1、加试特训8生物技术实践相关综合应用(B)1苹果醋是指以苹果汁经发酵而成的原醋，再兑以苹果汁等原料而制成的饮品。既有淡淡的醋味，又有果汁的香甜，喝起来非常爽口，是目前大众非常喜爱的饮品。下图是苹果醋的制作简图，请回答：鲜苹果汁高纯度苹果酒苹果原醋另外加入苹果汁等原料苹果醋(1)在苹果汁的生产中，为了提高出汁率而要添加的酶是_。为了便于工业化使用，常对酶采用_技术，如吸附法、包埋法等。(2)采用_方法可以最大限度地保存苹果汁的色香味和营养价值。A15 min高压蒸汽灭菌 B高锰酸钾消毒C70%酒精消毒 D低温消毒(3)过程中用到的微生物是_，若培养液中乙醇浓度超过_往往使其死亡。(4)苹果醋的原料
2、是苹果酒和蒸馏水的混合物，两者的比例一般为_。A12 B14C21 D41(5)过程用到的微生物是_。该过程发酵阶段，要向装置中通入_。2有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境，研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解，分离能降解苯磺隆菌株的实验过程如下图所示。请回答问题：(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、_、_四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_。(2)纯化菌株时，通常使用的划线工具是_。在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_。(3)若要检测土样中的细菌含量，应采用_法。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基
3、先行培养了一段时间，这样做的目的是_。然后，将1 mL土壤溶液稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升土壤溶液中的活菌数为_个。3微生物与我们生活健康有着密切的联系。请回答下列问题：(1)实验室常用的灭菌方法为_，如果实验器材不能遇水，则用_。(2)微生物的分离提纯方法主要有_和_法。(3)培养微生物的培养基根据用途不同，物理性质有所差异。扩大培养一般用_培养基，分离菌种用_培养基。它们在物理性质上的不同主要是_。(4)某些微生物能利用尿素是因为它们能合成和分泌_。其分解尿素的方程式为：_。4某研究小组研究了不
4、同浓度的土霉素(一种抗生素)对大肠杆菌生长的影响，实验结果见图1。(1)实验结果表明，对大肠杆菌抑制作用最明显的是浓度为_(图1中数字)的土霉素。(2)该实验中，接种大肠杆菌时所使用的接种方法是_，在培养和接种大肠杆菌时要特别注意进行_操作。为更好地体现土霉素对大肠杆菌的抑制作用，实验中还应增加一组_作为空白对照。为了严格控制土霉素的剂量，对圆纸片的要求是_。为减少实验误差，每一浓度的土霉素还要制备_。(3)长期大量使用土霉素容易引起大肠杆菌产生抗药性，这一过程的实质是大肠杆菌种群的_发生了变化。(4)该研究小组运用上述实验方法研究了相同浓度的A、B、C三种不同抗生素对大肠杆菌生长的影响。请在
5、图2中表示这一处理方案(可模仿图1加以必要的注解)。5为获取土壤中的芽孢杆菌，某同学进行了相关实验，操作流程如下：(1)上图中步骤A为_，步骤B为_。要判断培养基灭菌是否彻底，可采用的方法是_。(2)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑_、_和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、_等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(3)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。(4)微生物与人类的生活、健康有着密切的联系。请回答下列有关微生物的问题。在果醋、泡菜的制作过程中，需要氧气的是_的制作。在制作果醋
6、过程中，榨取的果汁非常浑浊，解决的方法是_。根据微生物的特点，可以利用相应的培养基进行分离或培养，例如用_的培养基培养苹果青霉，以提高果胶酶的产量。6烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。(1)获取绿脓杆菌单菌落：配制适于绿脓杆菌生长的培养基、培养基中的营养成分一般含有_、_、水和无机盐，调节pH至7，灭菌处理，待培养基冷却至50 时，在_附近倒平板。经过选择培养、鉴别等步骤
7、获得单菌落。(2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：取该单菌适当稀释，用_法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的同样大小的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件下培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗生素_；含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，这说明_；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，请推测此菌落产生的可能原因：一是_，二是_。(3)根据上述实验结果，为达到抗绿脓杆菌的目的，对于该患者来说最好应选用抗
