1、专题3、5植物的组织培养技术、DNA和蛋白质技术一、选择题1蛋白质的提取和分离分为哪几步？()A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定2用于清洁油脂的洗涤剂可用于破碎细胞，对此现象解释正确的是()A.洗涤剂进入细胞后对细胞有毒害作用，从而使细胞死亡裂解B.细胞膜的骨架是脂质，会被洗涤剂破坏而导致细胞破碎C.洗涤剂会将细胞内的脂质给清除，导致细胞膜不能正常形成D.洗涤剂会导致细胞膜上的蛋白质分解3下列有关生物技术实践的叙述正确的是()A.生产腐乳所用的毛霉能够耐受高盐环境B.加酶洗
2、衣粉在各种洗涤条件下都有较好的洗涤效果C.进行DNA鉴定时，将析出的DNA溶解在二苯胺试剂中，水浴加热后溶液呈现蓝色D.电泳法可用于蛋白质、DNA、RNA等生物大分子的分离4以下对DNA和血红蛋白的提取与分离(鉴定)实验的分析正确的是()A.都要用猪血细胞来进行实验B.在DNA的粗提取与鉴定实验中，有两次DNA析出，所用的方法相同C.在实验中都要进行除杂处理以便得到较纯净的DNA或血红蛋白D.将析出的DNA溶解在2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺后呈现蓝色5下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是()A.透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性B.采用透析法使蛋白质与其他
3、小分子化合物分离开来C.离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离D.蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动6下列有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中，正确的是()A.用蒸馏水进行红细胞的洗涤，其目的是去除细胞表面杂蛋白B.将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较大的杂质C.血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂D.整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构7用高度分化的植物细胞、组织或器官进行组织培养可以形成愈伤组织，下列叙述错误的是()A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的B.该愈伤组织的细胞没有全能性C.该愈
4、伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成的D.该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构8在植物组织培养过程中，生长素和细胞分裂素的使用会影响实验结果。下列说法正确的是()A.两种激素用量的比例影响实验结果B.两种激素使用的先后顺序影响实验结果C.两种激素使用时的浓度影响实验结果D.以上说法全部正确9下面关于植物组织培养的叙述，正确的是()A.已经高度分化的叶肉细胞即使离体，也没有全能性B.叶肉细胞再分化后可形成无定形状态的薄壁细胞C.克隆羊多利的培育成功也是组织培养的结果 D.用于植物组织培养的人工培养基常常需要添加植物激素10蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述不正确的是(
5、)A根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离B根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质C根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质D根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质11(双选)下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的有()A提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞B用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质C蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNAD蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化12(双选)关于PCR技术的应用，正确的一项是()A古生物学、刑侦破案、DNA
6、序列测定B诊断遗传疾病、基因克隆、古生物学C组织培养、基因克隆、刑侦破案D诊断遗传疾病、合成核苷酸、DNA序列测定 二、非选择题13试回答下列“蛋白质提取与分离实验”和“叶绿体中色素提取和分离实验”的有关问题。(1)为了提取和分离血红蛋白，首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白，洗涤时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是_。(2)若要去除血清蛋白中的小分子杂质，采用图1装置进行透析，一段时间后，若向烧杯中加入双缩脲试剂，透析袋内溶液是否出现紫色？_，判断的依据：_。(3)叶绿体色素分离时采用的方法是_ 。(4)图2、图3分别表示分离蛋白质和分离叶绿体中色素的结果。不同蛋白质得以分离是因为_；不同色
7、素得以分离是因为_；条带c表示_色素；条带d呈_。14多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。(1)DNA的两条链是反向平行的，通常将_的末端称为5端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的_端开始延伸DNA链。(2)PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代，科学家从一种Taq细菌中分离到 _，它的发现和应用解决了上述问题；要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来，所用的培养基叫_。(3)PCR的每次循环可以分为_三步。假设在P
8、CR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在5次循环后，反应物中大约有_个这样的DNA片段。(4)请用简图表示出一个DNA片段PCR反应中第二轮的产物。(5)简述PCR技术的主要应用：_(至少填3项)。专题3、5植物的组织培养技术、DNA和蛋白质技术1.C解析：蛋白质的提取和分离分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步。A中凝胶色谱操作及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳为实验操作过程中的技术。2B解析：洗涤剂溶解细胞膜使细胞变成全透性。3D解析：高盐抑制毛霉的生长；加酶洗衣粉受环境条件的影响较大；DNA溶解在低盐溶液中，与二苯胺加热显蓝色。4C解析：猪血中成熟的红细胞无核，无DNA，只能用来提取血
9、红蛋白。DNA第一次是在盐水中析出，第二次是在酒精溶液中析出，最后鉴定DNA要溶解在2 mol/L的NaCl溶液中且需沸水浴加热。5D解析：蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动。6D解析：用生理盐水进行红细胞的洗涤；透析是去除小分子蛋白质；血红蛋白释放时加入甲苯的目的是溶解细胞膜。7B解析：愈伤组织经过再分化形成具有生根发芽能力的胚状结构，最后可培养成完整的植物体，这反映了愈伤组织的细胞具有全能性。8D解析：生长素与细胞分裂素用量比值高时，有利于根的分化，抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化，抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长。先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于
10、细胞分裂，但细胞不分化；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化；同时使用两种激素，分化频率提高。9D解析：植物细胞具有全能性，在无毒无菌条件下人工离体培养进行脱分化和再分化可得到完整个体，即表现全能性；叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞，即愈伤组织。10A解析：蛋白质分离主要根据五种原理：分子大小、溶解度、电荷、吸附性质、对配体分子的生物学亲和力等。透析是利用蛋白质分子不能通过半透膜的性质，使蛋白质和其他小分子物质分开。11BD解析：在提取DNA时，如果是用动物的细胞需要用蒸馏水涨破，如果用植物细胞则是用洗涤剂溶解细胞膜；用2 mol/L的NaCl溶液溶解DNA，然后过滤出蛋
11、白质，再降低NaCl溶液的浓度，析出DNA；透析用以除去小分子物质，DNA是大分子物质；DNA和蛋白质样品都是带负电荷的，从负极向正极移动，移动的距离都和样品的分子量有关。12AB解析：组织培养过程中，不需要PCR技术；PCR技术可实现DNA分子的克隆(扩增)，但不能用于合成核苷酸。13(1)防止红细胞吸水破裂(2)会双缩脲试剂可以透过半透膜，与袋内血红蛋白反应，生成紫色物质(3)纸层析法(4)不同蛋白质所带电荷性质、分子大小和形状不同，导致电泳时迁移速度不同 不同色素在层析液中溶解度不同，导致层析时扩散速度不同 叶绿素b 橙黄色14(1)磷酸基团3(2)耐高温的Taq DNA聚合酶 选择培养基(3)变性、复性和延伸32(4)见下图(5)遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定