1、江西省南昌市进贤县一中2019-2020学年高二生物下学期第一次月考试题（含解析）一、单选题1.下列关于基因文库说法中，不正确的是 （ ）A. 某果蝇X染色体上的所有基因组成的文库是部分基因文库B. cDNA文库中的基因可以在不同物种间进行交流C. 取出果蝇某细胞中全部mRNA，通过反转录产生的全部DNA片段称为该果蝇的基因组文库D. 可以根据基因的碱基序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA，以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因【答案】C【解析】【分析】本题考查基因文库的概念和分类：如果这个文库包含了某种生物的所有基因，那么，这种基因文库叫做基因组文库。如果这个
2、文库只包含了某种生物的一部分基因，这种基因文库叫做部分基因文库，例如cDNA文库。【详解】A、果蝇X染色体上的所有基因并不是果蝇的全部基因，全部基因应还包括常染色体和Y染色体上的基因。因此如上述构建的基因文库是部分基因文库，正确；B、cDNA文库中的基因可以在不同物种间进行基因交流，基因组文库则只有部分基因可以，正确；C、基因组文库的建立是通过提取某种生物体内的DNA，切成一定范围大小的DNA片段，然后将其与载体连接，导入受体菌群体中储存而完成的，选项中所述应为cDNA文库，错误；D、从基因文库中得到所需的目的基因，简单来讲就是根据目的基因的有关信息，例如，根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基
3、因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA，以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因，正确。故选C。【点睛】基因文库包括基因组文库和部分基因文库。将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。如果这个文库包含了某种生物的所有基因，那么，这种基因文库叫做基因组文库。如果这个文库只包含了某种生物的一部分基因，这种基因文库叫做部分基因文库，例如cDNA文库，首先得到mRNA，再反转录得cDNA，形成文库。cDNA文库与基因组文库的区别在于cDNA文库在mRNA拼接过程中已经除去了内含子等成分，便于DNA重组时直接使用。2.目
4、的基因与运载体结合所需的条件是（ ）同一种限制酶 具有标记基因的质粒 RNA聚合酶 目的基因DNA连接酶 四种脱氧核苷酸 ATPA. B. C. D. 【答案】D【解析】【分析】目的基因和运载体需要用同种限制酶切，有了相同的黏性末端在DNA连接酶的作用下才能将目的基因运载体连接起来形成重组DNA，此时运载体上要有标记基因，以便筛选含有目的基因的重组DNA。【详解】目的基因与运载体需要用同种限制酶进行切割，以产生相同的黏性末端，正确。运载体上要有标记基因，以便筛选，质粒常作为运载体，正确。不需要RNA聚合酶，错误。要将目的基因和运载体相连，必须有目的基因，正确。目的基因和运载体连接时需要DNA连
5、接酶，正确。四种脱氧核苷酸是合成DNA的原料，此时不需要，错误。目的基因和运载体连接需要ATP，正确。综上分析，D正确，A、B、C错误。故选D。3.下列关于基因工程技术的叙述，正确的是（ ）A. 目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物B. 限制性核酸内切酶、DNA连接酶及载体是基因工程中常用的工具酶C. 若检测培育的抗虫棉花是否成功，可用相应的病菌侵染棉花植株D. 载体上的抗生素基因有利于检测目的基因是否插入到受体细胞的染色体上【答案】A【解析】【分析】1、DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。2、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：
6、检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术。（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】基因工程的目的基因可以来源于动物、植物和微生物，受体细胞也可以是动物、植物和微生物，A正确；基因工程的工具有限制酶、DNA连接酶和运载体，其中限制酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶，B错误；若检测培育的抗虫棉花是否成功，可用棉铃虫取食棉花植株，C错误；载体上的抗性基因有利于检测目的基因是否导入重组细胞，但不能检测目的基因是否插入到受体细胞的染色体上，D错误，故选A。4.
7、下列如图所示的黏性末端的说法，错误的是（ ）A. 甲乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成的B. 甲乙黏性末端可形成重组DNA分子C. DNA连接酶作用位点在a点，催化两个DNA片段之间相连D. 切割甲的限制酶能识别并切割由甲、乙片段连接形成的重组DNA分子【答案】D【解析】切割甲的限制酶的识别序列是-GAATTC-,切割乙的限制酶的识别序列是-CAATTG,所以切割甲、乙的限制酶不同，A正确；甲和乙的黏性末端中未配对的碱基正好能互补配对，所以可以被DNA连接酶连接形成重组DNA分子，B正确；DNA连接酶连接的是DNA片段,所以该酶能催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成磷酸二酯键，C正确；甲乙片段形成的
8、重组DNA分子的序列是-CAATTC-,而甲酶的识别序列是-GAATTC-,且在G和A之间切割，由此可见,甲酶不能识别由甲乙片段形成的重组DNA分子，D错误5.我国科学家独创的花粉管通道法，可以使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞，是一种十分简便经济的方法，对此认识正确的是（ ）A. 不必构建重组载体就可以直接导入B. 此方法可用于转基因动物C. 受体细胞只能是植物的卵细胞D. 有时可以取代农杆菌转化法【答案】D【解析】要让目的基因进入受体细胞后能稳定存在并得到复制和表达，不管采用什么导入方法，都需要构建重组载体才能实现，A错误；花粉管道法只适用于转基因植物的培育，B错误；植物受体细胞一般用植
9、物体细胞，通常不选卵细胞，因为卵细胞取材不方便且数量少，C错误；如果是为了导入双子叶植物和裸子植物，一般采用农杆菌转化法，D正确。6.下图甲、乙、丙分别是目的基因、质粒载体、重组DNA（重组质粒）的三个示意图，限制酶有Bgl、EcoR和Sau3A。要获得理想的可表达目的基因的重组DNA，最佳的限制酶组合方式是（）A. 用EcoR切割目的基因和质粒载体B. 用Bgl和EcoR切割目的基因和质粒载体C. 用Bgl和Sau3A切割目的基因和质粒载体D. 用EcoR和Sau3A切割目的基因和质粒载体【答案】D【解析】【分析】本题以图文结合为情境，考查学生对生基因工程的基本操作程序的相关知识的识记和理解
10、能力，以及识图分析能力。【详解】依题意并分析图示可知：只有用EcoR和Sau3A切割目的基因和质粒载体，在构建的重组DNA（重组质粒）中，RNA聚合酶在插入目的基因上的移动方向才与图丙相同，A、B、C均错误，D正确。7.盐害是全球水稻减产的重要原因之一，中国水稻研究所等单位的专家通过农杆菌中的质粒将CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因5个耐盐基因导入水稻，获得了一批耐盐转基因植株。有关耐盐转基因水稻培育的分析正确的是（ ）A. 该转基因水稻与原野生型水稻存在生殖隔离B. 该基因工程所需的限制性核酸内切酶可能有多种C. 只要目的基因进入水稻细胞，水稻就会表现出抗盐
