1、1.2基因工程的基本操作程序1.在已知某小片段基因碱基序列的情况下,获得该基因的最佳方法是()A.用mRNA为模板逆转录合成DNAB.以4种脱氧核苷酸为原料人工合成C.将供体DNA片段转入受体细胞中,再进一步筛选D.先建立基因文库,再从中筛选解析:目的基因的获取方法主要有三种:从基因文库中获取、PCR技术扩增、人工合成。对于比较小、核苷酸序列已知的目的基因,可以直接通过DNA合成仪用化学方法人工合成。答案:B2.PCR技术扩增DNA,需要的条件是()目的基因ATP四种脱氧核苷酸RNA聚合酶mRNA核糖体Taq酶引物A.B.C.D.解析:PCR技术扩增目的基因与DNA复制过程有区别。PCR技术所
2、用的酶是Taq酶;原料是四种脱氧核苷酸;需要目的基因作为模板;需要引物;不需要ATP。答案:D3.下列有关PCR技术的说法,不正确的是()A.PCR技术是在细胞内完成的B.PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术C.PCR技术的原理与DNA复制的原理相同D.PCR技术的前提是有一段已知目的基因的核苷酸序列解析:PCR技术是在生物体外进行DNA复制的技术,其原理与DNA复制的原理相同,但前提是必须要有一段已知目的基因的核苷酸序列和根据核苷酸序列合成的引物。答案:A4.不属于目的基因与载体结合过程的是()A.用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端B.用同种限制酶切割目的基因露出黏性末端C
3、.将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处D.将重组DNA导入受体细胞中进行扩增解析:将重组DNA导入受体细胞中进行扩增属于基因工程的第三个步骤:将目的基因导入受体细胞。答案:D5.(2014广东高考理综改编)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如下图所示,下列叙述正确的是()A.过程不需使用逆转录酶B.过程需使用解旋酶和PCR获取目的基因C.过程使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D.过程可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞解析:本题考查基因工程。由mRNA获得DNA的过程是逆转录,需要逆转录酶,A项错误。过程表示用PCR扩增目的基因,此过程不需要解旋酶,通过控制温
4、度达到解旋的目的,B项错误。过程感受态的大肠杆菌是使用CaCl2处理的,C项错误。鉴定目的基因是否导入受体细胞,可以采用DNA分子杂交技术,D项正确。答案:D6.基因工程中选用的细菌质粒往往带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因的主要作用是()A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性B.有利于对目的基因是否成功导入进行检测C.增加质粒分子的相对分子质量D.便于与外源基因连接解析:基因工程中的质粒起载体作用,载体应有抗性基因,以用于重组载体即含目的基因的载体是否进入受体细胞的检测。答案:B7.将目的基因导入玉米茎尖分生区细胞和小鼠受精卵,常采用的方法分别是()A.显微注射法、农杆菌转化法B.基因枪法、花
5、粉管通道法C.农杆菌转化法、显微注射法D.基因枪法、显微注射法解析:玉米是单子叶植物,对单子叶植物来说,常用的方法是基因枪法;对于动物细胞来说,常用的方法是显微注射法。答案:D8.利用农杆菌转化法将目的基因转入受体细胞后,目的基因插入的位置是()A.Ti质粒上B.受体细胞染色体DNA上C.TDNA上D.农杆菌的拟核解析:农杆菌转化法是将目的基因插入Ti质粒的TDNA上,转入农杆菌后导入受体细胞,使目的基因插入受体细胞染色体DNA上。答案:B9.在基因工程技术中,需要用Ca2+处理的环节是()A.目的基因的提取和导入B.目的基因与运载体结合C.将目的基因导入受体细胞D.目的基因的检测与鉴定解析:
6、如果运载体是质粒,受体细胞是细菌,一般是将细菌用Ca2+处理,以增大细菌细胞壁的通透性,使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。答案:C10.下图是将人的生长激素基因导入细菌B内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B内不含质粒A,也不含质粒A上的基因,质粒导入细菌B后,其上的基因能得到表达。判断下列说法正确的是()A.将重组质粒导入细菌B常用显微注射技术B.将细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上,能够生长的就是导入了质粒A和重组质粒的细菌C.能在含有四环素的培养基上生长的只是导入了质粒A的基因D.目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长解析:显微注射技术是将目的基因导入动物细胞
7、的方法。基因成功表达的标志是受体细胞通过转录、翻译合成相应的蛋白质,即人的生长激素。答案:B11.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是()A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C.将重组DNA分子导入烟草原生质体D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞解析:限制性核酸内切酶用于提取目的基因和切割载体,烟草花叶病毒的遗传物质是RNA,不能用限制性核酸内切酶切割,A项错误;DNA连接酶可以连接具有相同黏性末端的目的基因和载体,B项正确;受体细胞可以是受精卵和体细胞,也可以是去除细胞壁的原生质体,C项正确;目的基因为抗
8、除草剂基因,所以未成功导入目的基因的细胞不具有抗除草剂的能力,筛选时应该用含除草剂的培养基筛选转基因细胞,D项正确。答案:A12.下列关于目的基因检测与鉴定的叙述,错误的是()A.可以根据受体细胞是否具有某种抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因B.受体细胞必须表现出目的基因控制的特定性状,才能说明目的基因完成了表达过程C.目的基因检测的第一步是检测目的基因是否转录出了mRNAD.用抗原抗体杂交检验目的基因是否成功表达时,一般需要进行对照实验解析:目的基因检测的第一步是检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因。用抗原抗体杂交检验目的基因是否成功表达时,以目的基因的表达产物为抗原,一般需要进行对
9、照实验,即将来自普通生物和转基因生物的蛋白质用抗体进行对比检测。答案:C13.水稻种子中70%的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外,是多种动物的抗营养因子;同时,排出的大量磷进入水体易引起水华。为从根本上解决水稻中的高植酸问题,可将植酸酶基因导入水稻,培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。请根据上图回答下面的问题。(1)图中基因组文库(填“小于”“等于”或“大于”)cDNA文库。(2)B过程需要的酶是;A、C过程中(填“可以”或“不可以”)使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。(3)目的基因和除从构建的文库中分离外,还可以分别利用图中和为模板直接进行P
10、CR扩增,该过程中所用酶的显著特点是。解析:(2)由于mRNA是以DNA一条链为模板转录出来的,所以A、C可以使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。答案:(1)大于(2)反转录酶可以(3)DNAcDNA耐高温14.下图表示基因工程的主要操作步骤,请据图回答问题。(1)过程是,需要酶参与。过程是,需要酶参与。(2)过程中使用Ca2+处理受体细胞可以增大,使重组质粒进入受体细胞。(3)重组DNA分子进入受体细胞后,受体细胞必须,才能说明目的基因完成了表达过程。(4)从物质基础来看,不同生物之间能够进行转基因,原因是;从结构基础来看原因是。解析:分析图示可知:过程是提取目的基因,该过程需要的酶是限制酶;过程是构建基因表达载体的过程,该过程需要用到DNA连接酶。若受体细胞是微生物细胞,将重组质粒导入时,首先应用Ca2+处理受体细胞,可以增大细胞壁的通透性,使重组质粒易于进入受体细胞。目的基因完成表达的标志是受体细胞内合成了相应的蛋白质。不同生物之间能够进行转基因,从物质基础来看是因为不同生物的基因都是由四种脱氧核苷酸组成的;从结构基础来看是因为都具有双螺旋结构,连接两条链的碱基有互补配对的能力。答案:(1)提取目的基因限制性核酸内切构建基因表达载体DNA连接(2)细胞壁的通透性(3)表达出目的基因产物(4)都是由四种脱氧核苷酸组成的都具有双螺旋结构,连接两条链的碱基有互补配对的能力