1、动物细胞融合技术与单克隆抗体【合格考全员做】(学业水平一、二)1用于诱导动物细胞融合的病毒需要灭活，灭活的目的是使病毒()A易于促进细胞的融合B失去感染能力C易被抗体消灭D没有抗原结构2动物细胞融合的目的中，最主要的是()A克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍B制备单克隆抗体C培育新物种D生产杂交细胞3下列关于动物细胞融合的说法，不正确的是()A细胞融合前要用酶解法分散成单个细胞B细胞融合的原理是细胞膜的流动性C融合后得到的杂交细胞能表现出两个亲本细胞的特点D融合后得到的杂交细胞具有两个细胞核4下列有关单克隆抗体制备的叙述，正确的是()A先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠，再从小鼠脾脏中分离出B淋巴细胞
2、B体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清和一些抗生素C为避免病毒感染，需用聚乙二醇诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合D单克隆抗体制备技术和植物体细胞杂交技术均依据细胞的全能性原理5单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是()A特异性强、灵敏度高B与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌6单克隆抗体技术在生物工程中占有重要的地位，下列有关单克隆抗体应用的叙述错误的是()A作为诊断试剂，具有准确、高效、快速、简易的优点B作为诊断试剂，可定位诊断肿瘤、心血管畸
3、形、白化病等疾病C从临床试验来看，单克隆抗体主要用于癌症治疗D在“生物导弹”中，单克隆抗体的作用是定位而不是杀伤7在现代生物科技的应用中，不需要进行检测与筛选的是 ()A动物细胞融合获得杂交细胞B植物体细胞杂交技术获得杂种植株C植物组织培养中的突变体利用D核移植得到的克隆动物8下列关于动物细胞融合与单克隆抗体制备的叙述中，正确的是()A动物细胞经PEG诱导融合后再通过培养能得到优良动物个体B单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂C杂交瘤细胞是B淋巴细胞癌变的结果D单克隆抗体和传统方法生产的抗体化学本质不同9德国科学家柯勒和阿根廷科学家米勒斯坦由于发展了单克隆抗体技术，完善了极微量蛋白质的检测
4、技术而获得了诺贝尔生理学或医学奖。如图是单克隆抗体制备示意图，请据图回答下列问题。(1)据图可知，_技术是动物细胞工程技术的基础，而_技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。(2)图中过程1常用的促融剂是_，过程2常在_培养基中完成。(3)A细胞为_细胞，其特点是_。(4)合成的单克隆抗体最终可以从_和_中提取。【等级考选学做】(学业水平三、四)10如图，核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶。制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。关于筛选原理的叙述
5、正确的是()A免疫的B细胞及其相互融合细胞因全合成途径被A阻断，在HAT培养基上不能增殖B骨髓瘤细胞及其相互融合细胞因无法进行上述两个途径，而在HAT培养基上不能增殖C杂交瘤细胞因为可进行上述两个途径，能在HAT培养基上大量增殖DHAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞，既能大量增殖又能产生较高纯度的目标抗体11将人细胞与小鼠细胞融合，培养出的杂种细胞可能会随机丢失来自人细胞的染色体。在丢失人的1号染色体的融合细胞中，不能合成人的尿苷单磷酸激酶。下列有关叙述中不合理的是()A与人和小鼠细胞相比，融合细胞发生了遗传物质的改变B研究方法中需要选择适当的培养基和细胞融合诱导技术C融合细胞经过培养，能实现
6、细胞的全能性D尿苷单磷酸激酶的基因很可能在1号染色体上12某小鼠生活过程中被多种病原体感染过，科学家以该小鼠为实验材料，利用单克隆抗体技术，获得了抗某种病原体的髙纯度单克隆抗体。下列有关叙述错误的是()A被多种病原体感染过的小鼠体内会产生多种浆细胞B经细胞融合后形成的单个杂交瘤细胞可分泌多种特异性抗体C使用人鼠嵌合单克隆抗体进行疾病治疗可减少副作用的发生D单克隆抗体的制备过程中应用了动物细胞培养和细胞融合技术13下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图，没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列说法不正确的
7、是()A单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的B活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程C在治疗中，应先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物导弹D单克隆抗体特异性强，能减轻阿霉素对正常细胞的伤害14下图所示为几项生物工程技术综合实验研究的流程图。下列相关叙述，不正确的是()A整个流程运用的生物技术有转基因、动物细胞培养以及细胞融合等B过程是诱导干细胞中基因选择性表达的结果C过程得到的Z细胞还需要进行克隆化培养和抗体检测及多次筛选D图中的肝细胞、神经细胞和Y细胞具有相同的基因组成15胃癌是我国发生率很高的一种恶性疾病，制备抑制胃癌细胞增殖的单克隆抗体对治疗胃癌具有重要意义。抗胃癌单克隆抗体制备过程如
