1、第32讲细胞工程考纲考情知考向核心素养提考能最新考纲1.植物的组织培养（B）2.动物细胞培养与体细胞克隆（A）3.细胞融合与单克隆抗体（B）科学思维建立动物细胞培养与单克隆抗体的制备基本流程模型科学探究探究动物细胞工程的应用近三年江苏考情2017年T11（2分）、T27（3分）；2016年T3（2分）、T9（2分）、T28（4分）；2015年T3（2分）、T20（2分）社会责任克隆动物及其对人类社会的可能影响考点一植物细胞工程1.细胞工程的概念2.植物细胞的全能性3.植物组织培养技术（1）原理：植物细胞具有全能性。（2）过程：（3）关键点条件：离体，一定营养物质，激素（生长素、细胞分裂素）等。
2、培养基状态：固体培养基（需再分化生根培养基及生芽培养基）体内细胞未表现全能性的原因：基因的表达具有选择性。光照的应用脱分化阶段不需要给予光照，再分化阶段需要给予光照，以利于叶绿素的形成。（4）植物激素在植物组织培养中的作用生长素/细胞分裂素的比值作用效果比值高时促进根分化、抑制芽形成比值低时促进芽分化、抑制根形成比值适中促进愈伤组织形成4.植物体细胞杂交技术（1）概念：将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。（2）原理：体细胞杂交利用了细胞膜的流动性，杂种细胞培育成杂种植株利用了植物细胞的全能性。（3）过程（4）意义：克服不同种生物远缘杂交的不亲和
3、性。5.植物细胞工程的实际应用（1）植物繁殖的新途径微型繁殖：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。特点作物脱毒技术：选取作物无毒组织（如茎尖）进行组织培养，获得脱毒苗的技术。人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。（2）单倍体育种实质：花药离体培养过程就是植物组织培养过程。流程：花药单倍体幼苗纯合子。优点：后代不发生性状分离，都是纯合子，能够稳定遗传，明显缩短了育种年限。（人教版选修三P36“小知识”）植物组织培养所用培养基的组成：无机营养成分（包括水分、无机盐）、有机营养成分（包括小分子糖类、氨基酸、核苷酸）、激素、琼脂四部分。1.（
4、2017海南卷，31）甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题：（1）以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是_。（2）甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中，均加入一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到。若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是（填“具有完整的细胞核”“具有叶绿体”或“已转入抗性基因”）。（3）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的，这两种激素是。A中的愈伤组织是叶肉细胞经形成的。（4）若该种植物是一种
5、杂合子的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖，在培养时，（填“能”或“不能”）采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体，原因是_。解析（1）利用绿色叶片和白色花瓣作为外植体，进行组织培养的原理是高度分化了的植物细胞仍具有全能性。（2）蔗糖属于二糖，其单位是一分子果糖和一分子葡萄糖，具有完整细胞核的植物细胞才具有全能性。（3）在组织培养过程中，常需要添加的两种植物激素为细胞分裂素和生长素，由叶肉细胞形成愈伤组织的过程为脱分化。（4）杂合子经减数分裂形成不同基因型的花粉，若用花粉离体培养，所得到的个体基因型与原植株不同。答案（1）绿色叶片和白色花瓣的细胞具有
6、全能性，在一定条件下能发育成完整的植株 （2）葡萄糖、果糖具有完整的细胞核 （3）细胞分裂素、生长素脱分化 （4）不能对杂合子的植株来说，其体细胞的基因型相同，而花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同。用花粉粒进行组织培养得到的花卉基因型不同于原植株2.（2018南京、盐城一模）下图为烟草植物组织培养过程的流程图。下列有关叙述正确的是（）A.对过程获取的根组织块应做较彻底的灭菌处理B.过程应根据要求使用适宜的培养基，在避光的环境中进行C.过程发生脱分化，其实质是基因的选择性表达D.用人工种皮包裹X细胞可获得烟草人工种子解析因为灭菌的高温条件会使细胞死亡，所以对过程获取的根组织块应做消毒处理；过程是
7、脱分化，应在避光的环境中进行；过程是再分化，实质是基因的选择性表达；用人工种皮包裹胚状体可获得烟草人工种子。答案B考点二动物细胞工程1.动物细胞培养（1）地位：动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合等。其中动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础。（2）培养过程（3）培养条件无菌、无毒环境营养：除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。适宜的温度：36.5 0.5 ；适宜的pH：7.27.4。气体环境2.动物体细胞克隆技术（核移植技术）（1）原理：动物细胞核具有全能性。（2）核移植分类：胚胎细胞核移植和体细胞核移植。（3
