1、福建省福州市一中2019-2020学年高二生物下学期期末考试试题（含解析）一、单选题1. 下列对生物技术的理解，合理的是A. 基因工程的核心是将目的基因导入受体细胞B. 单克隆抗体是骨髓瘤细胞分泌的C. 用胚胎分割技术可获得性别不同的双胞胎D. 蛋白质工程可制造出自然界原本不存在的蛋白质【答案】D【解析】【分析】【详解】A、基因工程的核心是基因表达载体的构建，故A错误；B、单克隆抗体是骨髓瘤细胞和效应B细胞融合形成的杂交瘤细胞分泌的，故B错误；C、来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一，则获得同卵双胞胎性别相同，故C错误；D、蛋白质工程是以蛋白质的结
2、构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，故D正确。故选D【点睛】2. 不能克服远缘杂交的不亲和性的技术是（ ）A. 动物细胞融合B. 植物体细胞杂交C. 动物胚胎移植D. 基因工程【答案】C【解析】【分析】【详解】A、细胞融合技术可以克服元源杂交的不亲和性，A正确；B、植物体细胞杂交技术能克服杂交远缘的不亲和性，B正确；C、动物胚胎移植技术不能克服远缘杂交的不亲和性，C错误；D、基因工程技术能克服远缘杂交的不亲和性，D正确故选C【点睛】3. 下列关于构建人胰岛素基因表达载体并导入大肠杆菌的叙述，正确的是A. 表达载体中的胰岛素
3、基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得B. 有关的DNA聚合酶能识别并结合到启动子区域从而驱动转录C. 人胰岛素基因与基因探针能通过磷酸二酯键结合而形成杂交带D. 含目的基因的大肠杆菌表达出来的胰岛素不一定有生物学活性【答案】D【解析】【分析】本题考点主要涉及遗传信息的转录和翻译，以及基因工程的原理、技术和应用。【详解】A. 由于基因的选择性表达，在人的肝细胞中，没有胰岛素基因转录形成的mRNA，A错误；B. RNA聚合酶与启动子结合，启动转录过程，B错误；C. 人胰岛素基因与基因探针通过形成氢键形成杂交带，C错误；D. 含目的基因的大肠杆菌表达出来的是胰岛素原，没有生物学活性，需要加工后才能成
4、为胰岛素，D正确。【点睛】解答本题关键是正确理解基因的选择性表达，此外D选项也是易错点，需注意大肠杆菌是原核生物，没有复杂的蛋白质加工系统，因此无法表达出有生物活性的胰岛素。4. 在基因工程技术中，限制性核酸内切酶主要用于A. 目的基因的提取和导入B. 目的基因的提取和检测C. 目的基因与运载体的结合和导入D. 目的基因的提取和与运载体结合【答案】D【解析】【分析】考查基因工程技术中所用的工具-限制酶的作用，属于基本知识识记水平的考查，基础题。【详解】目的基因的导入用基因枪法、显微注射法等，没有用到限制酶，A错误. 目的基因的检测用分子杂交技术或病原体接种实验等，没有用到限制酶，B错误.目的基
5、因与运载体的结合用的是DNA连接酶，导入没有用到限制酶，C错误. 目的基因的提取用限制酶切割供体DNA，用同种限制酶切割运载体，以便于结合，D正确.【点睛】用同种限制酶剪切目的基因和质粒，获得相同的粘性末端，再用DNA连接酶形成重组质粒。5. 下列与基因工程无关的是A. 利用“工程菌”生产胰岛素B. 基因治疗C. 蛋白质工程D. 杂交育种【答案】D【解析】【分析】【详解】A、“工程菌”是指利用基因工程技术将外源基因导入受体细胞的过程，所以与基因工程有关，故A不合题意；B、基因治疗是指把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，所以与基因工程有关，故
6、B不合题意；C、蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因合成，对先有蛋白质进行改造或制造新的蛋白质，所以被形象地称为第二代基因工程，所以与基因工程有关，故C不合题意；D、杂交育种是利用基因重组的原理将具有不同优良性状的个体杂交，从子代杂合体中逐代自交选出能稳定遗传的符合生产要求的个体，属于常规育种，与基因工程无关，故D符合题意。故选D【点睛】6. 华南虎是国家一级保护动物，可采用试管动物技术进行人工繁殖，该技术包括的环节有转基因 核移植 体外受精 细胞培养 胚胎移植A. B. C. D. 【答案】B【解析】【分析】【详解】试管动物是通过体外受精技术获得的。以华南虎为例，从母虎体内取出卵细胞，若未成
7、熟，需通过细胞培养至成熟，再在试管或培养皿中完成受精，然后将发育正常的早期胚胎移植到受体子宫内着床、妊娠、发育，直至分娩。由此可知，该技术包括了体外受精和胚胎移植两个环节，因此正确选项为，故本题正确答案为B。【点睛】7. 软骨发育不全为常染色体显性遗传病，基因型为HH 的个体早期死亡。一对夫妻均为该病患者，希望通过胚胎工程技术辅助生育一个健康的孩子。下列做法正确的是()A. 将一个囊胚进行多等分，从中筛选所需胚胎，培养至原肠胚期后移植到子宫B. 从桑椹胚中分离少量滋养层细胞，培养后检测基因型C. 从羊水中提取细胞进行检测，并根据检测结果淘汰基因型为hh的胚胎D. 经超数排卵处理后进行体外受精【
8、答案】D【解析】来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此不需要将囊胚进行多等分，而应分离少量滋养层细胞，培养后检测基因型，从中筛选所需胚胎，培养到桑椹胚或囊胚进行移植，A错误；需要从囊胚中分离少量滋养层细胞，培养后检测基因型，B错误；应从囊胚中分离少量滋养层细胞进行检测，因为羊水中细胞可能不是胚胎脱落的细胞，筛选出基因型为hh的个体进行移植，C错误；培育试管婴儿时，需先进行超数排卵处理，再进行体外受精，D正确。8. 下列关于细胞工程的有关叙述，正确的是（ ）A. 动物难以克隆的根本原因是基因组中的基因不完整B. 在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，不可能会发生细胞脱分化和基因
9、突变，而可能发生细胞分化和基因重组C. 动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体D. 从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术【答案】D【解析】【分析】1、可遗传的变异包括基因突变、基因重组和染色体变异，其中基因突变和染色体变异既可发生在有丝分裂过程中，也可发生减数分裂过程中，而基因重组只能发生在减数分裂过程中。2、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：项目细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性，（细胞的全能性）去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、