8、下图。(1)抗胃癌单克隆抗体制备过程中要用到_技术。(2)甲代表_细胞。(3)诱导骨髓瘤细胞与甲融合，可用的诱导因素有_等(写出两种)。(4)为筛选出丙，需将乙放入含有5%CO2的混合气体的培养箱中培养，其中CO2的主要作用是_。通过检测细胞是否产生所需的专一抗体，筛选出丙，该过程中所选用的抗原是_。(5)在甲、丙及骨髓瘤细胞中，只有丙经培养后，可获得大量的抗胃癌单克隆抗体，原因是_。【素养养成练】16动物细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。现在已经广泛应用于多种学科的研究工作中，特别是新发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径。研究表明DNA合成有两条途径：“
9、S途径”和“D途径”，淋巴细胞(浆细胞)有“S途径”和“D途径”；骨髓瘤细胞只有“D途径”；HAT培养液中氨基嘌呤可以阻断DNA合成的“D途径”。下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。回答下列问题：(1)_技术是单克隆抗体技术的基础。(2)单克隆细胞是指_。(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是_。(4)杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞的_的特点，又具备淋巴细胞的_的特点。(5)图示过程，有两次筛选。第一次是用HAT培养液筛选出杂交瘤细胞，那么淋巴细胞(浆细胞)在HAT培养液中不生长的原因是_，骨髓瘤细胞在HAT培养液中不生长的原因是_。课后分层检测案8动物细胞融合技术与单克隆抗体1解析
10、：用于诱导动物细胞融合的病毒需要灭活，灭活的目的是使病毒失去感染能力，以免使细胞死亡。答案：B2解析：植物体细胞杂交主要是为了克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍，以培育新品种。动物细胞的全能性受到限制，目前只见到高度分化细胞的细胞核在去核卵母细胞中表现全能性，还未见到融合细胞细胞核表现出全能性的例子，因此动物细胞融合不能用来培育新物种。生产杂交细胞，也不是动物细胞融合的主要目的。答案：B3解析：动物细胞融合前需用胰蛋白酶处理将组织细胞分散成单个细胞，A正确；动物细胞融合的原理是细胞膜具有流动性，B正确；融合后得到的杂交细胞获得了两个亲本的遗传物质，能表现出两个亲本细胞的特点，C正确；融合后得到的
11、杂交细胞是单核细胞，D错误。答案：D4解析：先利用特定的抗原蛋白注射小鼠，再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞，蛋白质饲喂小鼠，水解失去活性，A错误；由于培养液中缺乏天然培养基中某些无法替代的成分，则体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清，添加抗生素进行消毒，B正确；诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合的方法有离心、电刺激，聚乙二醇、灭活病毒等，C错误；细胞的全能性是指最后能获得完整个体，而单克隆抗体制备依据的是动物细胞融合的原理，D错误。答案：B5解析：抗体是由B淋巴细胞分泌的，每一种B淋巴细胞只能分泌一种抗体。要想获得大量单一抗体，需要将某一种B淋巴细胞大量克隆，但是在体外培养的条件下，B淋巴细胞
12、不能无限增殖。由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞，能在体外培养的条件下大量增殖，并分泌单克隆抗体。单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强、灵敏度高，与抗癌药物结合可制成“生物导弹”，直接作用于癌细胞。答案：C6解析：单克隆抗体在诊断的应用上，具有准确、高效、简易、快速的优点，A正确；白化病的表现型非常直观，不需要单克隆抗体定位诊断，B错误；临床试验中，单克隆抗体主要用于癌症治疗，也有少量用于其他疾病的治疗，C正确；在“生物导弹”中，单克隆抗体作为瞄准装置，作用是定位，起杀伤作用的是与其相连接的药物，D正确。答案：B7解析：动物细胞融合时，只考虑两两融合就有3种类型的细胞，所以需要筛选杂交
13、细胞，A需要；利用植物体细胞杂交技术获得杂种植株时，需要筛选杂种细胞，B需要；突变体利用需要筛选有利的变异个体，C需要；克隆动物属于无性生殖，能保持亲本的优良遗传特性，不需要进行筛选，D不需要。答案：D8解析：由于动物细胞的全能性受到限制，动物细胞融合形成的杂种细胞一般不能培育成动物个体，A错误；单克隆抗体特异性强，灵敏度高，可大量制备，最广泛的用途是用作体外诊断试剂，B正确；杂交瘤细胞是骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合而成的，不是B淋巴细胞癌变的结果，C错误；单克隆抗体和传统方法生产的抗体化学本质相同，都是蛋白质，D错误。答案：B9解析：(1)动物细胞工程技术的基础是动物细胞培养技术，细胞融合是在
14、自发或人工诱导下，两个或多个细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞，该技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。(2)过程1中细胞融合的诱导物种类很多，常用的方法主要有生物法(如利用灭活病毒诱导)、化学法(如利用聚乙二醇诱导)和物理法(如利用电融合法诱导)。目前应用最广泛的是利用聚乙二醇诱导，因为它易得、简便，且融合效果稳定。动植物细胞融合方法不完全相同，生物法(如利用灭活病毒诱导)是动物细胞融合所特有的。过程2是单克隆抗体技术的第一次筛选(在特定的选择性培养基上)，目的是筛选出骨髓瘤细胞与经过免疫的B淋巴细胞融合的杂交瘤细胞。(3)A细胞为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞与经过免疫的
