1、课后训练一、选择题1在分离分解纤维素的微生物实验中，关于土壤取样的叙述不正确的是（）。A可选取深层的土壤作为样品B可选取树林中多年落叶形成的腐殖土作为样品C可选取树林中多年积累的枯枝败叶作为样品D可把滤纸埋在土壤中经过30天左右，再选取已烂的滤纸作为样品2表层土壤中纤维素分解菌的同化作用类型和异化作用方式分别是（）。自养型异养型需氧型厌氧型A B C D3刚果红染色时，加入刚果红应在（）。制备培养基时梯度稀释时倒平板时涂布时长出菌落时A B C D4两种刚果红染色法的结果是（）。 A均会出现透明圈B均不会出现透明圈C方法一出现，方法二不出现D方法一不出现，方法二出现5鉴别培养基是根据微生物的代
2、谢特点在培养基中加入一些物质配制而成的，这些物质是（）。A指示剂或化学药品B青霉素或琼脂C高浓度食盐D维生素或指示剂6要将能分解纤维素的细菌从土壤中分离出来，应将它们接种在（）。A加入伊红美蓝的鉴别培养基上B含有蛋白胨的固体培养基上C只含纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上D含四大营养要素的培养基上7在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前一般先进行选择培养，其主要目的是（）。A完全除去其他微生物B没有意义，去掉这一步更好C增加纤维素分解菌的浓度D使纤维素分解菌充分长大8在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的原因是（）。A可获得大量菌体B纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长C在液体培养
3、基中纤维素分解菌繁殖速度更快D用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌9通过分离分解纤维素的微生物实验，对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选，这只是分离提纯的第一步，还需要进行（）。A发酵产纤维素酶的实验B提取纤维二糖的实验C浓缩纤维素分解菌的实验D提取葡萄糖的实验10在纤维素分解菌的鉴定实验中，纤维素酶的测定方法一般是（）。A对纤维素进行定量测定B对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定C对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定D对纤维素分解菌进行定量测定二、非选择题11请分析下面的培养基配方，完成下面的问题。纤维素分解菌的选择培养基纤维素粉5 gNaNO31 gNa2HPO
4、47H2O1.2 gKH2PO40.9 gMgSO4 7H2O0.5 gKCl0.5 g 酵母膏0.5 g水解酪素0.5 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL。（1）上述配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？（2）这个培养基对微生物是否具有选择作用？ 如果具有，又是如何选择的？（3）你能否设计一个对照实验，说明选择培养的作用？12现在大力提倡无纸化办公，但是仍然不可避免的每年要产生大量的废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源乙醇。下图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工作流程，请回答相关问题。（1）自然界中环节需要的微生物大多分布在_的环境中。将从土
5、壤中获得的微生物培养在以_为碳源，并加入_的培养基上筛选周围有_的菌落。（2）如上所述的筛选中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节，且三种等量酶液中酶蛋白浓度相同，则你认为三种酶液的活性_（“一定相同”“不一定相同”“一定不同”），可以通过_进行定量测定。（3）根据测定结果，环节常选择木霉，则中获得的酶是_酶。该酶至少包括_三个组分。（4）生产中可以满足环节的常见菌种是_，为了确保获得产物乙醇，环节要注意_，过程要注意避免_。13目前，加酶洗衣粉中的蛋白酶主要是中温蛋白酶，最适酶活温度在50 左右，由于日常洗涤用水的温度达不到该温度，导致蛋白酶活性受到影响。适冷蛋白酶是从适冷鱼类体内分离