10、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后，诱导细胞融合离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导制备单克隆抗体的技术之一【详解】A、动物的体细胞均来自受精卵的有丝分裂，因此细胞核中的基因组都相同，A错误；B、在进行组织培养时，由根尖细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，细胞通过有丝分裂方式增殖，可能会发生染色体变异或基因突变，而不可能发生细胞分化和基因重组，B错误；C、动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段不相同，且动物细胞融合一般不能形成杂种个体，C错误；D、从紫草的愈伤组织中提取紫草素、利用细胞工程培育“番茄-马铃
11、薯”杂种植株都利用了植物组织培养技术，D正确。故选D。9. 生命科学新技术的应用对生物学发展至关重要。下列技术与应用不匹配的是（）A. PCR技术-扩增蛋白质B. 显微注射技术-培育转基因动物C. 细胞融合技术-制备单克隆抗体D. 细胞核移植技术-培育体细胞克隆动物【答案】A【解析】【分析】1PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。 2显微注射技术是将目的基因导入动物细胞最为有效的一种方法。【详解】A、PCR技术可在体外大量扩增DNA，A错误； B、培育转基因动物采用显微注射技术将目的基因导入受精卵细胞，B正确； C、动物细胞融合技术最重要的用途是制备单克隆抗
12、体，C正确； D、动物克隆需要通过细胞核移植技术实现细胞重组，D正确。 故选A。【点睛】本题综合考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记PCR技术的概念及应用；识记动物细胞融合技术的应用；识记胚胎移植技术的意义，能结合所学的知识做出准确的判断。10. 大肠杆菌pUC118质粒具有氨苄青霉素抗性基因，某限制酶唯一切点位于该质粒的lacZ基因中。在特定的选择培养基中，若lacZ基因没有被破坏，则大肠杆菌菌落呈蓝色；若lacZ基因被破坏，则菌落呈白色。图表示转基因操作过程。下列有关叙述错误的是A. 应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养B. 若大肠杆菌的菌落为蓝色，则导入的是普通质粒C
13、. 作为受体的大肠杆菌应含氨苄青霉素抗性基因，以便于筛选D. 选择培养基中除必需的营养物质外，还应加入适量氨苄青霉素【答案】C【解析】【分析】某限制酶唯一切点位于该质粒的lacZ基因中，则含有目的基因的重组质粒lacZ基因被破坏，含有重组质粒的菌落呈白色。没有插入目的基因的质粒lacZ基因没有被破坏，含有普通质粒的大肠杆菌菌落呈蓝色。【详解】A、根据分析可知，应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养，A正确；B、若大肠杆菌的菌落为蓝色，说明质粒lacZ基因没有被破坏，导入的是普通质粒，B正确；C、大肠杆菌pUC118质粒具有氨苄青霉素抗性基因，作为受体的大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因，以便于筛选
14、含有重组质粒的大肠杆菌，C错误；D、选择培养基中加入适量氨苄青霉素，可以选择含有重组质粒的大肠杆菌，D正确。故选C。11. 下列有关基因工程操作的叙述中，正确的是（ ）A. 用同种限制酶切割载体与目的基因可获得相同的黏性末端B. 以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因一定与原基因的碱基序列相同C. 检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程操作的成功D. 用含抗生素抗性基因的质粒作为载体是因为其抗性基因便于与外源基因连接【答案】A【解析】【分析】本题考查基因工程相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。【详解】用同种限制酶切割载体与目的基因可获得相同的黏性末端，A
15、正确；一种氨基酸可以有多种密码子，以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因不一定与原基因的碱基序列相同，B错误；受体细胞含有目的基因也不一定能正常表达，C错误；用含抗生素抗性基因的质粒作为载体是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，D错误。故选A。12. 科学家创造了“基因敲除”的方式：用外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中，使某一个基因被取代或破坏而失活，形成杂合体细胞。然后将“修饰”后的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎，生成嵌合体小鼠。科学家已经利用上述技术成功地把人类囊肿性纤维化病的致病基因移植到小鼠身上，培育出了患囊肿性纤维化病的小鼠。下列有关叙述
16、错误的是A. 这种嵌合体小鼠长大后体内存在外源基因，而且可能会遗传给后代B. 在基因敲除中需要用到限制性核酸内切酶、DNA连接酶等C. 通过“基因敲除”方式导致的变异类型属于基因突变D. 基因敲除技术有利于人类对某些遗传因素引发的疾病进行研究【答案】C【解析】【分析】根据题干信息，“基因敲除”技术用外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中，实质采用基因工程的技术，原理是基因重组，涉及到限制酶和DNA连接酶。【详解】这种嵌合体小鼠长大后，体内存在人类囊肿性纤维化病的致病基因，属于杂合体，可能会遗传给后代， A正确；根据题干信息“用外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中”，则需要限制