11、性状D. 可通过将水稻种植到有农杆菌的土壤中观察目的基因是否表达【答案】B【解析】该转基因水稻与原野生型水稻属于同一个物种，不存在生殖隔离，A错误；该基因工程涉及多个目的基因，所以该基因工程所需的限制性核酸内切酶可能有多种，B正确；基因是选择性表达的，目的基因进入水稻细胞，还要检测水稻是否表现出抗盐性状，C错误；可通过将水稻种植到盐碱含量高的土壤中观察目的基因是否表达，D错误。8.用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是（）A. 如图中两种酶识别的核苷酸序列不同B. 如图中酶切产物可用于构建重组DNAC. 泳道中是用Sa
12、lI处理得到的酶切产物D. 图中被酶切的DNA片段是单链DNA【答案】D【解析】【分析】该题考查DNA的结构、限制酶的特点和功能等。DNA一般是双螺旋结构；限制酶可以识别特定的脱氧核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割。【详解】限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列，不同的限制酶能识别不同的核苷酸序列，由电泳图可知XhoI和SalI两种酶分别切割时，识别的序列不同，A正确；同种限制酶切割出的DNA片段，具有相同的粘性末端，再用DNA连接酶进行连接，可以构成重组DNA，B正确；SalI将DNA片段切成4段，XhoI将DNA片段切成3段，根据电泳结果可知泳道为SalI，泳道为
13、XhoI，C正确；限制酶切割双链DNA，酶切后的DNA片段仍然是双链DNA，D错误，所以选D。【点睛】注意图1两种限制酶的识别位点数量，SalI有3个识别位点，能将DNA片段切成4段，XhoI有2个识别位点，能将DNA片段切成3段。9.下列叙述正确的是（ ）A. 抗原-抗体杂交技术可检测mRNA合成情况B. 花药离体培养时要对外植体进行消毒处理C. 动物细胞核移植以受精卵作为受体细胞D. 可以用灭活的病毒诱导原体质体融合【答案】B【解析】【分析】植物体细胞杂交和动物细胞融合比较：项目细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性，（细胞的全能性）去除细胞壁后诱导原生质体融合离
14、心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后，诱导细胞融合离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导制备单克隆抗体的技术之一【详解】A、检测目的基因是否翻译成蛋白质，采用抗原-抗体杂交技术，A错误；B、花药离体培养时要对外植体进行消毒处理，B正确；C、培育转基因动物应选择细胞受精卵（）作为受体细胞，而哺乳动物细胞核移植时一般选择次级卵母细胞为受体细胞，C错误；D、可以用离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导原体质体融合，灭火病毒用于动物细胞融合，D错误。故选B。【点睛】该题目主要考查细胞工程相关知识，要求考生识记理解相关知识点，难度一般。10.
15、 关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是A. 动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同B. 动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C. 烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖D. 动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒【答案】B【解析】【分析】植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基成分营养物质（蔗糖）、植物激素等营养物质（葡萄糖）、动物血清等培养结果植物体细胞株、细胞系培养目的快速繁殖、培育无毒苗等获得细胞或细胞产物分散处理无有脱分化有无【详解】A、动
16、物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同，动物细胞培养采用的是液体培养基、植物组织培养采用的是固体培养基，A正确；B、动物细胞培养需要用胰蛋白酶处理，但植物组织培养过程不需要胰蛋白酶处理，B错误；C、植物细胞具有全能性，因此烟草叶片离体培养能产生新个体；小鼠杂交瘤细胞可以在体外培养条件下无限增殖，因此小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖，C正确；D、动物细胞培养可以用于检测有毒物质，茎尖（几乎不含病毒）培养可用于植物脱除病毒，D正确。故选B。11.下列生物工程技术中，一定要来自同一个物种的是（ ）核移植中细胞核和细胞质来源 动物细胞融合中的两个细胞牛胚胎移植中胚胎的供体与受体 植物体细胞杂交中两个体细胞
17、A. B. C. D. 【答案】B【解析】核移植中细胞核和细胞质的来源可以是不同物种，如我国科学家童第周做的金鱼细胞核移植实验是将金鱼的细胞核移植到去核的角皮鱼卵内，错误；动物细胞融合中的两个细胞可以来自不同物种，如人鼠细胞融合，错误；牛胚胎移植中胚胎的供体与受体必须来自同一个物种，这样才不产生排斥反应，移植才成功，正确；植物体细胞杂交中两个体细胞可来自不同物种，如番茄可与马铃薯杂交获得杂种植株，错误。综上所述，B项正确，A、C、D三项均错误。【点睛】解答此题的关键是围绕“一定要来自同一个物种”这一信息作为解题的切入点进行思考，结合所学的有关核移植、动物细胞融合、胚胎移植的生理学基础、植物体细
18、胞杂交技术的知识分析各选项，不难得出正确的答案。本题的易错点在于：误认为动物细胞核移植技术中细胞核和细胞质需来自同一物种，解答此题的关键在于课堂上教师是否进行相应的拓展。12.图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoR、BamH、Hind的酶切位点。下列有关叙述错误的是( )A. 在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRB. 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoR酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoR酶切点有1个C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA
19、片段自身环化，酶切时可使用BamH和Hind两种限制酶同时处理D. 一个图1所示的质粒分子经EcoR切割后，含有2个游离的磷酸基团【答案】B【解析】目的基因两侧都有，且质粒也有的限制酶是EcoR，所以在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，可选EcoR，A正确；如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoR酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoR酶切点有2个，B错误；为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamH和Hind 两种限制酶同时处理，C正确；一个图1所示的质粒分子经EcoR切割后，产生两个黏性末