8、）核移植过程（以克隆高产奶牛为例）（4）应用：加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。保护濒危物种。生产医用蛋白。作为异种移植的供体。用于组织器官的移植。3.动物细胞融合和单克隆抗体的制备（1）动物细胞融合原理：细胞膜的流动性。融合方法：聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒、电激等。意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，也为制造单克隆抗体开辟了新途径。（2）单克隆抗体制备过程优点：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备。用途：作为诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物。1.（人教版选修三P49图222）动物体细胞核移植技术为何选用去核卵（母）细胞？提示卵母细胞体积大，易操作，含有营养物质丰富，还
9、因为其含有能够激发细胞核全能性表达的物质。2.（人教版选修三P53图224）单克隆抗体制备过程中“两次筛选”目的有何不同？提示第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选的目的是筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。（2018全国卷，38）生物选修3：现代生物科技专题2018年细胞期刊报道，中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴“中中”和“华华”。回答下列问题：（1）“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程，核移植是指。通过核移植方法获得的克隆猴，与核供体相比，克隆猴体细胞的染色体数目（填“减半”“加倍”或“不变”）。（2）哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体
10、细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度（填“大于”或“小于”）体细胞核移植，其原因是。（3）在哺乳动物核移植的过程中，若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，通常，所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目（填“相同”或“不同”），性染色体组合（填“相同”或“不同”）。解析（1）动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，与核供体相比，其细胞的染色体数目不变。（2）由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困
11、难，所以，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度明显低于体细胞核移植。（3）哺乳动物雌性和雄性个体的体细胞中常染色体数目相同，所以分别以雌性和雄性个体的体细胞为供体，克隆动物体细胞的常染色体数目相同，但其性染色体组合不同。答案（1）将动物的一个细胞核，移入一个已去掉细胞核的卵母细胞中不变（2）小于胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易（3）相同不同（1）核移植中供体动物、提供卵母细胞的动物、代孕动物和克隆动物之间的关系：克隆动物绝大部分性状与供体动物相同，少数性状（由线粒体DNA控制的性状）与提供卵母细胞的动物相同，与代孕动物的性状无遗传关系。 （2）核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本可能不同的
12、3个原因：克隆动物细胞质基因来源于另一个亲本，与植物组织培养不同（来自一个亲本），即克隆动物遗传物质来自两个亲本。在发育过程中可能发生基因突变、染色体变异导致性状改变。外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。（3）细胞核移植技术形成重组细胞并发育成一个新个体，体现了细胞核的全能性而非动物细胞的全能性。（4）克隆属于无性繁殖，产生新个体的性别、绝大多数性状与供核亲本一致。（5）灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。（6）除了受到注射的抗原的刺激，小鼠在生活过程中还可能受到其他抗原的刺激，因此从小鼠体内取出的多个B淋巴细胞可能产生多种不同抗体。（7）单克