17、酶和DNA连接酶， B正确；依题干信息可知，“基因敲除”实质上是用外源基因取代或破坏DNA同源序列中的某一个基因，导致其失活，属于基因重组，C错误；“基因敲除”技术成功的培育出了患囊肿性纤维化病的小鼠，可作为实验材料利于人类对遗传病进行研究，D正确。【点睛】本题关键在于围绕“用外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中，使某一个基因被取代或破坏而失活”这一信息和解题的切入点进行发散思维，结合所学基因工程的知识展开联想。在此基础上，结合题意分析每一选项，进行知识的整合和迁移。13. 冠状病毒为单股正链RNA病毒，用（+）RNA表示。下图表示冠状病毒的增殖和表达。相关说法错误的是（ ）A. 冠
18、状病毒属于RNA病毒，体内含有逆转录酶B. 病毒RNA复制时需要的酶在宿主细胞内合成C. 病毒RNA可直接作为翻译的模板D. 病毒RNA复制时遵循碱基互补配对原则【答案】A【解析】【分析】病毒是一类没有细胞结构的特殊生物，只有蛋白质外壳和内部的遗传物质构成，不能独立的生活和繁殖，只有寄生在其他生物的活细胞内才能生活和繁殖，一旦离开了活细胞，病毒就无法进行生命活动。【详解】A、据图分析，冠状病毒由RNA和蛋白质组成，属于RNA病毒，其增殖过程中没有逆转录过程，所以其体内没有逆转录酶，A错误；B、冠状病毒没有细胞结构，其体内的酶是在宿主细胞的核糖体内合成的，B正确；C、病毒RNA可直接作为翻译的模
19、板，C正确；D、病毒RNA复制时遵循碱基互补配对原则，即A与U配对，G与C配对，D正确。故选A。14. 从细胞中提取某种特定的蛋白质比提取 DNA 难度大，其原因不包括（ ）A. 蛋白质对温度、盐浓度、pH 等条件更敏感，更易失活B. 蛋白质的空间结构多样，理化性质各不相同，使得蛋白质的提取没有统一的方法C. 提取某种特定的蛋白质需据其特性摸索提取的程序D. 蛋白质在细胞中含量太低【答案】D【解析】【分析】1、蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。2、提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学
20、性质的生物大分子；对于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。3、DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。4、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80的高温，而DNA在80以上才会变性
21、洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。【详解】A、蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感，更易失活，是提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大的原因，A错误；B、蛋白质的空间结构多样，理化性质各不相同，使得蛋白质的提取没有统一的方法，是提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大的原因，B错误； C、提取某种特定的蛋白质需跟据其特性摸索提取的程序是提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大的原因，C错误； D、细胞中蛋白质含量比核酸更多，但含量的高低并不是提取蛋白质比提取DNA难度大的原因之一，D正确。故选D。【点睛】本题考查提取某种特定的蛋白质和提取DNA的方法，重点在于对蛋白质和DNA的特性的综合
22、分析应用，试题难度中等。15. 研究人员利用农杆菌侵染水稻叶片，经组培、筛选最终获得了一株水稻突变体。利用不同的限制酶处理突变体的总DNA、电泳；并与野生型的处理结果对比，得到图所示放射性检测结果。（注：T-DNA上没有所用限制酶的酶切位点）对该实验的分析错误的是（ ）A. 检测结果时使用了放射性标记的T-DNA片段做探针B. 该突变体产生的根本原因是由于T-DNA插入到水稻核DNA中C. 不同酶切显示的杂交带位置不同，说明T-DNA有不同的插入位置D. 若野生型也出现杂交带，则实验样本可能被污染，检测结果不准确【答案】C【解析】【分析】将目的基因插入到农杆菌的Ti质粒的T-DNA上，通过农杆
23、菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞中染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。它是将目的基因导入植物细胞采用最多的方法。放射性标记的T-DNA片段做探针的目的是检测受体细胞的DNA中有无目的基因。均显示一条杂交带，说明在这一突变体中，T-DNA插入位置是唯一的。【详解】A、图示结果突变体中出现放射性，说明使用了放射性标记的T-DNA片段做探针对目的基因进行检测，A正确；B、该突变体产生的根本原因是T-DNA携带目的基因插入到水稻的DNA中，B正确；C、不同酶切杂交带位置不同，说明不同酶切后带有T-DNA的片段长度不同（即：不同的酶切位点距离T-DN
24、A的远近不同），C错误；D、由图所示放射性检测结果可知，野生型无放射性杂交条带，若野生型也出现杂交带，则实验样本可能被污染，检测结果不准确，D正确。故选C。【点睛】本题通过放射性同位素标记方法检测目的基因的方法，考查对基础知识的运用，以及对实验结果的分析和判断能力。16. 目前市面上许多疫苗是应用基因工程技术生产的，在基因工程的实验过程中，把目的基因和运载体连接起来的是（ ）A. 核酸酶B. 限制性核酸内切酶C. 逆转录酶D. DNA连接酶【答案】D【解析】【分析】基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂
25、。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。【详解】A、核酸酶是水解核酸的酶，A错误； B、限制性核酸内切酶是催化特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂的酶，B错误；C、逆转录酶是催化RNA逆转录成DNA的酶，C错误； D、DNA连接酶是催化磷酸二酯键形成的酶，即可催化目的基因和运载体连接，D正确。故选D。17. 在现代生物工程技术中，下列研究方案不能实现其目的是选项方案目的A将胰岛素基因导入大肠杆菌，进行培养大量生产人胰岛素B体外诱导胚胎干细胞分化培育供移植的组织器官C通过体外培养或体内培养骨髓瘤细胞制备单克隆抗体