20、端，含有2个游离的磷酸基团，D正确。13.某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp)，先用限制性核酸内切酶a完全切割，再把得到的产物用限制性核酸内切酶b完全切割，得到的DNA片段大小如下表。限制性核酸内切酶a和b的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关叙述错误的是a酶切制产物(bp)b酶再次切割产物(bp)2100；1400；1000；5001900；200；800；600；1000；500A. a酶与b酶切断的化学键相同B. 该DNA分子中a酶能识别的碱基序列有3个C. 仅用b酶切割该DNA分子至少可得到三种DNA片段D. 限制性核酸内切酶a和b切出的DNA片段不能相互连接【答案】D【解析
21、】【分析】本题结合图表信息，考查学生对限制性核酸内切酶的功能等相关知识的识记和理解能力，意在考查学生获取图示信息的能力、分析和判断能力。【详解】a酶与b酶切断的化学键相同，都是磷酸二酯键，A正确；a酶把含有5000个碱基对（bp）的线性DNA分子切成4段，说明该DNA分子上有3个a酶能识别的碱基序列，B正确；b酶把含有2100个bp的DNA片段切成大小分别为1900个bp和200个bp的两个片段，把含有1400个bp的DNA片段切成大小分别为800个bp和600个bp的两个片段，说明该DNA分子上至少有2个b酶能识别的碱基序列，因此仅用b酶切割该DNA分子至少可得到三种DNA片段，C正确；分析
22、图示可知：限制性核酸内切酶a和b切割后产生的DNA片段的黏性末端相同，它们之间能相互连接，D错误。故选D。【点睛】以图示呈现的限制酶a和b 的识别序列和切割位点、表中呈现的DNA片段的种类及其大小等信息为切入点，明辨该线性DNA分子上含有的酶a和b 的识别序列和切割位点的数目，据此分析各选项（下图为分析得出限制酶a和b在含有5000个bp的线性DNA分子上分布的一种情况）。14.下列关于病毒的叙述正确的是（ ）病毒的衣壳决定其抗原的特异性,在生态系统中作为消费者含RNA的病毒较含DNA的病毒更易发生变异病毒呈现不同形态的直接原因是衣壳粒的排列方式不同灭活的病毒不具有抗原性，可作为细胞工程的诱导
23、剂生物学家认为病毒是生物，其主要理由是能够在寄主体内完成遗传物质的自我复制A. 四项正确B. 仅一项正确C. 两项正确D. 三项正确【答案】A【解析】【分析】病毒是一类无细胞结构的生物，它主要由衣壳粒（含多种蛋白质）和一种核酸（DNA或RNA）组成，只能专一性寄生在活细胞内才能生活与繁殖，换句话说，病毒只能利用自身的核酸作为遗传物质，依靠寄生细胞提供的原料、能量、酶、场所等合成自身所需的核酸和蛋白质。病毒能侵染特定的活细胞是因为它具有特定的一些衣壳蛋白，这也决定了病毒具有其抗原特异性，同样也利用病毒的这一特异性选做为基因工程的载体和细胞融合工程的诱导剂等。【详解】不同病毒的衣壳蛋白有特定的结构
24、基团，决定其抗原的特异性，在生态系统中作为消费者，正确；由于RNA通常是单链，结构不稳定，与细胞中双链DNA相比较，更容易发生变异，所以含RNA的病毒较含DNA的病毒更易发生变异，正确；病毒衣壳蛋白质是病毒形态直接体现者，所以病毒呈现不同形态的直接原因是衣壳粒的排列方式不同，正确；灭活的病毒往往还具有抗原性，所以可作为细胞工程的诱导剂，错误；生物学家认为病毒是生物，其主要理由是能够在寄主体内完成遗传物质的自我复制，正确；综上所述，正确的选项有四项，故选A。【点睛】分析本题关键要熟悉一般病毒的化学组成、生活与繁殖方式以及作为抗原、载体、诱导剂的原理。15.“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列
25、关于筛选的叙述中正确的有几项( )基因工程中用同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因，酶切产物用DNA连接酶连接，为了保证成功率，需将获得的产物筛选后导入受体细胞单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞 单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞 为了快速繁殖无子西瓜，需筛选出特定染色体组数的体细胞才能进行组织培养A. B. C. D. 【答案】A【解析】【分析】1、基因工程中标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 2、单克隆抗体制备的两次筛选：筛选得到杂交瘤细胞
26、（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。【详解】基因工程中用同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因，将酶切产物用DNA连接酶连接，由于连接产物存在目的基因和目的基因的连接体、运载体和运载体的连接体以及目的基因和运载体的连接体，为了保证成功率，需将获得的产物导入受体细胞，然后对受体细胞再进行筛选，即选择出导入重组质粒的受体细胞再继续培养，错误；单克隆抗体制备的过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞，去除了未融合的细胞和自身融合的细胞，第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞，即第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，正确；为了快
27、速繁殖无子西瓜，可采用植物组织培养的方法，不需要筛选特定染色体组数的体细胞就能进行组织培养，错误。故选A。16.关于现代生物技术相关知识的叙述，其中正确的是（ ）A. 动物细胞培养与植物组织培养均需使用胰蛋白酶处理B. 将二倍体玉米花粉和二倍体水稻花粉进行细胞杂交获得的植株为二倍体，但不可育C. 限制酶切割DNA分子,从DNA分子中部获取目的基因时,同时有两个磷酸二酯键被水解D. 将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中能防止基因污染是因为叶绿体基因组不会进入到生殖细胞中【答案】B【解析】动物细胞培养使用胰蛋白酶处理，植物组织培养不需使用胰蛋白酶处理，A错误；将二倍体玉米花粉和二倍体水稻花粉都
28、含一个染色体组，二者进行细胞杂交获得的植株为异源二倍体，由于来自于玉米的染色体与来自于水稻的染色体在减数分裂时不能正常联会而不能产生正常的生殖细胞，所以该二倍体杂种植株不可育，B正确；限制酶切割DNA分子，从DNA分子中部获取目的基因时，同时有4个磷酸二酯键被水解，C错误；将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中能防止基因污染是因为精子含有很少量的细胞质，叶绿体基因组不会随花粉进入到受精卵中，但可以进入卵细胞中，D错误。17. 蛋白质工程的基本流程正确的是（ ）蛋白质分子结构设计DNA合成预期蛋白质功能根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列A. B. C. D. 【答案】C【解析】蛋白质工程的基本流
29、程是：预期蛋白质功能预期蛋白质分子结构组成据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列合成DNA，故选C。【考点定位】蛋白质工程【名师点睛】蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质；而基因工程原则上能生产自然界原有的蛋白质。18.下列关于细胞工程的有关叙述，正确的是()A. 利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄 、马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术B. 在进行组织培养时，由根尖细胞
