蛋白质分子,形成自然界中不存在的蛋白质分子,对蛋白质的改造包括氨基酸的种类、数量和排列顺序,但不包括氨基酸的化学组成。【答案】C2蛋白质工程中对蛋白质分子进行设计时,主要包括哪几种() 【导学号:99310013】进行少数氨基酸的替换对不同来源的蛋白质的拼接从氨基酸的排列顺序出发设计全新的蛋白质直接改变蛋白质的空间结构ABCD【解析】蛋白质工程中对蛋白质分子进行设计时,不能直接改变蛋白质的空间结构。但是能进行少数氨基酸的替换,能对不同来源的蛋白质进行拼接,能够从氨基酸的排列顺序出发设计全新的蛋白质。【答案】B3蛋白
14、质工程被称为第二代基因工程,目前已成为研究蛋白质结构和功能的重要手段。如图为蛋白质工程的流程图(自右向左),请据图回答以下问题:(1)与基因工程相比较,蛋白质工程产物具备的特点是:_。(2)图中的步骤和分别为_、分子设计。(3)如果已知mRNA的碱基序列是AUCCAGGUC,要合成对应的DNA,需要的原料是四种_,所用的酶是_;合成DNA的对应碱基对序列是_。(4)由图可知,要改造蛋白质结构,最终是通过改造基因来实现的。请说明原因:_。(5)从以上流程图可以看出,蛋白质工程是以_为基础并延伸出来的包含多学科的综合科技工程领域。【解析】(1)蛋白质工程可以生产出原来自然界不存在的新的蛋白质。(2
15、)步骤是由氨基酸序列推测出脱氧核苷酸序列进行的DNA合成过程。(3)DNA合成的原料是4种游离的脱氧核苷酸,由mRNA合成DNA是逆转录需要逆转录酶。合成的DNA是双链的,根据碱基互补配对原则,应该是ATCCAGGTCTAGGTCCAG(4)改造基因的操作比直接改造蛋白质要容易,且改造基因后这种性状是可以遗传的,而改造蛋白质后还需要对新合成的再改造。(5)蛋白质工程是在基因工程的基础上的延伸,又被称为第二代基因工程。【答案】(1)可生产出自然界不存在的蛋白质(2)DNA合成(3)脱氧(核糖)核苷酸反(逆)转录酶ATCCAGGTCTAGGTCCAG(4)改造基因的操作更容易,且改造后可以遗传(5
16、)基因工程4已知生物体内有一种蛋白质(P),该蛋白质是一种转运蛋白,由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸,240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸,改变后的蛋白质(P1)不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性。回答下列问题:(1)从上述资料可知,若要改变蛋白质的功能,可以考虑对蛋白质的_进行改造。(2)以P基因序列为基础,获得P1基因的途径有修饰_基因或合成_基因,所获得的基因表达时是遵循中心法则的,中心法则的全部内容包括_的复制;以及遗传信息在不同分子之间的流动,即:_。(3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过_和_,进而确定相对应的脱
17、氧核苷酸序列,据此获得基因,在经表达、纯化获得蛋白质,之后还需要对蛋白质的生物_进行鉴定。【解析】(1)从题述资料可知,若要改变蛋白质的功能,可以考虑对蛋白质的氨基酸序列进行改造。(2)以P基因序列为基础,获得P1基因的途径有二:修饰P基因,合成P1基因;所获得的基因表达时是遵循中心法则的,中心法则的全部内容包括DNA和RNA的复制,以及遗传信息在不同分子之间的流动,即DNARNA、RNADNA、RNA蛋白质。(3)蛋白质工程的过程为:预期蛋白质功能设计预期的蛋白质结构推测应有氨基酸序列找到对应的脱氧核苷酸序列(基因)。据此获得基因,再经表达、纯化获得蛋白质,之后还需要对蛋白质的生物功能进行鉴
18、定。【答案】(1)氨基酸序列(或结构)(2)PP1DNA和RNADNARNA、RNADNA、RNA蛋白质(或转录、逆转录、翻译)(3)设计蛋白质结构推测氨基酸序列功能课堂小结:网络构建核心回扣1.蛋白质工程直接研究的是蛋白质的精细结构和生物活性之间的关系。2.蛋白质工程的实质是利用生物技术手段对蛋白质的DNA编码序列即基因进行改造。3.蛋白质工程可创造出自然界不存在的、具有优良特性的蛋白质。4.利用蛋白质工程改造或者设计制造出的人工蛋白,在活性、稳定性及抗原性等方面都优于天然蛋白质。学业分层测评(三) (建议用时:45分钟) 学业达标1下列关于蛋白质工程的叙述中,不正确的是()A蛋白质工程能定
19、向改造蛋白质分子的结构,使之更加符合人类的需要B蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改变分子的结构C蛋白质工程能产生自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子D蛋白质工程的操作起点是从预测蛋白质功能出发,设计出相应的基因,并借助基因工程实现的【解析】蛋白质工程实际操作还是对基因进行操作,而不是对蛋白质进行操作。【答案】B2添加在洗衣粉中的某种酶在低温下活性较低,影响了洗衣粉的洗涤效果。如果让你用生物工程的方法改变此酶的特性,首先考虑的是()A基因工程B蛋白质工程C诱变D细胞工程【解析】蛋白质工程可以改造酶的结构,通过改造蛋白质分子中某些活性部位的一个或几个氨基酸残基,有目的地提高酶适