26、D用胰蛋白酶处理剪碎的动物组织块制备动物细胞悬浮液A. AB. BC. CD. D【答案】C【解析】【分析】【详解】制备单克隆抗体是通过动物细胞融合得到的杂交瘤细胞实现的，所以C错。故选C【点睛】18. 以下有关DNA重组技术的基本工具的说法中，正确的是（ ）A. 限制酶既有特异性又有专一性B. 质粒是基因工程中唯一的载体C. 载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶切点，以便目的基因复制D. DNA连接酶使黏性末端的碱基之间形成氢键【答案】A【解析】【分析】1、基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（
27、2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。2、作为运载体必须具备的条件：要具有限制酶的切割位点； 要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选能在宿主细胞中稳定存在并复制；是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。【详解】A、限制酶具有特异性又有专一性，即一种限制酶只能识别某种特定的核苷酸序列，并在特定的位点之间进行切割，A正确；B、基因工程常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等，B错误；C、载体必须具备的条件之一是具有限制酶切点，以便与外源基因连接，但不一定要有多个限制酶切点，C错误；D、DNA连
28、接酶使黏性末端的脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键，D错误。故选A。19. 下列关于限制性核酸内切酶的说法错误的是A. 限制性核酸内切酶主要是从微生物细胞中分离提纯的B. 限制性核酸内切酶不能将目的基因连接到不同的载体上C. 一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸D. 限制性核酸内切酶既可切割链状DNA也可切割环状DNA【答案】C【解析】【分析】关于限制酶，考生可以从以下几方面把握：（1）主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端。【详解】A.限制性内切酶主要
29、是从细菌中提取的， A正确；B.限制性内切酶切割运载体和目的基因，不能连接运载体和目的基因， B正确；C.一种限制性内切酶识别一种特定的苷酸序列，而非核苷酸，C错误；D.限制性内切酶可以切割DNA，无论是链状DNA还是环状DNA， D正确。故选C。20. 图为培育转基因山羊生产人-酪蛋白的流程图。下列叙述正确的是（ ）A. 过程所用的人-酪蛋白基因可从人cDNA文库中获得B. 过程可选用囊胚期或原肠胚期的胚胎进行移植C. 过程可使用胚胎分割技术扩大转基因山羊群体D. 过程人-酪蛋白基因在细胞质内进行转录、翻译【答案】AC【解析】【分析】根据题意和图示分析可知：过程表示基因表达载体的构建，表示胚
30、胎移植，表示胚胎分割移植，表示人-酪蛋白基因表达。【详解】A、由图可知，过程表示基因表达载体的构建，获取目的基因（人-酪蛋白基因）的方法之一就是从人cDNA文库中获取，A正确；B、过程为胚胎移植，山羊的胚胎移植应选用桑椹胚或囊胚期的胚胎进行移植，B错误；C、表示胚胎分割移植，胚胎分割技术可以得到多个遗传性状相同的个体，在过程中可以应用，C正确；D、表示人-酪蛋白基因表达，包括转录和翻译两个过程，对于真核生物而言，转录主要发生在细胞核中，翻译过程发生在细胞质中，D错误。故选AC。21. 下列关于生物工程的叙述，正确的是A. 在花药离体培养形成愈伤组织的过程中，有可能发生基因的突变和基因重组B.
31、目的基因导入植物细胞的常用方法是显微注射法C. 植物的单倍体育种和杂交育种都必须利用植物组织培养技术D. 蛋白质工程也需要构建含控制预期蛋白质合成的基因表达载体【答案】D【解析】【分析】【详解】A、基因重组只发生在减数分裂过程中，愈伤组织的形成过程只有有丝分裂，A错误；B、目的基因导入植物细胞的常用方法是农杆菌转化法，B错误；C、植物的单倍体育种必须利用植物组织培养技术，杂交育种不需要利用植物组织培养技术，C错误；D、蛋白质工程包含基因工程技术，也需要构建含控制预期蛋白质合成的基因表达载体，D正确。故选D【点睛】22. 在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是 ( )A. 将目的基因从染色
32、体上切割出来B. 识别并切割特定的DNA核苷酸序列C. 将目的基因与运载体结合D. 将目的基因导入受体细胞【答案】B【解析】试题分析：限制酶的作用是识别DNA分子中特定的核苷酸序列，并在特定位点切割DNA，即限制酶破坏的是DNA链中特定位点的连接相邻脱氧核苷酸的磷酸二酯键，故B项正确，A、C、D项错误。考点：本题考查基因工程中限制酶的相关知识，意在考查考生解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。23. 利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（ ）A. 用核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B. 利用该单克隆抗体与抗原特异
33、性结合的方法可诊断出病毒感染者C. 制备出单克隆抗体的过程中需要一次筛选D. 体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体【答案】B【解析】【分析】【详解】A、用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体化学性质不单一，不是单克隆抗体，故A错误；B、利用该单克隆抗体与抗原特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，B正确；C、制备出单克隆抗体的过程中需要2次筛选，C错误；D、单独的效应B淋巴细胞有产生抗体的能力，但没有无限增殖的本领，因此在体外培养的情况下是不可能得到大量的单克隆抗体的，D错误。故选B点睛】24. 生物武器的危害有传染性强的特点，针对这一特点，下列哪项不是防护
