1、2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体【自主学习】1、简要说明植物体细胞杂交的过程2、植物原生质体融合的原理是 3、植物体细胞杂交的意义是 【课前预习】一、动物细胞融合1、概念： 或 动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。2、结果：形成 3、动物细胞融合原理：细胞膜的 4、诱导动物细胞融合的方法物理方法： 化学方法： 生物方法： 5、过程：两个或多个细胞在灭活的病毒或PEG的作用下 6、意义：克服了 的不亲和性，成为研究 、 、肿瘤和 培育的重要手段。二、单克隆抗体1、抗体(1)产生细胞： (2)特点：从 中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差(3)成分： 2、单克隆抗体的制备(1)过程
2、给小鼠注射特定的抗原蛋白质，进行免疫从 中分离出能产生抗体的效应B细胞将效应B细胞与培养的 细胞诱导融合，可能形成三种类型的融合细胞： 细胞、 细胞、 细胞进行选择性培养得到 瘤细胞克隆化培养，专一抗体检测阳性，得到足够数量的能分泌所需要抗体的细胞 培养，或者体外培养得到单克隆抗体(2)杂交瘤细胞的特点： 、 (3)单克隆抗体的优点： 、 、 3、单克隆抗体的应用1、作为诊断试剂，具有 、 、 的优点2、用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗 、可制成 【合作探究】【探究一】：动物细胞的融合1、植物体细胞杂交和动物细胞融合的异同项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合的方法用 去除细胞壁后诱导
3、原生质体融合用 使细胞分散后诱导细胞融合诱导手段除应用植物细胞杂交手段外，还有用 结果应用培育植物新品种主要 意义相同点原生质体融合原理相同，原生质体融合的方法相似2、为什么灭活的病毒能作为诱导剂？不灭活的病毒能作为诱导剂吗？3、动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？【探究二】：单克隆抗体制备的原理1、 体液免疫中的抗体由何种细胞产生？传统的抗体生产方法及缺点是什么？2、 一种抗原侵入机体后，引起机体免疫反应产生的抗体只有一种吗？一种B淋巴细胞能产生几种抗体？3、 在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖？若要想获得大量的单一抗体，如何做呢？4、 什么细胞是可以无限增殖的？有什么办法
4、让B淋巴细胞也具有这样的能力？5、 杂交瘤细胞有什么特点？小结：我们可以利用 产生特异性抗体的功能，利用 无限增值的特性，利用 技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞，利用 技术大量培养杂交瘤细胞。【探究三】：单克隆抗体制备的过程1、 如果把B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起时，会有几种融合方式（类型）？符合生产要求的是哪种类型？2、 整个制备过程要经过两次筛选的目的各是什么？3、 单克隆抗体制备的过程中用到了哪两种技术？4、 单克隆抗体由什么优点？【课后练习】1与植物体细胞杂交相比，动物细胞融合的原理及其特有的诱导因子分别是()A细胞膜的流动性、离心B细胞膜的流动性、灭活的病毒C细胞的全能性、电刺激D
5、细胞的全能性、灭活的病毒2单克隆抗体与血清抗体相比，其优越之处在于()A单克隆抗体可作为某些药物的载体B单克隆抗体可以在体外制备C单克隆抗体特异性强、灵敏度高，并可大量制备D单克隆抗体的制备过程简单，操作方便3要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖，形成细胞群。其原因是()A在体外培养条件下B淋巴细胞可以无限增殖B在动物体内，每个B淋巴细胞可产生多种抗体C每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应D每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体但不能大量增殖4“生物导弹”是指()A单克隆抗体 B杂交瘤细胞C产生特定抗体的B淋巴细胞 D在单克隆抗体上连接抗癌药物5下列对植物体细胞杂交和动物
6、细胞融合的比较，描述正确的是()A动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法也完全相同B两者都可以跨越种属间的生殖隔离，突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能C利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为试管婴儿的诞生开辟了新途径D目前科学家终于实现了两个植物物种间的体细胞杂交，得到了同时具有两个物种遗传物质的超级植物，并使它们的性状全部得以体现6关于动物细胞融合的说法，不正确的是()A动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程B动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞C常用的诱导动物细胞融合的因素有：聚乙
7、二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射等D细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能7科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的细胞是()A经过特定抗原免疫的B淋巴细胞B不经过免疫的B淋巴细胞C经过特定抗原免疫的T淋巴细胞D不经过免疫的T淋巴细胞8关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是()A可以制成诊断盒，用于疾病的诊断B可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C可以利用细胞工程技术生产D可以在生物体内生产，不能在体外生产9太空动物细胞融合实验依据的原理和促进细胞融合的方法分别是()A细胞的全能性；灭活病毒诱导融合B细胞的全能性；
8、电刺激融合C细胞膜的流动性；灭活病毒诱导融合D细胞膜的流动性；电刺激融合10将基因型为Aa和基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞()AAAaa BAaBbCAabb DBBbb11关于现代生物技术应用的叙述，错误的是()A蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒D动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育12下列是应用动物细胞工程获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤，其中对单克隆抗体制备的相关叙述错误的是()从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗
9、X抗体的B淋巴细胞 将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞从小鼠腹水中提取抗体利用促细胞融合因子促使细胞融合A实验顺序应该是B过程产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆C过程获得的细胞均可无限增殖D利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选13利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是()A用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D利用
10、该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者14对于下面制备单克隆抗体过程的示意图，不正确的叙述是()A表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的B中的筛选是通过抗原、抗体反应进行的C促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介导D可以无限增殖15下图是科学家新研发的制备单克隆抗体的过程，相关叙述错误的是()A该过程涉及基因工程和动物细胞融合技术B经酶A处理后的与质粒具有相同的黏性末端C若供体DNA提供了prG基因(无限增殖调控基因)，则该过程中的是已免疫的B淋巴细胞D通过检测和筛选得到的细胞既能无限增殖又能分泌特异性抗体16单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴
11、细胞融合后，要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是()B淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞ABC D17植物体细胞杂交制备原生质体和动物细胞培养配制一定浓度的细胞悬浮液，所需要的酶依次是()A淀粉酶和磷脂酶B纤维素酶和胰蛋白酶C脂肪酶和二肽酶D过氧化氢酶和半乳糖苷酶18单克隆抗体制备过程中所用的骨髓瘤细胞是一种基因缺陷型细胞，其合成核酸的途径能被氨基喋呤阻断。现将从预先注射了某种抗原的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞与上述骨髓瘤细胞混合，加入PEG促融后，再加入含氨基喋呤的培养液。若将这些混合物分装于细胞培养板的小孔中培养(
12、如图所示)，则小孔中的培养物不可能出现的结果是()A细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阴性B细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阳性C没有活细胞，产生抗体D没有活细胞，不产生抗体19有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下图所示为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：(1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出
13、基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是(2)若a、b表示两种植物体细胞，则由d细胞形成杂种植株的原理是_，这种育种方法的优点是_ (3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞的特点是 由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有_的特点。生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是_。20人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答问题：(1)制备单克隆抗体过程中要用到_ _和_ _技术。(2)制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相
14、当于_ _，使小鼠产生分泌相应_ _的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的_ _免疫。(3)在细胞内DNA的合成一般有两条途径，主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径；另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化作用合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的_ _成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_(4)此过程生产的单克隆抗体可以与_ _特异性结合，从而诊断早孕。21自然界中有一种含有叶绿体的原生动物眼虫，这说明植物的细胞器同样可以
15、在某些动物细胞中存活。某同学提出问题：“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗？”他尝试设计出如图所示的实验方案。结合实验方案回答问题：实验原理：根据眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。实验步骤如下：(1)中选的植物材料细胞中，必须有的细胞器是_ (2)过程所用的酶是_(3)过程除了用电激之外，还可以用_等作为诱导因素。(答出两种)(4)过程中动物细胞体外培养需要满足的条件是_、_、_。(5)在整个实验过程中，要强调所用的器械的灭菌和无菌操作，原因是各种杂菌可以在培养基上面迅速生长，培养基一旦被污染，迅速生长的各种杂菌不但会和_争夺营养，而且这些杂菌生长的过程中会生成大量
16、_导致培养物迅速死亡。(6)在、过程中，通常要添加血清，原因是_。22下图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请据图回答下列问题：(1)请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。(2)在单克隆抗体制备过程中选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有_、_的特性。(3)由图中可以看出，在单克隆抗体制备过程中运用了_和_的动物细胞工程技术手段。23科学家对鼠源杂交瘤抗体进行改造，生产出效果更好的鼠人嵌合抗体，用于癌症治疗。如图表示形成鼠人嵌合抗体的过程。请据图回答：(1)生产单克隆抗体一般不直接培养B淋巴细胞，主要原因是_。(2)将_注入小鼠体内，从小鼠脾脏中
17、获得B淋巴细胞，其中至少1个B淋巴细胞能产生该抗原的抗体。(3)在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有_、_的特性。(4)单克隆抗体制备过程中运用了_和_的细胞工程技术手段。(5)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有_。(6)在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞分散开，以利于细胞融合，可用_处理离体组织细胞使之分散开。(7)鼠源杂交瘤抗体与普通血清抗体相比较，具有_的特点。(8)改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠人嵌合抗体，属于_(生物工程)的范畴，图示过程是根据预期的_，设计_，最终必须对_进行操作。