1、双基限时练(十二)DNA粗提取与鉴定一、选择题1在提取DNA的过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是()A不易破碎 B减少DNA的损失C增加DNA的含量 D容易刷洗解析由于玻璃表面带电荷，DNA中的磷酸基也带电荷而被吸附于玻璃表面，故实验中用塑料烧杯和试管可减少DNA的损失。答案B2DNA粗提取实验中0.14 mol/L的NaCl溶液的作用是()A溶解含DNA的核物质B使DNA分子析出C进行DNA鉴定D保持DNA分子的完整性解析DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，故在操作过程中稀释NaCl溶液至0.14 mol/L，以使DNA分子析出。答案B3某同学用洋葱进行DNA粗提取和
2、鉴定实验，操作错误的是()A加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨B用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAC加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热解析在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行轻缓搅拌和研磨，而不能用力快速，这样会加快DNA的断裂，A项错；对于过滤后的研磨液中的DNA仍需用蛋白酶处理纯化，B项正确；加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌以防止破坏DNA，C项正确；加入二苯胺摇匀后要在沸水浴中加热进行鉴定，D项正确。答案A4在混合物中提取DNA分子的基本思路是()A根据各种大分子的理化性质的差异B根据各种大分子的理化性质的共性C根据各种大分子在细胞内的功能D根据各种大分子的结构
3、和在细胞内的位置解析提取生物大分子的基本原理是：选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理性质或化学性质的生物大分子。就DNA分子粗提取而言，就是利用DNA与RNA、蛋白质及脂质等物质在理化性质方面的差异而进行分离的。答案A5玻璃棒搅拌出的较纯净的DNA的颜色以及DNA遇二苯胺(沸水浴)染成的颜色分别是()A黄色紫色 B白色砖红色C白色蓝色 D蓝色砖红色解析较纯净的DNA是白色丝状物，DNA遇二苯胺，在沸水浴条件下会呈蓝色。答案C6如果在除去杂质时选择方案三，将滤液放在6075 的恒温浴箱中保温1015 min的目的是()A使DNA变性B使蛋白质变性C使DNA和蛋白质变性D分解蛋白质解析构成生物
4、体的大部分蛋白质不能忍受6080 高温，而DNA在80 以上才变性。在6075 恒温水浴箱中保温1015 min，目的是使蛋白质变性，然后分离得到DNA。答案B7若选择实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐。加入食盐的目的是()A利于DNA的溶解 B分离DNA和蛋白质C溶解细胞膜 D分解蛋白质解析食盐的主要成分是NaCl，破碎植物细胞时所用的NaCl有利于DNA溶解，从而使DNA被提取出来。答案A8欲使溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液中DNA析出，最有效的方法是()A加蒸馏水 B加矿泉水C加清水 D加生理盐水解析DNA在2 mol/L NaCl中溶解度最大，0.14
5、mol/L中溶解度最小，故析出的最有效方法是加蒸馏水稀释。答案A9在DNA的粗提取过程中，初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品的浓度及其名称分别是()0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液体积分数为95%的酒精溶液物质的量浓度为0.015 mol/L的NaCl溶液物质的量浓度为0.04 mol/L的NaCl溶液A BC D解析物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液能使DNA析出，蛋白质溶解；冷却的体积分数为95%的酒精能使DNA凝集析出。答案B10鉴定DNA时，DNA遇二苯胺会染成蓝色，应在什么
6、条件下出现此现象()A冷水中 B37 水浴C60 水浴 D沸水浴解析DNA鉴定过程中所用试剂为二苯胺，在沸水浴条件下DNA被染为蓝色。答案D11蛋白酶能将蛋白质水解而使染色体中的DNA分离出来，下列药品可达到上述同一目的的是()A蒸馏水 BNaCl溶液CNaOH溶液 D盐酸解析蛋白酶将染色体中DNA分解从而使DNA分离出来。利用0.14 mol/L的NaCl溶液处理，DNA溶解度最低，也把DNA分离出来，两者原理不同，但目的相同。答案B12与析出DNA黏稠物有关的叙述，不正确的是()A操作时缓缓滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度B操作时用玻璃棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整C加蒸馏水可以同时降低D