34、生物武器的有效措施A. 提前接种和个人防护B. 发现病人，立即报告，及时隔离C. 注意切断传播途径D. 只注意环境消毒，不注意动植物灭菌【答案】D【解析】【分析】【详解】防止生物武器的危害,不但要进行环境消毒,也要对可能成为传播途径的动植物进行灭菌消毒。D错误故选D【点睛】25. 胃癌是我国发病率很高的一种恶性疾病，制备抑制癌细胞增殖的单克隆抗体对治疗胃癌具有重要意义。抗胃癌单克隆抗体的制备过程如图所示，以下说法正确的是()A. 诱导骨髓瘤细胞与甲融合，可用的诱导因素只有灭活的病毒B. 在乙、丙及骨髓瘤细胞中，乙、丙经培养后，均可获得大量的抗胃癌单克隆抗体C. 将人的胃癌细胞反复注射到小鼠体内
35、，产生的血清抗体为单克隆抗体D. 单克隆抗体的制备过程中需加入血清或血浆【答案】D【解析】【分析】【详解】A、诱导骨髓瘤细胞与甲B淋巴细胞融合，可用的诱导因素处理灭活的病毒，还有聚乙二醇等，A错误；B、在乙、丙及骨髓瘤细胞中，乙、丙经培养后，由于基因的选择性表达，不一定获得大量的抗胃癌单克隆抗体，B错误；C、将人的胃癌细胞反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体不是单克隆抗体，C错误；D、单克隆抗体的制备过程中需加入血清或血浆，D正确。故选D【点睛】26. 下列关于采用胚胎工程技术实现某良种肉用牛快速繁殖的叙述，正确的是（ ）A. 采取激素注射等方法对良种母牛作超数排卵处理B. 体外培养发育到原肠胚
36、期的胚胎即可进行移植C. 使用免疫抑制剂以避免代孕牛对植入胚胎的排斥反应D. 利用胚胎分割技术，同卵多胎较同卵双胎成功率更高【答案】A【解析】【分析】胚胎移植的基本程序：对供体和受体的选择和处理（同期发情处理，超数排卵处理）、配种或进行人工授精、对胚胎的收集检查培养或保存、进行胚胎移植。所以在发情期给良种母牛注射激素，促进母牛多排卵，这种处理属于超数排卵处理。【详解】用促性腺激素对良种奶牛进行注射处理，可促使其超数排卵，A正确；进行移植的胚胎是桑椹胚或囊胚，B错误；受体对移植的胚胎几乎不发生免疫排斥反应，因此无需使用免疫抑制剂，C错误；利用胚胎分割技术，同卵双胎较同卵多胎成功率更高，D错误。【
37、点睛】解答本题的关键是掌握胚胎移植的详细过程，注意同期发情处理的方法、胚胎移植的时间，明确胚胎分割次数越多，成功的概率越低。27. 基因工程和蛋白质工程的区别是A. 基因工程需对基因进行操作，蛋白质工程不对基因进行操作B. 基因工程在分子水平操作，蛋白质工程在细胞水平（或性状水平）操作C. 基因工程合成自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程可制造一种新的蛋白质D. 蛋白质工程与基因工程没有任何联系【答案】C【解析】【分析】本题考查蛋白质工程与基因工程的区别与联系，要求考生理解蛋白质过程的概念和特征，理解蛋白质工程的基础是基因工程，蛋白质工程又被称为是第二代基因工程，蛋白质工程可制造一种新的蛋白质。【
38、详解】A、基因工程和蛋白质工程都需对基因进行操作，A错误；B、基因工程和蛋白质工程都是在分子水平上进行的操作，B错误；C、基因工程合成自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程可制造一种新的蛋白质，C正确；D、蛋白质工程的基础是基因工程，蛋白质工程又被称为是第二代基因工程，D错误。故选C。28. 利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是A. 棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B. 大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAC. 山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列D. 酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白【答案】D【解析】【分析】基因的表达即
39、控制蛋白质的合成，只有合成了相应的蛋白质才能证明目的基因完成了在受体细胞中的表达此题的重点就看是否产生相应的蛋白质。【详解】A、检测到细菌的抗虫基因并未产生蛋白质，A错误；B、检测到人胰岛素基因及其mRNA并未产生蛋白质，错误；C、检测到人生长激素DNA序列并未产生蛋白质，C错误；D、提取到人干扰素蛋白，是蛋白质，D正确。故选D。29. 下列关于生态农业的相关叙述，正确的是A. “桑基鱼塘”利用了系统的结构决定功能原理B. 生态农业是无消耗、多效益、可持续的工程体系C. 农业生态系统的抵抗力稳定性比自然生态系统高D. “无废弃物农业”实现了物质和能量的循环利用【答案】A【解析】【详解】A、“桑
40、基鱼塘”利用了系统的结构决定功能的原理，A正确；B、生态工程是一类少消耗、多效益、可持续的工程体系，B错误；C、与自然生态系统相比，农业生态系统的营养结构简单，自我调节能力弱，抵抗力稳定性低，C错误；D、“无废弃物农业”实现了物质的循环利用，提高了能量利用率，D错误。故选A30. 用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是（）A. 如图中两种酶识别的核苷酸序列不同B. 如图中酶切产物可用于构建重组DNAC. 泳道中是用SalI处理得到的酶切产物D. 图中被酶切的DNA片段是单链DNA【答案】D【解析】【分析】该题考查DNA
41、的结构、限制酶的特点和功能等。DNA一般是双螺旋结构；限制酶可以识别特定的脱氧核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割。【详解】限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列，不同的限制酶能识别不同的核苷酸序列，由电泳图可知XhoI和SalI两种酶分别切割时，识别的序列不同，A正确；同种限制酶切割出的DNA片段，具有相同的粘性末端，再用DNA连接酶进行连接，可以构成重组DNA，B正确；SalI将DNA片段切成4段，XhoI将DNA片段切成3段，根据电泳结果可知泳道为SalI，泳道为XhoI，C正确；限制酶切割双链DNA，酶切后的DNA片段仍然是双链DNA，D错误，所以选D。【点睛】