20、应低温的能力,进而提高洗衣粉在低温时的洗涤效果。【答案】B3科学家为提高玉米中赖氨酸含量,计划将天冬氨酸激酶的第352位的苏氨酸变成异亮氨酸,将二氢吡啶二羧酸合成酶中104位的氨基酸由天冬氨酸变成异亮氨酸,就可以使玉米叶片和种子中的游离赖氨酸含量分别提高5倍和2倍,下列对蛋白质的改造,操作正确的是()A直接通过分子水平改造蛋白质B直接改造相应的mRNAC对相应的基因进行操作D重新合成新的基因【解析】蛋白质工程的目的是对蛋白质进行改造,从而使蛋白质功能可以满足人们需求。而蛋白质功能与其高级结构密切相关,蛋白质高级结构又非常复杂,所以直接对蛋白质改造非常困难,而蛋白质是由基因控制合成的,对基因进行
21、操作却容易得多。另外,改造后的基因可以遗传,如对蛋白质直接改造,即使成功也不能遗传。【答案】C4下列说法正确的是() 【导学号:99310014】A蛋白质工程和基因工程的目的都是获得人类需要的蛋白质,所以二者没有区别B基因工程是蛋白质工程的关键技术C通过蛋白质工程改造后的蛋白质有的仍然是天然的蛋白质D蛋白质工程是在蛋白质分子水平上直接改造蛋白质的【解析】蛋白质工程的目标是根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计。其中,基因工程是关键技术,是蛋白质工程的基础,因为对蛋白质结构的改造是通过改造基因来实现的,所以蛋白质工程是在基因水平上改造蛋白质,改造后的蛋白质不再是天然的蛋白质。
22、【答案】B5下列不属于蛋白质工程成果的是()A改造酶的结构,提高酶的热稳定性B生产出人鼠嵌合抗体C将tPA分子中的天冬酰胺替换为谷氨酰胺D蛋白酶洗衣粉容易洗掉奶渍、血渍【解析】A、B、C三项所述都是对现存的蛋白质分子进行改造,属于蛋白质工程的成果。而加酶洗衣粉属于酶制剂的应用,不属于蛋白质工程的成果。【答案】D6蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是()A氨基酸结构B蛋白质空间结构C肽链结构D基因结构【解析】蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活需要。因此归根到底,还是要对基因进行改
23、造。【答案】D7蛋白质工程在设计蛋白质结构时的依据是()A基因功能B蛋白质功能C氨基酸序列DmRNA密码子序列【解析】根据结构与功能相适应的观点,依据蛋白质的功能,预期蛋白质的结构。【答案】B8蛋白质工程正确的基本操作程序是()蛋白质分子结构合成DNA合成mRNA合成蛋白质的预期功能根据氨基酸的序列推出脱氧核苷酸的序列ABCD【解析】蛋白质工程的操作流程为:从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列。【答案】C9关于蛋白质工程的说法,正确的是()A蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作B蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子
24、C对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的D蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的【解析】蛋白质工程是根据人的需求,设计并合成自然界不存在的蛋白质分子。【答案】B10科学家对鼠源杂交瘤抗体进行改造,生产出效果更好的人鼠嵌合抗体,用于癌症治疗。如图表示形成人鼠嵌合抗体的过程,据图回答问题。 【导学号:99310015】(1)改造鼠源杂交瘤抗体,生产人鼠嵌合抗体,属于_(生物工程)的范畴。(2)图示过程是根据预期的_,设计_,最终必须对_进行操作,此操作中改变的是_。(3)经过改造的人鼠嵌合抗体,与鼠源杂交瘤抗体相比较,突出的优点是_(从免疫角度考虑)。(4)上述过程中对科学家来
25、说难度最大的是_。【解析】(1)通过图示可知人鼠嵌合抗体是通过人工设计而形成的具特定功能的蛋白质,其生产过程应属于蛋白质工程的范畴。(2)蛋白质工程的流程:预期蛋白质的功能设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)通过基因工程操作生产预期的蛋白质。(3)从免疫的角度考虑,对人体来说鼠源抗体为抗原,若利用人的抗体与之嵌合,则排异反应会减轻,对人体的负作用会减少。(4)由于蛋白质空间结构比较复杂,不易确定,所以成为蛋白质工程中最大的障碍。【答案】(1)蛋白质工程(2)嵌合抗体功能嵌合抗体的结构基因碱基对(3)对人体的不良反应减少(4)设计嵌合抗体的空间结构能力提升1
26、1蛋白质工程的基本原理是()A逆转录B碱基互补配对原则C中心法则D中心法则的逆过程【解析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求。其目标是根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质结构进行分子设计,但因为基因决定蛋白质,因此对蛋白质的结构进行设计改造,归根到底,还需对相应的基因进行操作,按要求进行修饰加工改造,使之能控制合成人类需要的蛋白质。即根据蛋白质结构推测mRNA,再推测DNA结构。【答案】D12从某海洋动物中获得一基因,其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1。目
