1、选修1课时13 多聚酶链式反应扩增DNA片段班级:_姓名:_设计人_日期_课后练习基础过关 1下列关于DNA复制的叙述中,正确的是A.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从5端延伸DNA链B.DNA复制不需要引物C.引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合D.DNA的合成方向总是从子链的3端向5端延伸2PCR的每次循环都可以分为三步,按循环的顺序排序是A.变性、延伸、复性B.变性、复性、延伸C.复性、变性、延伸D.延伸、变性、复性3下列有关PCR反应的叙述中,正确的是A.PCR反应所需要的引物只是RNAB.PCR反应所需要的原料是核糖核苷酸C.PCR反应所需要的酶在60 C会变性D.PCR
2、反应需要在一定的缓冲溶液中进行4标准的PCR技术过程一般分为变性、复性、延伸三大步, 这三大步需要的温度依次是A.92,50,72B.72,50,92C.50,92,72D.80,50,725PCR引物的长度通常为2030个核苷酸,是一小段A.DNA或RNAB.RNAC.DNAD.双链DNA6在PCR扩增的实验中,加入一种提取物(一种模板DNA片段),但实验得到的产物却有2种DNA。其原因可能是A.基因突变B.Tag DNA聚合酶发生变异C.基因污染D.温度过高7下列对PCR技术的叙述,错误的是A.PCR技术的原理是DNA复制B.是一种酶促反应,需耐高温的解旋酶和DNA聚合酶C.一个DN A片
3、段经PCR扩增,可以形成2n个DN A 片段(n代表循环次数)D.PCR利用了 DNA的热变性来控制DNA的解聚与结合8一个DNA分子经过4次复制以后,其中含有原DNA链的DNA分子有A.2个B.4个C.8个D.16个能力提升1近十年来,PCR(多聚酶链式反应)技术成为分子生物学实验室里的一种常规手段,其原理是利用DNA半保留复制, 在试管中进行DNA的人工复制(如图),在很短的时间内, 将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。(1)加热使DNA双链打开,这一步是打开_键,称为_。(2)当温度降低时,引物与模板_端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板
4、延伸,最终合成两个DNA分子,此过程中原料是_,遵循的原则是_。(3) PCR技术的必要条件,除了模板、原料、酶以外,至少还需要三个条件,即液体环境、适宜的_和_。(4) DNA的复制需要引物,其主要原因是_。A.可加快DNA的复制速度B.引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合C.引物的5端有助于DNA聚合酶延伸DNA链D.DNA聚合酶只能从3端延伸DNA链2Tag DNA聚合酶是由水栖高温菌分离而得,其生长适宜温度为7075。回答下面的问题。(1)用Taq DNA聚合酶代替一般的DNA聚合酶是使PCR普及应用的关键。因为普通的酶不能耐受94C时使双链DNA变性的温度。因此,每次循环都要_。T
5、aqDNA聚合酶的发现和应用解决了上述问题, 提高了PCR的效率,使PCR技术趋向_。(2) PCR反应扩增DNA片段时,_决定了扩增片段的长短。(3)若加入的模板是两个相同的DNA分子,如果只想要拷贝这两个长长的DNA分子中特定区间,在其他条件均理想时,经过30次循环,理论上能获得_个特定区间片段。选修1课时13 多聚酶链式反应扩增DNA片段详细答案【基础过关】1C【解析】本题主要考查了 DNA聚合酶的作用特点。DNA 聚合酶不能从头开始合成DNA,所以只能从引物的3端延伸DNA链。由于模板链首先复制的是3端,即复制方向3 5,而DNA分子是反向平行的,子链是依据碱基互补配对原则,在DNA聚
6、合酶作用下合成的,其合成方向从子链的53。2B【解析】PCR的每一轮反应可分为三个基本步骤变性、复性和延伸,变性即当温度上升到90 C以上时,双链DNA 解旋为单链;复性即温度下降到50 C左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合;延伸就是温度上升到72C左右,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。3D【解析】PCR反应需要的引物是DNA或RNA,反应所需要的原料是脱氧核苷酸,PCR所需要的酶是耐高温的,在60C不会变性。4A【解析】当温度上升到90 C(9096 C)以上时,双链DNA 解旋为单链,称之为变性;当温度下
7、降到50 C(4060 C)左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合;当温度上升到72 C(7075 C)时,溶液中的四种脱氧核苷酸在Tag DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA,称为延伸。5A【解析】用于PCR的引物是一小段DNA(单链)或RNA。细胞内DNA的引物一般为RNA。6C【解析】此现象属于PCR技术中的假阳性现象,是靶基因被污染造成的。因此,在PCR实验中,一定要做到隔离操作区、分装试剂、简化操作程序、使用一次性吸头等,尽量避免靶基因污染。7B8A【能力提升】1(1)氢 变性 (2) 3 四种脱氧核苷酸 碱基互补配对原则 (3)温度 酸碱度 (4)
8、D【解析】本题考查体内DNA复制与PCR技术的原理以及基本条件。正确解答该题的前提就是要熟练掌握上述内容。2(1)加入新酶 自动化 (2)两个引物 (3)2302-4【解析】普通DNA聚合酶在DNA变性温度条件下失活,因此,必须循环一次更换一次新酶才能保证DNA复制顺利进行,而TqDNA聚合酶在94的DNA变性条件下不会失活,故可以反复利用,解决了 PCR反应连续扩增DNA片段的关键问题。DNA聚合酶只能从两引物的3端开始连接脱氧核苷酸,是DNA片段延伸.的起始位点, 两引物的5端决定了扩增产物的两个5端位置,决定了DNA片段终点。每个DNA分子中特定区间经过30次PCR反应后理论上可获得230个特定区间,其中两个位于DNA分子的两条链上,不是特定区间片段。故两个DNA分子经30次PCR循环后获得的特定区间 片段理论上有2302-4 (个)。