42、注意图1两种限制酶的识别位点数量，SalI有3个识别位点，能将DNA片段切成4段，XhoI有2个识别位点，能将DNA片段切成3段。31. 下列关于生态工程的叙述，错误的是A. “112”体现了生态工程的系统整体性原理B. 巢湖大面积水华，违反了协调与平衡原理C. 生态农业的建立，实现了物质和能量的多级利用D. 为促进矿区生态环境的恢复，可采用人工制造表土，种植农作物的措施【答案】D【解析】【分析】生态工程的基本原理： (1)物质循环再生原理：物质能在生态系统中循环往复,分层分级利用； (2)物种多样性原理：物种繁多复杂的生态系统具有较高的抵抗力稳定性； (3)协调与平衡原理：生态系统的生物数量
43、不能超过环境承载力(环境容纳量)的限度； (4)整体性原理：生态系统建设要考虑自然、经济、社会的整体影响； (5)系统学和工程学原理：系统的结构决定功能原理:要通过改善和优化系统结构改善功能； (6)系统整体性原理：系统各组分间要有适当的比例关系,使得能量、物质、信息等的转换和流通顺利完成,并实现总体功能大于各部分之和的效果,即“1+12”。【详解】A、“1+12”体现了生态工程的系统整体性原理，故A正确；B、巢湖大面积水华,违反了协调与平衡原理，故B正确；C、生态农业是运用生态学的原理，在环境与经济协调发展的思想指导下，应用现代科学技术建立起来的多层次、多功能的综合农业生产体系，遵循生态系统
44、中能量多级利用和物质循环再生这一条基本原理，合理设计食物链，使生态系统中的能量和物质被分层次多级利用，使废物资源化，提高能量转化效率，减少环境污染，故C正确；D、为促进矿区生态环境的恢复,可采用人工制造表土、多层覆盖、特殊隔离、土壤侵蚀控制、植被恢复工程等，关键是植被恢复及其所必需的土壤微生物群落的重建，故D错误。本题需选择错误的，故答案为D。【点睛】易混点：整体性原理和系统整体性原理。整体性原理强调自然、经济、社会三方面协调统一，保障整个系统的稳定与平衡；系统整体性原理强调整体大于部分之和，指系统各组分间要有适当的比例关系,使得能量、物质、信息等的转换和流通顺利完成,并实现总体功能大于各部分
45、之和的效果,即“1+12”；在学习过程中应注意区分。32. 若转基因技术被滥用，可能被恐怖组织用于恐怖行为。下列不属于恐怖行为的是（ ）A. 把蜡状杆菌通过转基因技术改造成像炭疽杆菌一样的致病菌B. 把炭疽杆菌基因通过转基因技术重组到人体内，使人具有免疫力C. 把流感病毒基因改造，只会使具有某种易感基因的人群感染，而其他人却不易感染D. 将生物毒素分子的基因与流感病毒的基因拼接在一起【答案】B【解析】【分析】生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。【详解】A、经过基因重组获得
46、的致病菌属于生物武器的一种，A错误；B、炭疽杆菌是一种让感染者死亡率极高的致病菌，使人具有该病菌的免疫力不是转基因技术的滥用，不属于恐怖行为，B正确；C、把流感病毒基因改造，只会使具有某种易感基因的人群感染，属于恐怖组织的行为，C错误；D、将生物毒素分子的基因与流感病毒的基因拼接在一起，导致毒素随着流感传播，属于恐怖组织的行为，D错误。故选B。33. 美国科学家在研究生长在墨西哥某地的野生玉米后发现，这种玉米含有包括苏云金芽孢杆菌抗虫毒蛋白基因在内的转基因作物的基因，下列有关叙述其中正确的说法是转基因作物的基因可传播到野生植物中转基因作物可对天然植物的遗传多样性构成威胁为防止基因污染，应当禁止
47、转基因作物的研究自然杂交与转基因过程没有任何区别A. B. C. D. 【答案】C【解析】【分析】【详解】转基因作物可通过花粉散落到它的近亲作物上，从而污染生物基因库，正确；转基因植物可能会与野生植物杂交，造成基因污染，可能会对生物多样性构成潜在的风险和威胁，正确；虽然转基因生物存在危害，但我们应理性地看待转基因生物的研究，错误；自然杂交是同种生物个体之间的基因交流，而转基因是将外源基因导入受体细胞的过程，即不同生物之间基因的交流，错误，故选C【点睛】34. 下列关于现代生物技术的叙述正确的是A. 在植物细胞与组织培养中，花药可以作为培养的材料B. 体外受精技术中获得的精子必须置于ATP溶液中
48、进行获能处理C. 从大肠杆菌细胞中检测到人胰岛素基因说明目的基因已成功表达D. 在动物细胞培养中，用胃蛋白酶处理小鼠肝组织可获得单个肝细胞【答案】A【解析】【分析】本题是对现代生物技术多个知识点的考查，包括基因工程、细胞工程和胚胎工程。植物组织培养的原理是细胞的全能性，因为细胞中含有本物种全套的遗传信息。【详解】植物的花药中含有精子，精子中含有本物种全套的遗传信息，具有发育成完整个体的潜能，可以作为植物组织培养的材料，A正确。体外受精技术中获得的精子获能处理是把精子放在人工配制的获能培养液中，不能用ATP，B错误。基因工程的基因是否成功表达的标志是看基因是否表达出相应的蛋白质或表现相应的性状，
49、C错误。在动物细胞培养中，用胰蛋白酶处理小鼠肝组织可获得单个肝细胞，不是用胃蛋白酶，D错误。【点睛】1细胞全能性大小的比较：受精卵生殖细胞体细胞。 2.用花药离体培养获得的植株是单倍体植株，要用秋水仙处理后才能达到目的。35. 2018年，中国科学家率先成功地应用体细胞核移植技术获得两只克隆猴“中中”和“华华”，在国际上首次实现了非人灵长类动物的体细胞克隆。下列相关说法正确的是（ ）A. 体细胞核移植难度大于胚胎细胞核移植的原因是细胞分化程度低B. 体细胞核移植需将供体细胞注入去核的M期卵母细胞构建重组细胞C. “中中”和“华华”与供体猕猴的遗传物质完全相同D. 克隆猴的原理是供体体细胞含有本
50、物种的全部基因【答案】B【解析】【分析】克隆是用体细作为供体细胞进行的细胞核移植，它利用了胚胎细胞进行核移植的传统方式，没有经过雌雄交配，不需要精子和卵子的结合，只需要从动物身上提取一个细胞（供体细胞），从屠宰场的母畜的卵巢内采集卵母细胞，培养至减数第二次分裂的中期，然后显微操作去除卵母细胞的细胞核，将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中，使其重组构建一个重组细胞，并体外培养发育成一个新的胚胎，再将胚胎移植到雌性动物子宫内，就可以孕育出新的个体，中中”和“华华”的获得就是利用了克隆技术。【详解】A、哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度小于体细胞核移
51、植，因为胚胎细胞的分化程度相对较低，恢复其全能性更加容易一些，A错误；B、根据以上分析可知，体细胞核移植需将供体细胞注入去核的M期卵母细胞构建重组细胞，B正确；C、根据以上分析可知，“中中”和“华华”的核遗传物质与供体猕猴的遗传物质相同，但是细胞质中的遗传物质来自卵母细胞，C错误；D、克隆猴的原理是利用了动物细胞核的全能性，D错误。故选B。36. 20世纪90年代开始兴起的DNA疫苗被称为第三次疫苗革命，医学专家将含病毒抗原基因的重组质粒注入人体表达后使人获得免疫能力。下列叙述不正确的是()A. 病毒抗原基因与质粒重组时需要DNA连接酶B. 病毒抗原基因在体内表达时需要RNA聚合酶C. 重组质