13、隆抗体制备过程中，进行了多次动物细胞培养的操作，说明动物细胞培养是动物细胞工程的基础。（8）相比植物体细胞杂交，动物细胞融合特有的诱导方式是用灭活的病毒处理，其他物理、化学诱导融合的手段与植物体细胞杂交过程中原生质体诱导融合的方法相同。澄清易错易混强化科学思维易错易混易错点1对脱毒苗的选材理解不透点拨由于植物分生区附近（如茎尖）的病毒极少，所以常采用茎尖组织培养技术获得脱毒苗。易错点2人工种子与自然种子不同点拨人工种子是通过无性生殖（植物体细胞的组织培养技术）形成的，只有一个亲本的性状；自然种子是有性生殖的产物，具有两个亲本的性状。易错点3不清楚动物细胞培养时，为何使用胰蛋白酶而不使用胃蛋白酶
14、点拨进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。分散细胞时不能用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶作用的适宜pH约为1.8。胰蛋白酶作用的适宜pH为7.27.8，而多数动物细胞培养的适宜pH为7.27.4。易错点4混淆原代培养与传代培养点拨（1）原代培养：细胞悬液第一次在瓶中培养，没有分瓶培养之前的细胞培养。（2）传代培养：原代培养的细胞生长、繁殖一定时间后，由于空间不足或细胞密度过大导致接触抑制影响细胞的生长，因此需要重新用胰蛋白酶等处理，进行分瓶扩大培养，即传代培养。易错点5不清楚动物细胞克隆化培养时为何常选10代以内的细胞，而“瘤细胞”却为“50代以后”点拨取供体动物的体
15、细胞培养，一般选用传至10代以内的细胞，因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传物质。然而欲获得“无限增殖”的“瘤细胞”则往往在“50代以后”，其遗传物质已发生变化，具“癌变”特性。规范答题下面两幅图是制备单克隆抗体的示意图，请据图回答下列问题（1）图1和图2所示过程中，都必须用到的动物细胞工程技术是，进行图1中时需保障的环境，其培养液也要定期更换，为什么？_。（2）图1中过程遭淘汰的细胞有（最多只考虑两两融合），该过程与植物原生质体融合的不同之处是用诱导。（3）图2中B所示的细胞特点是。（4）图2技术的核心步骤是。答卷采样错因分析混淆加抗生素与定期更换培养液的
16、作用正确答案：清除代谢产物，防止其对细胞造成危害忽略了B细胞与骨髓癌细胞自身融合的产物正确答案：B细胞、骨髓瘤细胞及BB，瘤瘤融合细胞答题不全面正确答案：既能无限增殖又能产生单一抗体随堂真题&预测1.（2013江苏卷，11）某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植，可应用多种技术获得大量优质苗，下列技术中不能选用的是（）A.利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗B.采用花粉粒组织培养获得单倍体苗C.采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上D.采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养解析利用茎段扦插，诱导生根，可以快速育苗，且不改变生物性状，A正确；利用花粉粒组织培养得到的是单倍体，且
17、花粉粒为雄配子，发育来的单倍体植株会发生性状分离，不能保持亲代的优良性状，B错误；嫁接属于无性繁殖，可保持优良性状，C正确；利用幼叶、茎尖等部位进行组织培养得到的个体可保持亲本优良性状，D正确。答案B2.（2016江苏卷，9）下列有关细胞工程的叙述，正确的是（）A.PEG是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合B.用原生质体制备人工种子，要防止细胞破裂C.骨髓瘤细胞经免疫处理，可直接获得单克隆抗体D.核移植克隆的动物，其线粒体DNA来自供卵母体解析PEG是促细胞融合剂，但植物细胞不能直接融合，需先去壁形成原生质体才能融合，A错误；制备人工种子应用完整的植物细胞，不需制备原生质体，B错误；骨髓瘤细
18、胞不能产生抗体，C错误；核移植克隆的动物，其线粒体只来自卵细胞即线粒体DNA来自供卵母体，D正确。答案D3.（2017江苏卷，11）牛雄性胚胎中存在特异性HY 抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加HY 单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是（）A.HY 单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌B.应选用原肠胚做雌雄鉴别C.鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植D.用HY抗原免疫母牛可获得相应抗体解析单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌，A错误；做雌雄性别鉴别应选择囊胚期的滋养层细胞，B错误；由于是利用乳腺生物反应器进行生物制药，则鉴别后的雌性胚胎可直接做胚胎移植，雄性胚胎没有意义，
