1、 (时间：40分钟满分：100分)1.(2016皖南八校三模)生物技术在日常生活中应用非常广泛，回答下列与生物技术有关的问题：(1)泡菜不能急着吃，是因为泡菜制作过程中会产生亚硝酸盐，实验室常采用_法来检测泡菜中亚硝酸盐的含量，亚硝酸盐在适宜条件下可以和相关试剂反应生成_色物质。 (2)各地制作腐乳的原料和菌种相同，但风味迥异，主要是通过控制_来实现的。 (3)制作果醋和葡萄酒使用的微生物在结构上不同主要是前者_。(4)从生物体内提取的天然物质丰富了人们的生活，提取胡萝卜素、玫瑰精油、橘皮精油常用的方法依次是_。(5)葡萄籽油因含有胶原蛋白而具有抗氧化、延缓衰老的功效。要分离这种胶原蛋白常用_
2、技术，影响该技术效果的因素主要有蛋白质分子的_和形状等。解析(1)亚硝酸盐的含量常采用比色法来检测；亚硝酸盐在适宜条件下可以和相关试剂反应生成玫瑰红色物质。(2)各地制作腐乳的原料和菌种相同，但风味迥异，主要是通过控制发酵的条件来实现的。(3)参与果醋制作的微生物是醋酸菌，属于原核生物，而参与果酒制作的微生物是酵母菌，属于真核生物，原核生物和真核生物在结构上不同主要是前者无成形的细胞核或无核膜。(4)从生物体内提取的天然物质丰富了人们的生活，提取胡萝卜素、玫瑰精油、橘皮精油常用的方法依次是萃取法、水蒸气蒸馏法、压榨法。(5)要分离蛋白质常用电泳技术，影响该技术效果的因素主要有蛋白质分子的相对分
3、子质量、电荷数量和形状等。答案(1)比色玫瑰红(2)发酵的条件(3)无成形的细胞核或无核膜(4)萃取法、水蒸气蒸馏法、压榨法(5)电泳相对分子质量、电荷数量2.(2016陕西西北工业大学附中模拟)葡萄酒、葡萄汁是一类常用的饮料。在果汁发酵液中，红葡萄皮的色素也会进入发酵液中，且有酸碱指示剂的作用。请根据有关材料回答下列问题：(1)在葡萄酒的自然发酵过程中，为提高果酒的品质，可以直接在果汁中加入人工培养的纯净酵母菌。要筛选得到纯净的酵母菌种，通常使用的培养基按功能来分称为_，如在培养基中加入_可从细菌和酵母菌的混合液中分离酵母菌。(2)在微生物的实验室培养中常要进行消毒和灭菌的工作，常用的消毒方
4、法有：煮沸消毒法、_、紫外线消毒法、化学药剂消毒法。灭菌是指_。(3)为提高果汁的出汁率及使果汁变得澄清，在果汁生产中常用到_。为提高品质及节约成本，厂家已尝试使用固定化细胞技术。酵母细胞的固定多采用_。(4)请列出用干酵母和海藻酸钠制备固定化酵母细胞的步骤：酵母细胞的活化；_；配制海藻酸钠溶液；_；固定化酵母细胞。解析(1)要筛选得到纯净的酵母菌种，通常使用的培养基为选择培养基。细菌不能抵抗抗生素，如在培养基中加入青霉素可从细菌和酵母菌的混合液中分离酵母菌。(2)实验室常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒和化学药剂消毒，但消毒只能杀死物体表面的微生物，不能杀死芽孢和孢子；灭菌是
5、使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。(3)果胶酶能使果胶水解成半乳糖醛酸，使果汁变得澄清。酵母细胞的固定多采用包埋法。(4)用干酵母和海藻酸钠制备固定化酵母细胞的步骤为酵母细胞的活化、配制(物质的量浓度为0.05 mol/L的)CaCl2溶液、配制海藻酸钠溶液、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合和固定化酵母细胞。答案 (1)选择培养基青霉素(或抗生素)(2)巴氏消毒法使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子(3)果胶酶包埋法(4)配制(物质的量浓度为0.05 mol/L的)CaCl2溶液海藻酸钠溶液与酵母细胞混合3.(2016四川成都石室中学三诊)根据现代生物
6、技术的相关知识，回答下列问题：(1)我们在用苹果泥作原料探究果胶酶催化反应的最适条件和最适用量时，通过_来确定最适值的思想方法是不变的。此类实验的观测指标可以是_(两点)。(2)用葡萄制做的果酒酒味纯正，放置一段时间后，发现果酒带有明显的酸味，原因是_。果酒发酵结束后，为方便后续使用，可将菌液转移到甘油中，与之充分混匀后，放在_的冷冻箱中保存，此方法叫_。(3)榨取果汁的过程中，发现榨取的果汁非常浑浊。解决的方法是用果胶酶处理，果胶酶包括_等成份(三种)。(4)已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图所示。将样品装入透析袋中透析12 h。若分子