52、粒在内环境中表达后引起机体免疫反应D. 注射DNA疫苗后机体会产生相应记忆细胞【答案】C【解析】【分析】基因工程的操作工具包括：限制酶、DNA连接酶、运载体。体液免疫，其过程为：（1）感应阶段：除少数抗原可以直接刺激B细胞外，大多数抗原被吞噬细胞摄取和处理，并暴露出其抗原决定簇；吞噬细胞将抗原呈递给T细胞，再由T细胞呈递给B细胞；（2）反应阶段：B细胞接受抗原刺激后，开始进行一系列的增殖、分化，形成记忆细胞和浆细胞；（3）效应阶段：浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合，发挥免疫效应注射疫苗，引起人体的免疫反应，在体内产生抗体和记忆细胞，进而获得了对该抗原的抵抗能力。【详解】病毒抗原基因与质粒重
53、组时需要DNA连接酶，A正确；病毒抗原基因在体内表达时的转录过程中需要RNA聚合酶，B正确；重组质粒在细胞中表达后分泌到细胞外，表达产生的蛋白质在内环境中作为抗原引起机体免疫反应，C错误；注射DNA疫苗后抗原基因表达，引起机体发生特异性免疫反应，产生相应的记忆细胞，D正确，故选C。37. 依据蛙的血红蛋白基因序列制成DNA探针，对样品进行检测，以下不能与探针形成杂交分子的是（ ）A. 蛙红细胞的DNAB. 蛙白细胞的mRNAC. 蛙红细胞的mRNAD. 蛙白细胞的DNA【答案】B【解析】【分析】DNA探针的应用所依据的原理是DNA杂交，DNA杂交是指DNA片段在适合的条件下能和与之互补的另一个
54、片段结合，对最初的DNA片段进行标记，即做成探针；蛙的所有细胞都含有血红蛋白基因，但只在红细胞中选择性表达，合成相应的mRNA，据此分析。【详解】A、蛙红细胞中有血红蛋白基因，其DNA可与该DNA探针进行杂交，A正确； B、蛙白细胞中血红蛋白基因不表达，所以该细胞中的mRNA不能与探针形成杂交带，B错误；C、蛙红细胞中血红蛋白基因会转录形成相应mRNA，该mRNA能与探针形成杂交带，C正确； D、蛙白细胞的DNA中含血红蛋白基因，能与探针形成杂交带，D正确。故选B。38. 下列叙述错误的是 （ ）A. 利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育远源杂种B. 不同种植物原生质体融合的过程属
55、于植物体细胞杂交过程C. 早期胚胎发育过程从原肠胚期细胞开始分化，此时细胞的全能性比囊胚期细胞低D. 体外受精过程包括精子的采集与获能、卵母细胞的采集与培养、体外受精【答案】C【解析】【分析】植物体细胞杂交是指将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株的技术。【详解】植物体细胞杂交可以用两种不同的植物细胞，从而可克服生殖隔离的限制，A正确；植物体细胞杂交过程包括不同种植物原生质体融合的过程，B正确；动物细胞分化从囊胚期开始，原肠胚时期已达最大限度，细胞全能性较囊胚期低，C错误；体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、体外受精，D正
56、确，故选C。39. 某昆虫病毒是种双链DNA病毒，研究人员为探究该病毒的K基因对P基因遗传信息传递过程的影响，以缺失K基因的病毒感染昆虫细胞作为实验组，以野生型病毒感染昆虫细胞作为对照组进行实验。下列相关叙述正确的是（ ）A. 病毒利用昆山细胞提供的模板和原料进行DNA复制B. 病毒利用自身携带的核糖体在昆虫细胞中合成蛋白质C. 若K基因抑制P基因的转录，则实验组P基因的mRNA合成速率低于对照组D. 若K基因促进P基因的翻译，则实验组P基因所编码的蛋白质合成速率低于对照组【答案】D【解析】【分析】病毒没有细胞结构，需依赖于宿主细胞生存。基因是一段有功能的核酸，在大多数生物中是一段DNA，在少
57、数生物（RNA病毒）中是一段RNA。基因表达是指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程，基因表达产物通常是蛋白质。基因表达包括转录和翻译。转录过程由RNA聚合酶进行，以DNA为模板，产物为RNA。RNA聚合酶沿着一段DNA移动，留下新合成的RNA链。翻译过程是以信使RNA（mRNA）为模板，指导合成蛋白质的过程。【详解】A、病毒进行DNA复制，模板是病毒的DNA，A错误； B、病毒没有细胞结构，没有核糖体，B错误；C、若K基因抑制P基因的转录，则实验组缺失K基因，P基因的mRNA合成速率高于对照组，C错误；D、若K基因促进P基因的翻译，则实验组缺失K基因，P基因所编码的蛋白质合成速率低于
58、对照组，D正确。故选D。40. 牛胚胎移植的基本程序如下图所示，下列说法错误的是（ ）A. 供体母牛的主要职能是产生具有优良性状的胚胎B. 图中a指的是超数排卵，可用促性腺激素C. 图中b表示胚胎移植D. 为了提高牛胚胎的利用率，常采用的方法是胚胎分割移植【答案】C【解析】【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：对供、受体的选择和处理；配种或人工授精；对胚胎的收集、检查、培养或保存；对胚胎进行移植；移植后的检查。分析题图可知，a表示超数排卵；b表示冲卵；c表示胚胎移植过程。【详解】A、供体母牛主要职能是提供具有优良性状的胚胎，A正确；B、图中a表示超数排卵，可用促性腺激素处理供体母牛，B正确；C、
59、图中b表示冲卵，早期胚胎在一定时间内处于游离状态，为胚胎的收集提供了可能，C错误；D、同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，采取胚胎分割移植可得到多个胚胎，提高牛胚胎的利用率，D正确。故选C。二、非选择题41. H1NI为单链RNA病毒，感染人类会引发甲型流感。对H1N1进行基因组测序，发现HA基因是该病毒的一种特征基因。可通过检测HA基因来检测待测标本中H1N1的含量，过程如下图所示。回答下列问题。 （1）对H1N1进行基因组测序是测定RNA的_序列。（2）在过程和中，需分别向反应体系加入_酶和_酶。（3）过程中对HA基因对应的cDNA序列进行扩增，需设计_种引物。反应体系中加入dATP、dTT