30、形成愈伤组织的过程中，不可能会发生细胞脱分化和基因突变，而可能发生细胞分化和基因重组C. 动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体D. 动物难以克隆的根本原因是基因组中的基因不完整【答案】A【解析】花药离体培养和杂种细胞培育成杂种植株都利用了植物组织培养技术，A正确；在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，因细胞分裂则可能发生基因突变，但因不发生减数分裂，所以不会发生基因重组，B错误；动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均不相同，而且只有植物体细胞杂交能产生杂种植株，C错
31、误；动物难以克隆的根本原因是其全能性较低，D错误。19.下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图，没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列说法不正确的是A. 单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的B. 活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程C. 在治疗中，应先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物导弹D. 单克隆抗体特异性强，能减轻阿霉素对正常细胞的伤害【答案】C【解析】【详解】A、单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和B细胞融合形成的杂交瘤细胞合成和分泌的，A正确；B、活化的阿霉素是抑制DNA和RNA的合成的，DNA合
32、成是经过DNA的复制，RNA的合成是转录，B正确；C、根据图形信息阿霉素的活化需要生物导弹携带的碱性磷酸酶，所以在治疗中，应先注射生物导弹再注射非活化磷酸阿霉素，但不能间隔时间太长，因为没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除，C错误；D、单克隆抗体具有特异性强，灵敏度高可大量制备的特点，根据特异性强这一特点，在该过程中是针对肿瘤细胞的，所以能减轻阿霉素对正常细胞的伤害，D正确。故选C。20.如图，核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶。制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养
33、基”来筛选特定的杂交瘤细胞。关于筛选原理的叙述正确的是 A. 免疫的B细胞及其相互融合细胞因全合成途径被A阻断，在HAT培养基上不能增殖B. 骨髓瘤细胞及其相互融合细胞因无法进行上述两个途径，而在HAT培养基上不能增殖C. 杂交瘤细胞因为可进行上述两个途径，能在HAT培养基上大量增殖D. HAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞，既能大量增殖又能产生较高纯度的目标抗体【答案】B【解析】【分析】据题图分析可知，核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径；加入H、A、T三种物质，正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，能进行补救合成途径；制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶，
34、无法进行上述两个途径而在HAT培养基上不能增殖。【详解】A、免疫的B细胞及其互相融合细胞是有补救合成途径的，但是因为这两种细胞本身不增殖，所以在HAT培养基上不会有这两种细胞的增殖，A错误；B、骨髓瘤细胞及其互相融合细胞因无法进行上述两个途径而在HAT培养基上不能增殖，B正确；C、杂交瘤细胞因为可以进行补救合成，所以能在HAT培养基上大量增殖，C错误；D、HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞，并不都能产生高纯度的目标抗体，D错误。故选B。【点睛】本题考查单克隆抗体的制备，意在考查考生理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释
35、、推理，做出合理的判断或得出正确的结论。准确分析题图获取有效信息及对相关知识的掌握是解题关键。21.下图为双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，利用细胞工程技术制备的单克隆抗体能增强该过程的有效性，下列相关叙述正确的是A. 将相关抗原注射到小鼠体内，可从小鼠脾脏中获得所需的单克隆抗体B. 固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于两者结构相同C. 加入酶标抗体的目的是通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量D. 该方法与只使用单克隆抗体相比，能增加识别抗原的种类【答案】C【解析】【分析】1、据图分析，固相抗体和抗原特异性结合，再与酶标抗体结构，催化特定底物形成检测产物。2、单克隆抗体的制备
36、过程的细节：（1）二次筛选：筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。（2）细胞B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。（3）杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。【详解】A、将相关抗原注射到小鼠体内，可从小鼠脾脏中获得能产生相应抗体的B淋巴细胞，A错误；B、据图可知，固相抗体和酶标抗体分别与抗原的不同部位结合，说明两者的结构不同，B错误；C、加入酶标抗体的目的是酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量，C正确；D、据图可知，该方法没有增加识别抗原的种类，D
37、错误。故选C。22.某研究小组为测定某种药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列叙述正确的是A. 制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块B. 培养液需含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等C. 为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素D. 甲、乙细胞在持续的传代培养过程中，均会出现停止增殖的现象【答案】C【解析】【分析】1、动物细胞培养的过程：取动物组织块剪碎组织用胰蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养液中（原代培养）放入二氧化碳培养箱培养贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液转入培养液
38、（传代培养）放入二氧化碳培养箱培养。2、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：消毒、灭菌；添加一定量的抗生素；定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和怕pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。【详解】A、在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存，A错误；B、培养液需含有葡萄糖、氨基酸、无机盐和动物血清等，不需要加入生长素，并且生长素属于植物激素，B错误；