27、前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物,首先要做的是()A合成编码目的肽的DNA片段B构建含目的肽DNA片段的表达载体C依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽D筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽【解析】紧扣蛋白质工程的流程(基本途径)进行分析。由题可知,多肽P1为抗菌性和溶血性均较强的多肽,要设计出抗菌性强但溶血性弱的多肽,即在P1的基础上设计出自然界原本不存在的蛋白质,用蛋白质工程技术可以实现。蛋白质工程的基本途径是:从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列。故要想在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物,首先要做的是依据P1的氨基
28、酸序列设计出多条模拟肽,然后进行改造,从而确定抗菌性强但溶血性弱的多肽的氨基酸序列。【答案】C13合成人鼠嵌合抗体属于蛋白质分子设计中的()A对已知蛋白质分子结构进行少数氨基酸替换B对不同来源的蛋白质进行拼接组装C设计制造自然界中全新的蛋白质D把两种不同的蛋白质组装成一种蛋白质分子【解析】人鼠嵌合抗体是由鼠抗体中的可变区与人抗体中的恒定区组装拼接而成的,是将两种不同来源的蛋白质分子进行拼接后形成的嵌合抗体。由于形成的融合蛋白质具有两种蛋白质的结构,所以能表现两种蛋白质的特性。【答案】B14糖尿病是近年来高发的“富贵病”,常见类型有遗传型糖尿病和型糖尿病。遗传型糖尿病的主要病因之一是胰岛受损。科
29、研机构作出如下设计:取糖尿病患者的细胞,将人的正常胰岛素基因导入其中,然后做细胞培养,诱导产生胰岛组织,重新植入患者的胰岛,使胰岛恢复功能。型糖尿病需要注射胰岛素治疗。目前临床使用的胰岛素制剂注射后120 min后才出现高峰,与人体生理状态不符。科研人员通过一定的工程技术手段,将胰岛素B链的28号和29号氨基酸互换,获得了速效胰岛素,已通过临床试验。 【导学号:99310016】(1)对遗传型糖尿病进行基因治疗的方案中,胰岛素基因称为_,实验室中要先对该基因利用_技术进行扩增。将该基因导入正常细胞所用的方法是_。(2)对遗传型糖尿病患者进行治疗的基因工程步骤中的核心步骤是_。(3)科研人员利用
30、蛋白质工程合成速效胰岛素,该技术的实验流程为:其中,流程A是_,流程B是_。(4)与基因工程相比,蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因_或基因_,对现有蛋白质进行_,制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产生活需要。【解析】(1)根据题意在进行基因治疗时,胰岛素基因是目的基因,在体外条件下可利用PCR技术对其进行扩增,在基因工程中将目的基因导入动物细胞的常用方法是显微注射法。(2)基因工程操作的核心步骤是基因表达载体的构建。(3)根据蛋白质工程的流程示意图,可知流程A是根据预期蛋白质的功能设计蛋白质的三维结构,然后推测相应的氨基酸序列,最后找到对应的脱氧核苷酸序
31、列。(4)与基因工程相比,蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产生活需要。【答案】(1)目的基因PCR显微注射法(2)基因表达载体构建(目的基因与运载体结合)(3)预期蛋白质的功能相应的氨基酸序列(4)修饰合成改造15下图是从酵母菌中获取棉株需要的某种酶基因的流程,结合所学知识及相关信息回答下列问题。(1)图中cDNA文库_(填“大于”、“等于”或者“小于”)基因组文库。(2)过程提取的DNA需要_的切割,B是_过程。(3)为在短时间内大量获得目的基因,可用_扩增的方法,其原理是_。(4
32、)农杆菌中的Ti质粒上的TDNA具有_的特点。目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是_,可以用_技术进行检测。(5)如果要想使该酶活性更高或具有更强的耐受性,需要对现有蛋白质进行改造,这要利用基因工程的延伸蛋白质工程。首先要设计预期的_,再推测应有的氨基酸序列,找到相对应的_。【解析】(1)cDNA文库仅包含部分基因,小于基因组文库。(2)过程提取目的基因需要限制性内切酶切割,B是用反转录法获取目的基因的过程。(3)为在短时间内大量获得目的基因,可用PCR技术,原理是DNA双链复制。(4)农杆菌中的Ti质粒上的TDNA具有可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上的特点。目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是目的基因是否整合到植物细胞染色体的DNA上,可以用DNA分子杂交技术进行检测。(5)要想使该酶活性更高或具有更强的耐受性,需要对现有蛋白质进行改造。即先要设计预期的蛋白质结构,再推测应有的氨基酸序列,找到相对应的脱氧核苷酸序列。【答案】(1)小于(2)限制性内切酶反转录(3)PCR技术DNA双链复制(4)可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上目的基因是否整合到植物细胞染色体的DNA上DNA分子杂交(5)蛋白质结构脱氧核苷酸序列