60、P、dCTP和dGTP的作用是_。（4）反应体系中含有荧光物质，每扩增形成一条DNA链，就会出现一定强度的荧光信号。现欲检测两个标本中H1N1的含量，可在荧光强度达到某一设定值时，观察比较两个反应体系扩增循环的次数，若某个标木的循环次数较少，则其H1N1含量较_。（5）检测HA基因还可以采用分子杂交技术。制备用放射性同位素标记的、与A的基因互补的核酸序列作为_与待测标本中提取的总RNA杂交，若观察到_，则表明标本中存在HA基因。【答案】 (1). 核糖核苷酸 (2). 逆转录 (3). Taq (4). 2 (5). 提供反应所需的原料和能量 (6). 多 (7). 探针 (8). 杂交带【解
61、析】【分析】核酸分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），核苷酸是核酸的基本单位。脱氧核苷酸是脱氧核糖核酸的基本单位，核糖核苷酸是核糖核酸的基本单位。脱氧核苷酸由碱基、脱氧核糖和磷酸构成。其中碱基有4种：腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胸腺嘧啶（T）和胞嘧啶（C）。DNA双链的碱基互补配对的原则为AT、GC。DNA在复制时，以亲代DNA的每一个单链作模板，合成完全相同的两个双链子代DNA，每个子代DNA中都含有一个亲代DNA链，这种现象称为DNA的半保留复制。PCR是利用DNA在体外95高温时变性会变成单链，低温（经常是60左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最
62、适反应温度（72左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5-3)的方向合成互补链。【详解】（1）RNA的基本单位是核糖核苷酸，因此对H1N1进行基因组测序是测定RNA的核糖核苷酸序列。（2）过程为逆转录，过程为PCR，需分别向反应体系加入逆转录酶和Taq酶（DNA聚合酶）。（3）dATP dGTP dTTP dCTP这四种都是都是合成DNA的原料。同时，它们所携带的高能磷酸键，也可以为反应提供能量。（4）PCR扩增过程中每扩增形成一条DNA链，就会出现一定强度的荧光信号，随着循环次数的增加，荧光信号逐渐积累，当达到设定的荧光强度时，PCR反应停止，此时可根据PCR扩增仪上显示的循环次数，判断病毒
63、的含量。达到设定的荧光强度时的循环次数较少，待测标本中H1N1含量较多。（5）分子杂交的原理是碱基互补配对，用放射性同位素标记的、与A的基因互补的核酸序列作为探针，若标本中存在HA基因（本质为RNA），则将标本中的RNA提取出来，就能找到与探针结合的杂交带。【点睛】本题关键是对于PCR技术的考查，应在明确其原理的基础上识记相应的步骤、材料、模板、引物等，另外分子杂交是基于碱基互补配对，要在明确其基本原理的基础上进行解答。42. 某科研团队利用小鼠筛选获得一种针对禽流感病毒的鼠源单克隆抗体13D4。为了降低其应用于人体治疗时可能产生的免疫排斥反应，将其改造为人-鼠嵌合抗体13D4-cAb，之后将
64、构建好的真核表达载体导入中国仓鼠卵巢细胞(CHO 细胞)后，筛选能够稳定表达的细胞株，通过转瓶培养、表达，纯化后获得大量嵌合抗体用于研究。请根据资料回答下列问题：（1）研究人员从分泌13D4单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取_，逆转录得到轻、重链抗原结合区的_用于 PCR扩增，并分别与人抗体的轻、重链生物反应区DNA序列拼接，构建人鼠嵌合抗体13D4-cAb的真核表达载体用于表达。（2）在PCR反应体系中，若一个模板DNA，消耗引物分子14个，则该DNA扩增了_轮。（3）构建13D4-cAb表达载体时，先将人抗体的轻、重链基因分别插入到两个PCMV启动子的下游。将13D4 VH基因经_双酶切后插入重
65、链基因上游，再将13D4 VK基因经_双酶切后插入轻链基因上游。（4）将重组质粒导入CHO细胞后，可采用_技术检验轻、重链基因是否成功转录，最后还需要通过_技术检验目的基因是否成功表达并组装出有生物学活性的嵌合抗体。（5）应用转瓶培养筛选获得的细胞，需将转瓶放入_，以维持37和5% CO2等培养条件，合成培养基中通常还需加入_或血浆等一些天然成分。为避免出现_现象，当细胞铺满转瓶内壁约80%左右时，应当使用_等处理，然后分瓶继续培养。（6）上述嵌合抗体的生产体现了_工程技术的应用。【答案】 (1). 总RNA/mRNA (2). cDNA (3). 3 (4). Hind、Kpn (5). B
66、amH、EcoR (6). 分子杂交 (7). 抗原一抗体杂交 (8). CO2培养箱 (9). 血清 (10). 细胞的接触抑制 (11). 胰蛋白酶 (12). 蛋白质【解析】【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的
67、方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。蛋白质工程：1、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。2、蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。3、基
68、本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行。【详解】（1）从分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取鼠总RNA/mRNA；经逆转录得到鼠抗体cDNA用于PCR扩增。（2）若某双链DNA分子扩增过程中消耗引物分子14个，说明通过DNA复制产生（14+2）2=8=23个DNA分子，因此DNA扩增了3次。（3）将人抗体的轻、重链基因分别插入到两个PCMV启动子的下游，结合图形箭头分析，需要将13D4VH基因经Hind和Kpn双酶切后插入重链基因上游，再将13D4 VK基因经BamH和EcoR双酶切后插入轻链基因上游。（4）检验基因是否转录可采用分子杂交技术；检验目的基因是否成功表达并组装出有生物学活性的嵌合抗体需要用抗原-抗体杂交技术。（5）动物细胞培养的需要将转瓶放入CO2培养箱；合成培养基中需要加入血清或血浆，为避免出现细胞的接触抑制现象，当细胞铺满转瓶内壁约80%左右时，应当使用胰蛋白酶处理。（6）上述嵌合抗体的生产体现了蛋白质工程技术的应用。【点睛】本题以图片信息的形式考查嵌合抗体的制备过程，同时与传统的抗体相比较，要求学生有一定的分析推理能力，难点是结合质粒的结构分析酶切位点。