39、C、为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素，C正确；D、肝肿瘤细胞属于癌细胞，癌细胞没有出现接触抑制的现象，不会停止增殖，D错误。故选C。【点睛】解答本题的关键是了解到甲细胞是肿瘤细胞，具有无限增殖的能力，不会出现停止增殖的现象。23.下列关于动物细胞工程的叙述，错误的是（）A. PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养不能得到优良动物个体B. 使用冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型C. 在高倍显微镜下观察发生基因突变的细胞比例可推知某化学药品的毒性D. 胰蛋白酶处理动物组织后，用培养液稀释制成细胞悬浮液【答案】C【解析】【分析】
40、本题考查动物细胞培养的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识要点，对生物学问题作出准确判断的能力。【详解】由于动物细胞的全能性受到限制，动物细胞融合形成的杂种细胞不能培育成动物，A正确；目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型，B正确；基因突变是指基因中碱基对的增添、缺失或替换，使基因结构改变，在显微镜下不能观察到，C错误；动物细胞的培育过程是进行细胞培养时用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞，再用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液，D正确。【点睛】动物细胞培养只
41、能得到大量细胞或细胞产物，不能得到动物个体。24.下列有关核移植的叙述中，正确的是A. 卵母细胞最好选择减数第一次分裂中期的卵母细胞B. 胚胎核移植难度明显高于体细胞核移植C. 供体细胞应选择传代10代以内的细胞D. 通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞动物进行了100%的复制【答案】C【解析】【分析】动物细胞培养过程中10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。动物胚胎分化程度低，全能性的恢复更容易，而动物体细胞分化程度高，恢复全能性十分困难。【详解】减数第二次分裂中期的卵母细胞才具备与精子受精的能力，故核移植时卵母细胞最好选择减数第二次分裂中期的卵母细胞，A错误；动物胚胎分化程度低
42、，恢复全能性更容易，而动物体细胞分化程度高，恢复全能性十分困难，故动物体细胞核移植难度明显高于胚胎核移植，B错误；10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，故供体细胞应选择传代10代以内的细胞，C正确；生物的性状是由细胞核基因和细胞质基因共同控制的，体细胞核移植方法生产的克隆动物只是将核基因传递给了子代，质基因并没有传给子代，故对体细胞动物并不是进行了100%的复制，D错误。故选C。【点睛】熟悉核移植的过程是解题的关键。25.下列哪些过程发生在受精过程中精子发生顶体反应释放顶体酶顶体酶的作用使精子穿过放射冠、透明带、卵细胞膜卵子完成减数第一次分裂精子的核变成雄原核、卵子的核成为雌原核防止多精
43、入卵的透明带反应A. B. C. D. 【答案】B【解析】受精过程中，获能后的精子与卵子相遇时，首先发生顶体反应，顶体内的酶释放出来，故正确；顶体释放的顶体酶可溶解放射冠卵丘细胞之间的物质和透明带，形成精子通过的通道；精子与卵黄膜结合是由于卵细胞膜表面有大量微绒毛，当精子与卵细胞膜接触时，立即被微绒毛抱合，随后，精子外膜和卵细胞膜相互融合，这里不再是顶体酶的作用，故错误；精子入卵后被激活的卵子完成减数第二次分裂，故错误；精子入卵后，尾部脱落，原有核膜破裂，随后形成新的核膜，形成一个比原来精子核还大的核，叫做雄原核；减数第二次分裂后形成的成熟卵细胞的核叫做雌原核，故正确；透明带反应是在精子触及卵
44、细胞膜的瞬间，产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应，防止多个精子进入透明带，是引起多个精子入卵的第一道屏障，故正确；综上所述，因为正确，错误，所以，本题正确答案为B。【点睛】顶体酶的作用：溶解放射冠卵丘细胞之间的物质和透明带，形成精子通过的通道；尤其注意不能溶解卵细胞膜。26.下图是快速RT-PCR过程示意图，和为逆转录酶催化的逆转录过程，是PCR过程。据图分析下列说法错误的是（ ）A. 逆转录酶具有DNA聚合酶能力B. PCR过程只需要引物bC. RT-PCR可检测基因表达水平D. RT-PCR可检测新冠病毒等RNA病毒【答案】B【解析】【分析】据图可知，逆转录酶可以催化以RNA为模板合成
45、cDNA，还可催化以cDNA为模板合成其互补DNA；RT-PCR过程中需要a、b两种引物。【详解】A、逆转录酶催化合成DNA，所以具有DNA聚合酶的能力，A正确；B、PCR过程需要引物a、b，因为后续的模板链序列既有与靶RNA一致的，也有与cDNA一致的，B错误；C、RT-PCR可检测基因的转录情况从而推知基因的表达水平，C正确；D、通过设计RNA的特异性引物进行RT-PCR检测新冠病毒等RNA病毒，D正确。故选B。27.限制性核酸内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切,不同的限制性核酸内切酶可以对不同的核酸序列进行剪切。现用3种不同的限制性核酸内切酶对一个6.2 kb (千碱基对)大小的线状
46、DNA进行剪切后,用凝胶电泳分离各核酸片段,实验结果见下表。 请问:3种不同的限制性核酸内切酶在此DNA片段上的切点位置是图中的（ ）A. B. C. D. 【答案】D【解析】【分析】限制性内切酶具有特异性，一种限制性内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切，且不同的限制性内切酶可以对不同的核酸序列进行剪切。【详解】先根据B、C和B+C切割后的片段可知B点位于C切割形成的3.6片段中，再结合A、A+B和A+C切割后的片段可知A点位于B切割的1.0片段和C切割的1.4片段中，即D项正确。故选D。【点睛】考查限制酶的作用，需结合多个片段进行判断。28.某农业研究所将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因（Bt）导
47、入棉花，筛选出Bt基因成功整合到染色体上的抗虫植株（假定Bt基因都能正常表达）。某些抗虫植株体细胞含两个Bt基因，这两个基因在染色体上的整合情况有右图所示的三种类型（黑点表示Bt基因的整合位点）；让这些含两个Bt基因抗虫的植株自交，后代含抗虫基因的个体的比例大小顺序是 （ ） A. 甲、丙、乙B. 甲、乙、丙C. 丙、乙、甲D. 乙、甲、丙【答案】A【解析】【分析】分析题图：甲植株相当于是Bt基因纯合子，其产生的配子均含有Bt基因；乙植株相当于是Bt基因杂合子，其产生的配子中有1/2含有Bt基因；丙植株相当于是Bt基因杂合子，其产生的配子中有3/4含有Bt基因。据此答题。【详解】由题意和图可知
48、：（1）甲自交时产生的配子都含有抗虫基因，后代全部抗虫。（2）乙自交时产生的配子中有1/2不含抗虫基因，在后代中有1/4不抗虫，抗虫的占3/4。（3）丙产生的配子中有1/4不抗虫，故后代中不抗虫个体占1/16，抗虫的占15/16。故抗虫基因的个体比例从大到小应是甲、丙、乙，A正确；B、C、D错误。故选A。29.目前，欧洲、亚洲许多国家都发现了禽流感疫情，并引起了人体感染，造成多人死亡。科学工作者经研究，发现了数种快速检验禽流感病原体的方法，以正确诊断禽流感，下列与禽流感病原体研究、诊断有关的说法中错误的是：A. 镜检法：在光学显微镜下直接观察病人的痰液或血液，以发现病原体B. PCR：体外基因