8、生素_。7青蒿素是从黄花蒿茎叶中提取的抗疟疾药物。通过组织培养获得青蒿素的途径如图所示。请据图回答：(1)图中和分别表示黄花蒿组织培养过程中细胞的_和_过程。(2)配制生芽培养基时生长素比细胞分裂素的比值应较_(填“高”或“低”)，配制培养基时通常加入凝固剂_。配制后还须用_法对培养基进行灭菌。外植体在接种前通常可用体积分数为_的酒精进行消毒。(3)为了得到高产细胞系，通常要用酶解法获得原生质体，用_酶和_酶在0.50.6 molL1的_溶液环境(较高渗透压)下去壁。(4)科研人员利用转基因技术用细菌作为工程菌获得青蒿素的前体青蒿酸。先将目的基因与含有抗青霉素基因的质粒形成_，再与细菌菌液混合
9、导入目的基因。用玻璃刮刀将稀释后的菌液用_法接种到含_的固体培养基上，经培养形成_，再进一步筛选和培养。若最终能从细菌中提取到_，则说明转基因成功。8(2016绍兴高三检测)下图是利用白菜、萝卜、黄瓜、胡萝卜等腌制泡菜的流程示意图。请据图回答：(1)已腌制过的泡菜汁含丰富的_，添加泡菜汁相当于接种了已经扩增的菌种，可达到_的目的。(2)添加的盐水需要煮沸并冷却才可使用，原因是_。(3)下列对泡菜腌制的叙述，错误的是_。A装罐前需用热水洗涤泡菜罐B白酒的主要作用是杀菌和调味C腌制过程需要定期开罐通气D发酵产物包括有机酸和醇类物质等(4)泡菜这类食物中含有一定量的_，对人体具有致癌作用。该物质与对
10、氨基苯磺酸发生重氮化反应形成_色产物，可用_检测其含量。(5)为研究泡菜腌制过程中起作用的微生物种类及比例，需要进行分离培养。下列叙述错误的是_。A配制培养基时，需添加适量的凝固剂B接种方法可选择划线分离法或涂布分离法C需设置未经接种的空白对照D培养需在无氧条件下进行答案精析1(1)果胶酶和果胶甲酯酶固定化(2)D(3)酵母菌16%(4)B(5)醋化醋杆菌无菌空气解析(1)为了提高果汁出汁率需要添加的酶是果胶酶和果胶甲酯酶；固定化酶技术可大大提高酶的利用率。(2)低温消毒可以最大限度地保存苹果汁的色香味和营养价值。(3)制作果酒需要用到酵母菌，若培养液中乙醇浓度超过16%往往使其死亡。(4)苹
11、果醋的原料是苹果酒和蒸馏水的混合物，两者的比例一般为14。(5)果醋发酵需要用到醋化醋杆菌，醋化醋杆菌为好氧细菌，发酵阶段需要通入无菌空气。2(1)氮源无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖(2)接种环将聚集的菌体逐步减少以便获得单个菌落(3)涂布分离检测培养基平板灭菌是否合格3.81073(1)高压蒸汽灭菌干热灭菌(2)划线分离法涂布分离(3)液体固体是否含有琼脂(4)脲酶(NH2)2COH2O2NH3CO2解析(1)实验室常用的灭菌方法为高压蒸汽灭菌法。实验器材若不能遇水，则可以用干热灭菌法。(2)微生物的分离提纯方法主要有划线分离法和涂布分离法，划线分离法操作简单，涂布分离法操作
12、复杂但更易将单菌落分开。(3)扩大培养微生物一般用液体培养基；分离菌种用固体培养基，两种培养基的差别在于后者含有琼脂。(4)能利用尿素的微生物含有脲酶，此酶能分解尿素产生氨。4(1)(2)涂布分离法无菌用无菌水浸泡的圆纸片大小、质地相同多个圆纸片(3)抗药性基因频率(4)如图所示5(1)制平板培养将灭菌后的培养基培养一段时间后观察是否出现菌落(2)温度酸碱度(pH)生活周期短(或繁殖快)(3)灭菌(4)果醋果胶酶处理富含果胶解析(1)配制的LB固体培养基经高压蒸汽灭菌后需要制作成平板，接种后进行培养；要判断培养基是否灭菌彻底，直接将灭菌后的培养基培养一段时间后观察是否出现菌落即可。(2)培养微
13、生物需要考虑温度、酸碱度、渗透压等问题；大肠杆菌体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、繁殖快，因此常作为遗传学研究的实验材料。(3)使用过的微生物培养基及其培养物必须经灭菌处理，以防污染环境。(4)果醋的制作需要醋化醋杆菌，为好氧菌；使果汁澄清需要用果胶酶处理；用富含果胶的培养基培养苹果青霉，可以提高果胶酶的产量。6(1)碳源氮源酒精灯火焰(2)涂布分离敏感绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比对美罗培南弱杂菌污染抗比阿培南的绿脓杆菌(或绿脓杆菌产生耐药性突变)形成的菌落(3)美罗培南解析(1)培养基的营养包括碳源、氮源、水和无机盐，有的还需加入一些生长因子。微生物培养时倒平板和接种都应在酒精灯火焰旁操作。(2)对微生物选择培养过程中，首先将微生物通过涂布分离法接种到培养基表面。加入抗生素后，若微生物对该抗生素敏感，则该抗生素的周围会出现透明圈，可根据透明圈的大小判断微生物对该抗生素的敏感程度。(3)由题得绿脓杆菌对美罗培南的敏感性最强，所以应选用抗生素美罗培南。7(1)脱分化再分化(2)低琼脂高压蒸汽灭菌70%(3)果胶纤维素甘露醇(4)重组质粒涂布青霉素单菌落青蒿酸8(1)假丝酵母和乳酸菌缩短泡菜腌制时间(2)加热煮沸是为了杀灭杂菌，冷却后使用是为了保证假丝酵母、乳酸菌等微生物的生命活动不受影响(3)C(4)亚硝酸盐紫红光电比色法(5)B