6、纯化或由深海适冷菌分泌出的酶类，最适酶活温度在20 左右，用其作为洗衣粉添加剂可在较低的温度下达到理想的洗涤效果。下图为分离可分泌蛋白酶的适冷菌的操作步骤，据图回答问题。（1）在将配制好的牛肉膏蛋白胨培养基分装到三角瓶中时，为避免培养基沾到瓶口，必须使用_进行分装，并及时进行_操作。（2）将扩大培养后的深海微生物用_法接种到含酪蛋白的固体培养基表面，在适宜条件下培养一段时间，挑出形成透明圈的菌落，即为初选出的适冷菌。（3）为进一步检测分离出的适冷菌分泌的适冷蛋白酶的最适酶活温度，将该菌按上图所示分7组进行培养，这7组实验间形成了_，_组所对应的温度为最适酶活温度。（4）由操作过程可知该适冷菌的
7、代谢类型为_。（5）将分离到的适冷菌接种到一定容积的牛肉膏蛋白胨液体培养基中，置于适宜条件下振荡培养，细菌数量将呈_增长，其环境容纳量主要取决于_。参考答案1. 答案：A深层土壤中纤维素含量少，纤维素分解菌的数量也少。2. 答案：B表层土壤含氧丰富，适合好氧菌的繁殖。3. 答案：C4. 答案：A5. 答案：A在培养基中加入青霉素或高浓度食盐的目的是抑制某些微生物的生长，而加维生素一般是为微生物提供生长因子，起不到选择或鉴别的作用，只有加入某种指示剂或化学药品后，某些微生物会与特定的化学物质发生特定的化学反应，而表现出特有的菌落特征，我们可以根据这些特征去判断属于哪种生物。6. 答案：C在只含纤
8、维素粉而无其他碳源的选择培养基上纤维素分解菌能够生长繁殖，其他微生物不能生长繁殖。7. 答案：C选择培养基中含有纤维素粉，主要适合于能产生纤维素酶的纤维素分解菌生长，所以选择培养的目的主要是增加纤维素分解菌的浓度，确保能够从样品中分离到所需要的微生物。8. 答案：C纤维素分解菌在固体培养基上也能大量繁殖，也能获得大量菌体。液体培养基中各种菌株混杂在一起，很难得到高纯度的纤维素分解菌。在对纤维素分解菌进行选择培养时，用液体培养基的目的是在液体培养基中纤维素分解菌繁殖速度更快。9. 答案：A对纤维素分解菌的鉴定，常用的方法是对分离的菌种进行发酵产纤维素酶的实验。10. 答案：B纤维素酶的测定方法一
9、般是对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定。11. 答案：（1）是液体培养基，原因是配方中无琼脂。（2）有选择作用，本配方中的碳源是纤维素， 所以能分解纤维素的细菌可以大量繁殖。（3）用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照。12. 解析：（1）废纸的主要成分是木质纤维，因而使其糖化的酶应为纤维素酶，由此得知中的产酶微生物应该大多分布在富含纤维素的环境中。能分解纤维素的微生物的分离筛选需要用到以纤维素为唯一碳源的培养基，若想直接从此选择培养基中筛选出分解纤维素的微生物，则可以利用直接在培养基中加入刚果红的方法，挑选周围有透明圈的菌落。（2）由于个体差异，不同菌的产酶量不一定相同，因此可以通过对纤
10、维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定来确定。（3）分解纤维素的酶是一种复合酶，包括C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶等组分。（4）在工业生产上通常利用酵母菌将葡萄糖液发酵产生酒精。发酵过程中要注意保证无氧条件，避免染上杂菌，使发酵失败。答案：（1）富含纤维素（或落叶较多等）纤维素刚果红透明圈（2）不一定相同对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖（3）纤维素C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶（4）酵母菌发酵装置密闭（或保证无氧条件等） 杂菌污染13. 解析：（2）由于培养后要挑取形成透明圈的菌落，因而适合用稀释涂布平板法接种。（3）适冷菌产生的蛋白酶活性越大，则分解培养基中的蛋白质越多，则菌落周围出现的透明圈越宽，因而透明圈与菌落直径比值最大组所对应的温度为最适酶活温度。答案：（1）三角漏斗灭菌（2）稀释涂布平板（3）（相互）对照透明圈与菌落直径比值最大（4）异养需氧型（5）S型（逻辑斯谛）营养物质的量（培养液的体积和浓度）