49、复制技术，可在几十分钟内把病原体的基因扩展到数百万倍C. 抗原抗体法：用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合，发现病原体D. DNA探针技术：用放射性同位素、荧光因子等标记的DNA 分子做探针，利用DNA分子杂交原理来检测病原体【答案】A【解析】分析：目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：DNA-DNA分子杂交技术；DNA-RNA分子杂交技术；抗原-抗体杂交技术。（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定等。当用一段已知的基因序列作探针，与变性后的单链DNA接触时，如果两者互补结合成双链，表明被测DNA中含有已知的基因序列。详解：A. 病毒在光学显微镜下无法看到，只有
50、在电子显微镜下才能观察到，A错误；B. PCR用于体外快速扩增特定基因或DNA序列，B正确；C. 病原体进入人体后会刺激机体产生特异性免疫反应，产生相应抗体，由于抗体与抗原结合具有特异性，因此用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合，可发现病原体，C正确；D. 可以利用DNA分子作为探针，通过DNA分子杂交技术检测病原体，D正确。点睛：本题主要考查基因工程中常见的技术，要求学生能够识记基因工程中相关技术的应用，同时能够理论联系实际，运用生物学原理解释生活中的生物学问题。30.用DNA连接酶把被限制酶（识别序列和切点是GATC）切割过的运载体和被限制酶（识别序列和切点是GGATC
51、C）切割过的目的基因连接起来后，该重组DNA分子能够再被限制酶切割开的概率是A. 1/2B. 7/16C. 1/16D. 1/4【答案】B【解析】【分析】重组DNA分子要能够再被限制酶切割开，就也应该具有识别序列和切点：GGATCC，而题中所述切割后重组有两种情况：情况一： GATC GGATC C GATC C CTAG C CTAGG CTAG G运载体片段 目的基因片段 重组DNA分子片段情况二：GATC GGATC C G GATC CTAG C CTAGG C CTAG运载体片段 目的基因片段 重组DNA分子片段【详解】若要每种情况都含序列GGATCC，情况一重组DNA分子片段左侧碱
52、基须是G，概率为1/4（A、G、C、T之一），情况二重组DNA分子片段右侧碱基须是C，概率同为1/4（A、G、C、T之一），考虑到两种情况同时符合要求的重复情形，要减去一个1/41/4，从而有1/4+1/41/41/4= 7/16。故选B。二、综合题31.图1是某生态系统中组成食物链三个种群（、）一年内能量流动统计的部分数据（图中数值单位是100万kJ）。图2是能量流经卷叶螟的示意图，其中AC代表能量，数值表示能量值，单位为J/（hm2a）。回答有关问题： （1）图1中三个种群组成的食物链是_。不同营养级之间能量以_形式流动，第一营养级到第二营养级的能量传递率约为_（保留1位小数）。（2）图2
53、中A表示的含义是_，B的数值为_J/（hm2a），图中C的能量来源是_同化的能量。已知图2卷叶螟以水稻为食，则水稻同化的能量至少为_ J/（hm2a）。（3）生态系统能量流动的特点是_。【答案】 (1). 种群II种群I种群III (2). 有机物中的化学能 (3). 13.5% (4). 卷叶螟同化能量 (5). 2.45109J/（hm2a） (6). 卷叶螟和水稻 (7). 3.51010J/（hm2a） (8). 单向流动、逐级递减【解析】【分析】据图分析，图1是某生态系统中组成食物链的三个种群（、）一年内能量流动统计的部分数据（图中数值单位是100万kJ），其中种群同化的能量最多，种
54、群同化的能量次之，种群同化的能量最少，因此食物链为种群种群种群；图2表示能量流经某生态系统第二营养级的示意图，其中A表示卷叶螟同化的能量；B表示卷叶螟用于生长、发育和繁殖的能量；C表示分解者利用的能量。【详解】（1）根据以上分析已知，图1中存在的食物链为种群种群种群；能量在不同营养级之间以有机物形式流动；第一营养级到第二营养级的能量传递率=第二营养级同化的能量第一营养级同化的能量=15111=13.5%。（2）根据以上分析已知，图2中A表示卷叶螟同化的能量；B表示卷叶螟用于生长、发育和繁殖的能量；C表示分解者利用的能量；B的数值=1.051010-3.5109-4.55109=2.45109J
55、/（hm2a）；C包括卷叶螟粪便中的能量（属于其上一个营养级水稻的同化量）和卷叶螟遗体残骸中的能量（卷叶螟同化的能量），因此，C的能量来源是卷叶螟和水稻同化的能量；由题干中的关键词“至少”，可知能量的传递效率按20%计算，所以水稻同化的能量至少为（1.051010-3.5109）20%=3.51010 J/（hm2a）。（3）生态系统的能量流动具有单向传递、逐级递减的特点。【点睛】解答本题的关键是是掌握生态系统的能量流动的过程及其特点，能够根据能量流动逐级递减的特点分析图1中存在的食物链，并能够根据能量流动的几个去向分析图2中各个字母代表的能量的种类。32.下图为三种质粒和一个含目的基因的 D
56、NA 片段，其中 Ap 为氨苄青霉素抗性基因，Tc 为四环素抗性基因，lacZ 为蓝色显色基因，EcoR（0.7Kb）、Pvu（0.8Kb）等为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。已知1 kb1000个碱基对的长度。请回答下列问题：（1）片段 D 为目基因中的某一片段，则限制酶和 DNA 连接酶的作用部位依次是_ 、_（填图中数字标号）（2）图中能作为目的基因运载体最理想的质粒是_（填A/B/C）据图分析，其他两种质粒一般不能作为运载体的理由分别是_、_。（3）如果将目的基因和质粒 A 构建重组质粒,然后再用 EcoR酶切这个重组质粒，进行电泳观察，可出现长度分别为 1.1 kb 和_kb
57、 的两个片段，或者长度分别为_kb 、_kb的两个片段。【答案】 (1). (2). (3). B (4). 质粒A缺少标记基因 (5). 质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被破坏 (6). 5.4 (7). 3.1 kb (8). 3.4kb【解析】【分析】分析题图：如图所示为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段示意图图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因。EcoR（0.7Kb）、Pvu（0.8Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离。片段D中，是氢键，是磷酸二酯键。【详解】（1）DNA聚合酶和DNA连接酶的作用部位均为磷酸二酯键，即
58、图中部位。（2）图中质粒A缺少标记基因；质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被限制酶切割，会影响重组质粒的自主复制因此，能作为目的基因运载体最理想的质粒是B。（3）目的基因和质粒A形成的重组质粒总长度为4.0+2.5=6.5kb（质粒+切割出来的目的基因）、其中重组质粒含有两个EcoR酶切位点，一个在插入的目的基因中，一个在原质粒中。若用EcoR酶切该重组质粒必然会产生2个片段，若产生的其中一个片段长度为1.1Kb，则说明另一个片段6.5-1.1=5.4kb；若目的基因与质粒A的连接位置与前一种刚好相反，重组质粒的总长度不变，但经EcoR酶切后产生的两个片段长度不同，分别为（1.