15、B淋巴细胞的遗传物质，因而具有既能迅速大量增殖，又能产生专一性抗体的特点。(4)杂交瘤细胞的培养一般有体外培养和体内培养两种方式，体外培养是在液体培养基中培养，培养后从培养液中提取单克隆抗体；体内培养是在小鼠腹腔中培养，培养后从小鼠腹水中提取单克隆抗体。答案：(1)动物细胞培养细胞融合(2)灭活病毒(或聚乙二醇、电融合法)选择性(3)杂交瘤既能迅速大量增殖，又能产生专一性抗体(4)培养液小鼠腹水10解析：免疫的B细胞及其互相融合细胞是有补救合成途径的，但是因为这两种细胞本身不增殖，所以在HAT培养基上不会有这两种细胞的增殖，A错误；骨髓瘤细胞及其互相融合细胞因无法进行上述两个途径而在HAT培养
16、基上不能增殖，B正确；杂交瘤细胞因为可以进行补救合成，所以能在HAT培养基上大量增殖，C错误；HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞，能大量增殖，也能产生抗体，但并不都能产生高纯度的目标抗体，D错误。答案：B11解析：融合细胞会随机丢失来自人细胞的染色体，即发生了遗传物质的改变，A正确；适当的培养基用来选择融合细胞，细胞融合时常用PEG、灭活病毒和电融合法来诱导融合，B正确；该过程没有将杂种细胞培养成个体，不能体现细胞的全能性，C错误；在丢失人的1号染色体的融合细胞中，不能合成人的尿苷单磷酸激酶，说明尿苷单磷酸激酶的基因很可能在1号染色体上，D正确。答案：C12解析：被多种病原体感染过的小鼠体内，B
17、细胞会增殖分化形成多种不同的浆细胞，进而产生多种抗体去对付不同的抗原，A正确；经细胞融合后形成的单个杂交瘤细胞，只能产生一种抗体，B错误；使用人鼠嵌合单克隆抗体进行疾病治疗可减少副作用的发生，C正确；单克隆抗体的制备过程中应用了细胞融合技术和动物细胞培养技术，D正确。答案：B13解析：单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和B细胞融合形成的杂交瘤细胞合成和分泌的，A正确；活化阿霉素抑制DNA和RNA的合成，DNA合成要经过DNA的复制，RNA的合成要经过DNA的转录，B正确；根据图中信息可知，阿霉素的活化需要生物导弹携带的碱性磷酸酶，所以在治疗中，应先注射生物导弹再注射非活化磷酸阿霉素，但不能间隔时间太长，
18、因为没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后会被机体清除，C错误；单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备的特点，根据特异性强这一特点，在该过程中是针对肿瘤细胞的，所以能减轻阿霉素对正常细胞的伤害，D正确。答案：C14解析：整个流程运用的生物技术有转基因、动物细胞培养以及细胞融合等，A正确；过程是干细胞再分化为其他组织、器官的细胞，是干细胞中基因选择性表达的结果，B正确；过程是细胞融合形成杂交瘤细胞过程，得到的Z细胞还需要进行克隆化培养和抗体检测及多次筛选，C正确；图中的肝细胞、神经细胞均来自于甲鼠，具有相同的基因组成，Y细胞来自于乙鼠，其基因组成不同，D错误。答案：D15解析：(1)分
19、析可知，单克隆抗体制备过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。(2)甲细胞能产生抗体，表示已经免疫的B淋巴细胞。(3)诱导动物细胞融合，可用的诱导方法有物理法(离心、振动、电融合)、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒)。(4)动物细胞培养需要一定的气体环境，包括95%的空气和5%CO2，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。该过程中的目的是制备抑制胃癌细胞增殖的单克隆抗体，根据抗原与抗体的特异性结合特点，因此所选用的抗原是人的胃癌细胞。(5)甲能产生抗体，但不能在体外培养条件下无限增殖，但丙既能无限增殖又能产生抗体，因此甲、丙中只有丙经培养后，可获得大量的抗胃癌单克隆抗体。答案：(1
20、)动物细胞培养和动物细胞融合(2)免疫的B淋巴(3)聚乙二醇、灭活的病毒、离心、振动、电激(4)维持培养液的pH人的胃癌细胞(5)只有细胞丙既能无限增殖又能产生抗体16解析：(1)单克隆抗体技术的基础是动物细胞培养和动物细胞融合技术。(2)单个细胞增殖形成的细胞群为单克隆细胞。(3)与常规抗体相比，单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。(4)杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞的能在体外无限增殖和淋巴细胞的能产生专一性抗体的特点。(5)淋巴细胞不增殖，而骨髓瘤细胞的DNA合成途径被氨基嘌呤阻断而不能进行DNA复制，导致骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中生长。答案：(1)动物细胞培养、动物细胞融合(2)单个细胞增殖形成的细胞群(3)特异性强、灵敏度高、可大量制备(4)在体外大量增殖(无限增殖)分泌特异性抗体(5)缺乏在体外培养液中增殖的能力其DNA合成途径被氨基嘌呤阻断而不能进行DNA复制