7、NA和蛋白质的溶解度D当丝状黏稠物不再增加时，NaCl溶液的浓度可认为是0.14 mol/L解析在2 mol/L NaCl溶液中加蒸馏水稀释过程，降低DNA溶解度，使DNA析出。答案C13在NaCl溶液中反复溶解、析出并过滤，就能除去DNA溶液中的杂质的理由不包括()A用高浓度盐溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质B用低浓度盐溶液使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质C反复操作就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质D反复操作就能够使各种杂质变性而沉淀析出解析DNA在不同浓度之间反复溶解、析出过程中，并未使蛋白质变性。答案D14下列关于DNA对高温的耐受性的说法，不正确的是()ADN
8、A对高温的耐受性一般要比蛋白质强B超过80 后DNA将变性，即使恢复到常温，生物活性也不能恢复C不同生物的DNA的“变性”温度不一定相同D深海热泉附近生活的生物的DNA对高温的耐受性更强，其DNA中鸟嘌呤所占的比例更高解析DNA超过80 变性，恢复到常温，生物活性将恢复。答案B15下列操作中，对DNA的提取量影响较小的是()A使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，释放出DNA等核物质B搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C在析出DNA黏稠物时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中黏稠物不再增多D在用酒精沉淀DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却解析让玻璃棒沿一个方向轻缓搅动，可以保证DNA分子的完整
9、性，但不影响提取量。答案B二、非选择题16关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验材料的选择，经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血做实验材料，请据下图回答问题：(1)与哺乳动物血细胞比较，鸡血细胞中红细胞_，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中_细胞数目较多，可以提供丰富的_。(2)实验前由教师用血细胞液供同学们做实验材料，而不是用鸡全血，重要原因是_。(3)在牧区采集牛、羊、马血比较方便，若用这些材料按实验要求完成实验步骤后，结果_ _，这是因为这些动物和人类一样，_ _。但若改用动物肝脏做实验材料，实验能顺利进行，这是因为 _。(4)若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加_程序，使组
10、织细胞更容易破裂。解析DNA粗提取所用材料应富含DNA，而哺乳动物成熟红细胞无细胞核，不宜作为实验材料；血液包括血浆和血细胞，血浆中不含DNA，去除血浆相当于浓缩了血细胞，使DNA相对含量提高。答案(1)含细胞核红DNA(2)鸡血细胞中DNA相对含量高(3)很难提取到DNA成熟红细胞中无细胞核肝细胞有细胞核(4)研磨17以下是有关DNA粗提取实验的阅读材料：A核酸极不稳定，在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制备DNA时要加入DNA酶(水解DNA的酶)的抑制剂柠檬酸钠，以除去Mg，防止DNA酶的激活。B核酸中的DNA和RNA在生物体内均以核蛋白(由核酸和蛋白质组成)的形式存在，
11、DNA核蛋白在2 molL1 NaCl溶液中溶解度很大，但在0.14 molL1 NaCl溶液中溶解度很低；而RNA核蛋白溶于0.14 molL1 NaCl溶液。C用苯酚处理，可使蛋白质变性，且留在苯酚层内；在DNA溶液中加入适量体积浓度为95%的酒精，可将DNA分离出来。此时DNA为黏稠的丝状物，可用玻璃棒卷起取出。DDNA在强酸环境下，水解产生脱氧核糖等小分子物质，它与二苯胺酸性溶液反应，能生成蓝色化合物。E实验材料与器械：柠檬酸钠溶液、石英砂、0.14 molL1 NaCl溶液、2 molL1 NaCl溶液、蒸馏水、苯酚、95%酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、