59、3-1.2）+（4.0-1.0）=3.1Kb、6.5-3.1=3.4Kb。【点睛】本题难点在于分析解决（3）小题，关键理解题意中“每种限制酶的切割位点与复制原点的距离”，以及目的基因（4.0Kb）和质粒A的长度（2.5Kb）；当目的基因插入质粒A后的总长度为6.5Kb；其次要理解目的基因的两端与Pvu酶切出的两个质粒切口链接时有两种方向，导致插入的目的基因中EcoR酶切点与原质粒A中EcoR酶切点之间的距离不等，所以EcoR酶切割后悔产生不同长度的两种片段。33.癌症是人类健康杀手之一，临床实验表明，红豆杉树皮产生的紫杉醇对癌症有一定的疗效。下面是以红豆杉为材料利用植物组织培养和细胞培养技术生
60、产紫杉醇的流程图。请据图回答下列问题：（1）图中为愈伤组织，通过B过程可最终产生新的植株，通过C过程可产生大量细胞，则图中A、B、C分别表示的过程为脱分化、_、_。其中B过程的实质是_。（2）对的培养一般要采用液体培养基，并要不断通入无菌空气且进行搅拌，其目的是_且_。（3）对的培养可获得代谢产物一一紫杉醇，但培养后期紫杉醇产量下降，其原因包括_等。（4）若是红豆杉（基因型为DdTt）的花药，可选用_（填编号）制成人工种子，该“种子”萌发的幼苗用_处理，可快速获得纯种植株，纯种植株的基因型为_。【答案】 (1). 再分化 (2). 有丝分裂（细胞分裂） (3). 基因的选择性表达 (4). 保
61、证氧气的供应 (5). 使细胞和培养液充分接触 (6). 某些代谢产物的积累、营养物质的消耗 (7). (8). 秋水仙素 (9). DDTT、DDtt、ddTT、ddtt【解析】【分析】图中为红豆杉离体的植物器官、组织或细胞（外植体），为愈伤组织，为试管苗（胚状体），为植物体，为大量的红豆杉细胞；再分化的实质是细胞内基因的选择性表达。的培养目的是使细胞快速增殖，一般采用液体培养基进行培养，在培养过程中通入无菌空气是为了保证细胞生长过程中氧气的供应，不断搅拌的目的是让细胞和培养液充分接触；液体培养的后期，由于细胞代谢产物的积累，以及营养物质的消耗，导致细胞数量减少，其代谢产物减少；红豆杉的花药
62、经培养可获得单倍体，再经秋水仙素处理，可使染色体加倍，快速获得纯种植株；如果亲本的基因型为DdTt，则获得的纯种植株的基因型有DDTT、DDtt、ddTT、ddtt四种。【详解】（1）图中为愈伤组织，通过B过程可最终产生新的植株，通过C过程可产生大量细胞，则图中A、B、C表示的过程分别称为脱分化、再分化、有丝分裂，其中B再分化过程的实质是基因的选择性表达。（2）对的培养一般采用液体培养基，并要不断通入无菌空气并进行搅拌，其目的是保证氧气的供应，使细胞和培养液充分接触。（3）液体培养的后期，由于细胞代谢产物的积累，以及营养物质的消耗，导致细胞数量减少，其代谢产物减少。（4）若是红豆杉（基因型有D
63、dTt）的花药，可选用胚状体制成人工种子，该“种子”萌发的幼苗用秋水仙素处理，可快速获得纯种植株。DdTt的花药类型有：DT、Dt、dT、dt，形成的幼苗类型有：DT、Dt、dT、dt，用秋水仙素处理使染色体数目加倍，纯种植株的基因型为DDTT、DDtt、ddTT、ddtt。【点睛】本题考查植物组织培养技术，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。34.核酸检测作为确诊新型冠状病毒肺炎的金标准，写入了国家卫健委颁布的诊疗指南里，但依然出现了少数“假阴性”病例，此时采用免疫检测则可以很
64、大程度上避免核酸检测的“假阴性”。请回答下列问题：（1）开发核酸检测试剂盒，需要先分离毒株、获得完整基因组序列信息、设计特异性引物和探针的_，再据此用_方法直接人工合成特异性引物和探针。（2）我国研发的新型冠状病毒核酸快速检测试剂盒的检测原理是：若送检样本中存在病毒，则以病毒RNA为模板，在_酶的作用下合成cDNA，再加入互补的荧光探针、_种引物、四种脱氧核苷酸和_酶后，cDNA开始扩增，子链延伸至探针处，会水解探针释放出荧光基团产生荧光，荧光监测系统接收到荧光信号从而确诊。（3）我国新型冠状病毒化学发光检测试剂盒采用的是免疫检测，其中的单克隆抗体是由经病毒抗原蛋白免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞
65、融合制备的_细胞产生的；该试剂盒能快速确诊病例，这是因为单克隆抗体具有_等优点。【答案】 (1). 核苷酸序列 (2). 化学 (3). 逆转录酶 (4). 2 (5). Taq (6). 杂交瘤细胞 (7). 特异性强、灵敏度高、能够大量制备【解析】【分析】新型冠状病毒核酸检测，对于临床早发现、早诊断、早隔离、早治疗至关重要，是有效防控新冠肺炎疫情的关键技术支撑。病毒的特点就是形态非常小，在普通光学显微镜下看不到，肉眼更是无法直接观察。但每种病毒都有其独特的基因序列，通过检测病人体内的病毒核酸，就可判断病人体内是否存在病毒。病毒核酸检测试剂盒的一个优势就是研发过程很快，但前提是必须掌握一定量
