1、考点一植物细胞工程典例引领【典例】 (2014山东师大附中三模)下图是细胞融合示意图，请据图回答：(1)过程应使用_处理细胞，以去除植物细胞壁。(2)过程叫做_，该过程常用的诱导方法是_。(3)过程是细胞壁的再生过程，与此过程密切相关的细胞器是_。(4)过程中进行的细胞分裂方式是_，该过程先诱导细胞分裂形成_，再由它分化形成杂种植物幼苗。(5)若番茄细胞内含A个染色体，马铃薯细胞内含B个染色体，则番茄马铃薯细胞内含_个染色体；若对番茄和马铃薯采用杂交育种方法能成功的话，得到的后代应含_个染色体，若要得到可育的番茄马铃薯，必须用_来处理幼苗。这两种方法相比，体细胞杂交方法的优点是_。解析(1)过
2、程表示用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁。(2)过程是诱导去壁后得到的原生质体融合。(3)植物细胞壁的形成与高尔基体有关。(4)过程表示先脱分化形成愈伤组织，然后再分化形成试管苗。(5)植物体细胞杂交得到的番茄马铃薯细胞内含有的染色体数是两种植物染色体数之和即AB；番茄和马铃薯有性杂交得到的后代的染色体数是A/2B/2，此后代不可育，必须用秋水仙素处理幼苗。答案(1)纤维素酶和果胶酶(2)原生质体融合物理和化学法(电激/聚乙二醇诱导)(3)高尔基体(4)有丝分裂愈伤组织(5)AB(AB)/2秋水仙素克服远缘杂交不亲和的障碍1植物组织培养的过程2条件(1)离体：这是因为在生物体内基因的表达在空间和
3、时间上具有选择性。(2)营养条件：水、无机盐、维生素等营养物质，以及激素(生长素和细胞分裂素)。(3)环境条件适宜的温度、pH确保酶的活性。无菌这是因为细菌等微生物繁殖快，消耗营养物质多，同时产生有害的代谢产物，毒害植物细胞。光照这是因为光照有利于细胞内叶绿素的形成和光合作用的进行。3植物组织培养与植物体细胞杂交的比较名称植物组织培养植物体细胞杂交原理细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性和细胞的全能性过程应用繁殖培育新品种生产细胞产品克服远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种易错警示！(1)植物体细胞杂交获得的杂种细胞的类型有三种(以上图为例)：AA型、BB型、AB型，符合要求的只有AB型，需要进
4、行筛选。(2)杂种细胞形成的标志：新的细胞壁的生成。(3)杂种植株遗传物质的变化：杂种植株的变异类型属于染色体变异，杂种植株的染色体数通常是两亲本细胞染色体数目之和，杂种植株属于异源多倍体。跟进题组(2014湖北七市联考，40)育种工作者利用不同的方法进行了如下四组实验。请据图回答问题。(1)图过程由番茄韧皮部细胞形成幼苗A的过程需要经过_两个关键步骤，该过程依据的原理是_。(2)植物组织培养除了需要提供一定的营养、_、温度和光照外，还必须在_的条件下进行。(3)已知番茄的红果(Y)对黄果(y)为显性，少室(M)对多室(m)为显性，控制两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上。用红果多室(Y
5、ymm)番茄植株的花粉进行、有关实验，则过程中，从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是_。过程中植物体C的基因型为_(细胞A为两两融合细胞)。(4)图、过程中需要去除细胞壁，获得具有活力的_。(5)在图中过程中，经过鉴别和筛选后，通常植物体D能表现出两个亲本的遗传性状，根本原因是_。解析(1)图I中植物组织培养过程，需要经过脱分化和再分化两个关键步骤，其原理是植物细胞的全能性。(2)植物组织培养除了需要提供一定的营养、植物激素(生长素、细胞分裂素)、温度和光照外，还必须在无菌的条件下进行。(3)过程中，从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是有丝分裂。红果多室(Yymm)番茄植株产生的花粉基因型
6、为Ym、ym，故过程中植物体C的基因型为YYmm、Yymm或yymm。(4)植物体细胞杂交时，要用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，获得原生质体。(5)图中经植物体细胞杂交获得的植株具有两个亲本的遗传物质，能表现出两个亲本的遗传性状。答案(1)脱分化和再分化植物细胞全能性(2)植物激素(生长素、细胞分裂素)无菌(3)有丝分裂YYmm或Yymm或yymm(4)原生质体(5)具有两个亲本的遗传物质考点二动物细胞工程典例引领【典例】 (2014浙江外国语期中)下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究。据图回答相关问题。(1)X、Y、Z细胞的名称分别是_、_、_。(2)过程类似于植物组织培养