12、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。F实验步骤：研磨得匀浆过滤得滤液滤液稀释6倍离心处理得沉淀物沉淀物再溶解加苯酚静置后去上清液提取出DNADNA鉴定。阅读以上材料回答下列问题：(1)研磨时，取10 g花椰菜，加适量的石英砂和_、_。(2)将滤液稀释6倍，其目的是_。(3)取沉淀物，置于2 mL的1 molL1 NaCl溶液中，使DNA核蛋白再次溶解，再加2 mL苯酚充分振荡后静置，待其分层后弃其上层的苯酚。该步骤的目的是除去 _。(4)如何将剩余溶液的DNA提取出来？ 。(5)如何证明提取物确实是DNA分子？ 。解析本题考查学生对生物大分子分离方法的理解。NaCl溶液不同浓度可以使DNA溶解
13、或析出，柠檬酸钠可以保护DNA，避免被水解；苯酚可使蛋白质变性；二苯胺为DNA鉴定所用试剂。答案(1)2 mol/L NaCl溶液柠檬酸钠(2)降低NaCl浓度，使DNA析出(3)蛋白质(4)在溶液中加入等体积95%冷酒精，用玻璃棒搅拌，并将析出DNA丝状物卷起。(5)加入二苯胺的酸性溶液，水浴加热，如果出现蓝色，则证明提取到的丝状物为DNA。18下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验装置：(1)该实验依据的原理是()ADNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的不同而不同B利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNACDNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机
14、溶剂D在沸水中DNA遇二苯胺会出现蓝色反应(2)在图所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是_，通过图所示的步骤取得滤液，再在溶液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是_；图所示实验步骤中加蒸馏水的目的是_。(3)鉴定DNA的方法是，向溶有DNA丝状物的试管中加入_试剂，混合均匀后，将试管置于沸水中加热5 min，冷却后可观察到溶液呈_；也可取少许DNA丝状物置于载玻片上，滴一滴_溶液，片刻后用水冲洗，可见丝状物被染成_ _。解析在该实验中两次加蒸馏水有不同作用：第一次是使血细胞吸水破裂，释放细胞内物质，第二次是稀释NaCl溶液，使DNA溶解度降低而析出。鉴定DNA有两种方法：二苯胺加热法与甲基绿
15、染色，现象分别为蓝色和绿色。答案(1)ABD(2)使血细胞破裂使滤液中DNA溶于浓NaCl溶液降低盐溶液浓度，使DNA析出(3)二苯胺蓝色甲基绿绿色19下图为“DNA粗提取和鉴定”实验的相关操作。(1)图中实验材料A可以是_等，研磨前加入的B应是_。(2)通过上述所示步骤得到滤液C后，再向滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是_，再过滤得到滤液D，向滤液D中加入蒸馏水的目的是_。(3)在“DNA的粗提取和鉴定”实验中，将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2 mL的四种溶液中，经搅拌后过滤，获得4种滤液，含DNA最少的是滤液_。1B液中搅拌研磨后过滤滤液E22 mol/L的NaCl
16、溶液中搅拌后过滤滤液F30.014 mol/L的NaCl溶液中搅拌后过滤滤液G4冷却的95%的酒精溶液中搅拌后过滤滤液H解析(1)DNA的释放：DNA存在于鸡血细胞的细胞核中，正常情况下不会释放出来。为了使DNA从细胞核中释放出来，实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。蒸馏水对于鸡血细胞来说，是一种低渗溶液，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞破裂。再加上搅拌的机械作用，加速了鸡血细胞的破裂，于是释放出DNA。但是释放出来的大量DNA往往与蛋白质结合在一起。(2)将DNA与蛋白质分离：根据二者的特性，即在浓度较高的NaCl溶液中，核蛋白容易解聚，游离出DNA。而DNA在浓度较高的NaCl溶液中的溶解度很高，Na与带负电的DNA结合成DNA钠盐。(3)DNA的析出与获取：利用DNA在浓度较低的NaCl溶液中溶解度小的原理，向含有DNA的浓度较高的NaCl溶液中加入大量蒸馏水，稀释NaCl溶液，使DNA的溶解度下降，而蛋白质的溶解度增高，从而使二者分离。这时，加上不停地搅拌，溶解度下降的DNA逐渐呈丝状物。再通过过滤，滤去蛋白质，从而获得DNA的黏稠物。答案(1)洋葱(菜花等)洗涤剂和食盐(2)使DNA溶解(于NaCl溶液中)使DNA(的溶解度下降而沉淀)析出(3)H