66、的病毒基因序列。一旦有了病毒基因序列，通过生物信息学分析，就可确定候选的核酸检测靶标，并进行引物和探针的设计。核酸检测试剂盒的组分中，检测引物和探针最为关键。灵敏特异的扩增引物，对检测结果的准确与否发挥着至关重要的作用。所以，一般在研发阶段都会设计多对引物探针，通过实验筛选出扩增效果最好的引物探针，组装在病毒核酸检测试剂盒中。【详解】（1）开发核酸检测试剂盒时，需要先获得病毒完整的基因组序列信息，设计出特异性引物和探针的的核苷酸序列，再据此用化学方法直接人工合成特异性引物和探针。（2）以病毒RNA为模板合成cDNA的过程为逆转录，需要逆转录酶的催化；利用PCR技术扩增cDNA时，需要2种引物，
67、4种脱氧核苷酸和Taq酶。（3）单克隆抗体是由杂交瘤细胞（经病毒抗原蛋白免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合制备）产生的；单克隆抗体特异性强、灵敏度高、化学性质单一，可以大量制备。【点睛】解答本题的关键是熟悉新冠病毒的相关知识点，了解其遗传物质的组成，弄清楚新型冠状病毒核酸检测的原理、方法和过程，进而结合题干要求分析答题。35.截止2020年5月，新冠病毒（2019-nCoV）已在全球210多个国家和地区蔓延传播，引发了全球性的“防疫大战”。在防疫战中，尽早确诊并及时隔离是防止新冠病毒过度传播的有效手段。在现有的检测新冠病毒的方法中，最常用的是“荧光PCR法”。其基本原理是：将新冠病毒RNA逆转录
68、为DNA，通过采用多重荧光RT一PCR技术，以2019nCOV的两个独立基因ORF1ab基因和N基因的保守区为靶位点设计特异性的引物和一定量的荧光标记的DNA探针，单管双检同时测定新型冠状病毒两个独立基因，消除由于病毒变异带来的漏检风险。请回答下列问题：（1）“荧光PCR法”所用的试剂盒中通常都应该含有：_、_、引物、四种脱氧核苷酸、缓冲体系。（2）如果要成功将上述两个独立基因分别扩增出来，则在试剂盒中的引物应该有_种，下图为“基因ORFlab”对应的cDNA片段结构示意图，则与之对应的引物结合的部位应该是图中的_（用图中数学作答）。（3）在检测过程中，随着PCR的进行，反应产物不断累积，“杂
69、交双链”荧光信号的强度也等比例增加。可通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图（如图）。“平台期”出现的最可能原因是：_。理论上，在检测过程中，有荧光标记“杂交双链”出现，则说明检测结果呈_（填“阴”或“阳”）性，但为了保证检测结果的准确性，一般会设定“双链荧光强度”的阈值（如图虚线），即达到或超过阈值时才确诊。现有甲、乙两个待检样本，在检测过程中都出现了上述形态的曲线，但甲的a点比乙的a点明显左移。请给这种结果做出科学合理的解释（试剂盒合格且正常，操作过程规范且准确）：_。（4）某些“阴谋论者”认为新冠病毒是“生物武器”，但这显然是不攻自破的，因为任何热爱和平的国家、组织
70、和个人都不可能去研究这类“人类公敌”。早在1998年，中美两国元首在关于禁止生物武器公约议定书的联合声明中，重申：_。【答案】 (1). 逆转录酶 (2). 热稳定性DNA聚合酶（Taq酶） (3). 4 (4). 1和4 (5). 试剂盒中的原料和探针数量一定，超出一定的循环数后，荧光标记的“杂交双链”不再增加 (6). 阳 (7). 甲样本中的新冠病毒含量更高，达到國值所需的循环数更少 (8). 在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散【解析】【分析】PCR原理：在引物作用下，耐热DNA聚合酶从引物3端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5端
71、自3端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3端延伸DNA链。PCR反应过程是：变性复性延伸。【详解】（1）根据题目信息：“荧光PCR法”基本原理是：将新冠病毒RNA逆转录为DNA，通过采用多重荧光RT一PCR技术，因此，“荧光PCR法”所用的试剂盒中通常都应该含有：逆转录酶、热稳定性DNA聚合酶（Taq酶）、引物、四种脱氧核苷酸、缓冲体系。（2）根据PCR技术的原理，在扩增DNA分子时，每一条链均需与相应的引物结合才能进行扩增，因此如果要成功将上述两个独立基因分别扩增出来，则在试剂盒中的引物应该有4种；在利用PCR技术扩增DN
72、A分子过程中，DNA聚合酶只能从引物的3端开始连接脱氧核苷酸，又由于DNA的两条链是反向平行的，所以引物与DNA分子单链的3端（OH）相结合即图示中的1和4所示部位。（3）分析荧光扩增曲线图，图中曲线通过荧光强度变化反映产物量的变化，因此曲线中“平台期”出现的最可能原因是：试剂盒中的原料和探针数量一定，超出一定的循环数后，荧光标记的“杂交双链”不再增加。理论上，在检测过程中，有荧光标记的“杂交双链”出现，则说明检测结果呈阳性；为了保证检测结果的准确性，一般会设定“双链荧光强度”的阈值，即达到或超过阈值时才确诊。现检测结果甲的a点比乙的a点明显左移，说明甲样本中的新冠病毒含量更高，达到國值所需的循环数更少。（4）在1998年，中美两国元首在关于禁止生物武器公约议定书的联合声明中，重申：在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。【点睛】本题考查了PCR技术的相关知识，对于RNA逆转录、PCR技术扩增DNA片段的理解和操作流程，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