7、技术中的_过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较_。过程的实质是_。(3)过程中需用到的生物诱导剂是_。(4)处需要筛选，其目的是_。(5)用32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，细胞质中能测到32P的细胞器有_和_。解析(1)X、Y、Z细胞的名称分别是骨髓瘤细胞、抗原刺激过的B细胞、杂交瘤细胞。(2)过程是将甲小鼠的纤维母细胞诱导成诱导干细胞，相当于植物组织培养技术中的脱分化过程，与纤维母细胞相比诱导干细胞的全能性较高。过程是诱导干细胞分化成各种体细胞，细胞分化的实质是基因选择性表达。(3)诱导动物细胞融合，需用到的生物诱导剂是灭活的病毒。(5)核苷酸是核酸的基本组成单位，动物细胞中线
8、粒体含有少量DNA，核糖体是由蛋白质和rRNA构成的。因此用32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，则在线粒体和核糖体中能检测到32P。答案(1)骨髓瘤细胞抗原刺激过的(效应)B细胞杂交瘤细胞(2)脱分化高基因的选择性表达(3)灭活的病毒(4)筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞(5)核糖体线粒体1比较动物细胞培养、核移植与动物细胞融比较动物细胞培养核移植动物细胞融合原理细胞增殖动物细胞核的全能性细胞膜的流动性过程结果相同分化程度的细胞群与供体基本相同的个体杂交细胞关键环节细胞增殖(分裂)、细胞癌变核融合、细胞分化人工诱导细胞膜融合应用生产生物制品基因工程检测有毒物质加速良种繁育保护濒危物种生产医
9、用蛋白提供克隆器官、组织等获得杂种细胞，制备细胞产物如单克隆抗体特别提醒细胞贴壁和接触抑制悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。2植物体细胞杂交与动物细胞融合(单克隆抗体的制备)的比较植物体细胞杂交动物细胞融合(单克隆抗体的制备)原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理酶解法(纤维素酶、果胶酶)去除细胞壁注射特定抗原，免疫处理正常小鼠促融方法(1)物理法：离心、振动、电激等；(2)化学法：聚乙二醇(PEG)(1)物理法、化学法：与植物细胞融合相同；(2)
10、生物法：灭活的病毒意义和用途克服远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展杂交的亲本组合范围(1)制备单克隆抗体；(2)诊断、治疗、预防疾病跟进题组(2014河北衡水中学调研)如图为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图，请回答：(1)图示技术名称为_，该技术的基础是_技术。(2)操作所用的成纤维细胞应在_代以内；诱导融合运用了_原理，该过程中区别于原生质体融合的方法是用_处理。(3)HAT培养基属于_培养基，其中需要加入_等天然物质。(4)培养时pH一般为_；操作中加入乌本苷的目的是_。(5)如表所示为杂
11、交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4种酶(“”表示存在，“”表示不存在)，这4种酶均为单基因编码产生，据表判断，编码_酶的基因位于染色体2上。杂交细胞ABC人类染色体123酶mnpq答案(1)动物细胞融合动物细胞培养(2)10细胞膜的流动性灭活病毒(3)选择血浆(血清)(4)7.27.4除去成纤维细胞(5)m和p制备单克隆抗体过程中两次筛选的方法及目的项目第一次筛选第二次筛选筛选原因诱导融合后得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞筛选方法用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)才能生长用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群筛选目的得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