7、乙保留在袋内，则分子_也保留在袋内。若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子_移动速度最快。若将样品以2 000 r/min的速度离心10 min，分子戊存在于沉淀中，则分子_可能不存在于沉淀中。(5)提取胡萝卜素常用有机溶剂萃取的方法，萃取的效率主要取决于_，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。将提取的胡萝卜素粗品用_法进行鉴定，鉴定过程中需用_作为对照。答案(1)设置梯度果汁的澄清度、果汁的体积(2)密封不严，醋酸菌进行有氧呼吸，将果酒转变成果醋20甘油管藏(3)多聚半乳糖醛酸酶果胶分解酶果胶酯酶(4)丙和丁丙甲(5)萃取剂的性质和用量纸层析胡萝卜素标
8、准样品(标准样品也可)4.(2016四川凉山诊断)将醋酸菌突变体中与耐酸有关的ALDH基因导入优良醋酸菌中，选育出高发酵速率、耐酸的醋酸菌，用于果醋生产。请分析回答下列问题：(1)对含有ALDH基因的DNA与质粒用同种限制酶切割后，通过_酶连接形成重组质粒。为获得耐酸的醋酸菌，用_法接种于含高浓度醋酸的培养基进行筛选。将筛选纯化的菌种用_的方法长期保存。(2)下图表示温度和乙醇浓度对该醋酸菌产酸量的影响。醋酸菌能将乙醇转变为_，再将其转变为醋酸。研究不同酒精浓度下的最高产酸量时，最好把温度控制为_，如温度过高，醋酸菌代谢缓慢甚至死亡，原因是_。酒精发酵后通过出料口检测酒精浓度，将发酵液中酒精浓
9、度调节到_左右才接种醋酸菌，较高的酒精浓度会使产酸量下降，不适宜接种，原因是_。(3)为检测发酵过程中醋酸菌数量，将1 mL发酵液稀释100倍后，分别取0.1 mL稀释菌液均匀涂布在4个平板上经适当培养后，4个平板上的菌落数分别为24、139、140、141，据此可得出每毫升发酵液中的活菌数为_个/mL。解析(1)基因工程中用同种限制酶切割目的基因和质粒，用DNA连接酶进行连接，筛选醋酸菌的方法是将醋酸菌用平板划线法接种在高浓度醋酸的培养基中，筛选纯化后的菌种用甘油管藏法长期保存。(2)醋酸菌能将乙醇转变为乙醛，再将乙醛转变为乙酸。图1显示，产酸量最高的温度是35 ，温度过高，会影响酶的活性，
10、甚至使酶失活。图2显示，乙醇浓度为4%时，产酸量最高。(3)4个平板上的菌落数有3个相近，1个相差太大，把24去掉，剩下3个取平均数为140，活菌数14010100140 000个/mL。答案(1)DNA连接平板划线(稀释涂布平板)甘油管藏(2)乙醛35(3035)温度过高，影响酶的活性(使酶失活)4%(较)高浓度的酒精会抑制醋酸菌的生长和代谢(3)1.41055.土壤中含有能分解淀粉的细菌，某生物兴趣小组欲从土壤中分离此细菌并进行计数。请回答：(1)鉴定淀粉可用_染色。欲把能分解淀粉的细菌从土壤中分离出来，需使用以淀粉为唯一_源的选择培养基。配制好的培养基需用_法进行灭菌。(2)用稀释涂布平
11、板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目_(填“少”或“多”)，原因是_。答案(1)碘液碳高压蒸汽灭菌(2)少当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落6.回答以下关于微生物的培养和发酵的问题： (1)某中学生物兴趣小组在进行A细菌的培养过程中，发现了另一种B细菌，在B细菌周围A细菌的生长繁殖受到抑制，甲同学提出的观点是B细菌产生了不利于(抑制)A细菌生存的物质。请你在以下实验的基础上，继续完成验证甲同学所提观点的实验过程：_(用文字和箭头表示)。(2)培养微生物时，所用培养基常采用_法进行灭菌。接种微生物常用的方法中可用于微生物计数的是_。(3)如图所示为某同学绘制的酿制葡萄酒的简易
12、装置。装置甲的错误是_；装置乙的错误是_。(4)乳酸发酵和醋酸发酵所用的菌种分别为_，两者发酵条件的最大差异是_。(5)腐乳制作利用了毛霉等微生物产生的_酶。答案(1)去除中的B细菌保留培养基再接种A细菌培养一段时间观察A细菌的生长情况(意思对即可)(2)高压蒸汽灭菌稀释涂布平板法(3)未夹住发酵瓶的进气管发酵瓶中发酵液过多，淹没了排气管在瓶内的管口(4)乳酸菌和醋酸菌乳酸发酵的环境为无氧，而醋酸发酵的环境为有氧(5)蛋白酶和脂肪7.根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：(1)从土壤中分离纤维素分解菌时，所用的选择培养基中唯一的碳源是_。鉴别纤维素分解菌的培养基中需要加入的染料是_，该物质能够与纤维素反应生成红色复合物。(2)由果酒制作转为果醋制作时，需要调整的温度范围是_。在制作腐乳过程中，加盐和加酒都能够抑制_。(3)玫瑰精油是制作高级香水的主要成分，其适合用水蒸气蒸馏法提取，理由是玫瑰精油具有_的性质。当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中影响玫瑰精油提取量的主要因素有蒸馏时间和_。(4)凝胶色谱法是根据_分离蛋白质的有效方法。答案(1)纤维素刚果红(2)由1825 调整为3035 微生物的生长(3)易挥发、难溶于水、化学性质稳定蒸馏温度(4)相对分子质量的大小