19、C错误；HY抗原免疫母牛，使其体内产生体液免疫，产生相应的浆细胞，获得相应抗体，D正确。答案D4.（2014江苏卷，29）为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列问题：（1）外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为。（2）在愈伤组织悬浮培养时，细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如图所示。细胞干重在12 d后下降的原因有；培养液中蔗糖的作用是、。（3）多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。二倍体愈伤组织细胞经处理，会产生染色体加倍的细胞。为检测愈伤组织细胞染色体数目，压片前常用纤维素酶和酶解离愈伤组织。若愈伤组织细胞（2n）经诱导处理后，
20、观察到染色体数为8n的细胞，合理的解释是、_。（4）为了更好地获得次生代谢产物，生产中采用植物细胞的固定化技术，其原理与酵母细胞固定化类似。下列说法正确的有（填序号）。选取旺盛生长的愈伤组织细胞包埋必须在光照条件下培养培养过程中需通空气固定化后植物细胞生长会变慢解析（1）外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为脱分化。（2）蔗糖在细胞培养的过程中不断被消耗，细胞干重在12 d后下降的原因有蔗糖浓度下降，pH降低。蔗糖的作用是提供能源和调节渗透压。（3）秋水仙素（低温）可诱导染色体数目加倍。一般采用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁；2n的细胞经染色体加倍后变成4n，处于有丝分裂后期时，染色体数目再加倍
21、，变成8n；或者经加倍到8n的细胞处于有丝分裂中期。（4）植物细胞的固定化过程不需要光的参与，错误；一般选旺盛生长的愈伤组织细胞包埋，正确；培养过程中需通空气，使细胞进行有氧呼吸，正确；固定化后植物细胞与外界培养液的物质交换会受一定的影响，生长会变慢，正确。答案（1）脱分化（2）蔗糖浓度下降，pH降低提供能源调节渗透压（3）秋水仙素（低温）果胶经加倍到4n的细胞处于有丝分裂后期经加倍到8n的细胞处于有丝分裂中期（4）5.（2020高考预测）根据下面体细胞杂交技术流程图和动物细胞培养的基本过程示意图，回答下列问题：（1）图甲若运用传统有性杂交（即用番茄、马铃薯杂交）能否得到杂种植株？为什么？_。
22、（2）图甲中运用的技术手段依据的原理是，其中过程融合完成的标志是，与过程密切相关的具有单层膜结构的细胞器为。（3）图甲中已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体植株，则“番茄马铃薯”属于倍体植株。（4）随“神舟六号”太空旅行的种苗中，最受关注的是柴油树试管苗。柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物，可用植物组织培养来实现柴油的工业化生产。若利用此技术，将柴油树细胞培养进行到阶段（填图甲中字母编号）即可。（5）图乙容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自动物胚胎或幼龄动物的器官、组织，原因是_。（6）图乙容器A中的动物器官或组织首先要用酶处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是_（7）图乙动
23、物细胞培养技术的原理是，培养首先在B瓶中进行，为了保证无菌的环境，通常在培养液中添加一定量的，加入CO2的作用是。由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为。解析（1）番茄、马铃薯之间存在生殖隔离，因此利用传统有性杂交不能得到番茄马铃薯杂种植株。（2）利用原生质体融合，再利用杂种细胞培育杂种植株，此过程依据的原理是植物细胞的全能性和细胞膜的流动性，其中是原生质体融合，完成的标志是细胞壁的再生；过程表示细胞壁的再生，与细胞壁形成有关的单层膜细胞器是高尔基体。（3）已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体植株，
24、则经过体细胞杂交技术获得的“番茄马铃薯”属于六倍体植株。（4）已知柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物，则利用此技术，将柴油树细胞培养进行到e愈伤组织即可。（5）动物胚胎或幼龄动物的组织、器官分化程度低、代谢旺盛、分裂能力强，可作为动物细胞培养的材料。（6）容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是剪碎，然后用胰蛋白酶处理，目的是使细胞分散开，使每个细胞能与培养液充分接触。（7）动物细胞培养技术的原理是细胞增殖；为了保证无菌的环境，通常在培养液中添加一定量的抗生素；培养液中加入二氧化碳的作用是维持培养液的pH；动物细胞培养液中一般要加入动物血清、血浆；当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细
25、胞就会停止分裂增殖，这种现象称为接触抑制。答案（1）不能，存在生殖隔离（2）细胞膜的流动性、植物细胞的全能性形成新的细胞壁高尔基体（3）六（4）e（5）分化程度低，分裂能力强（6）胰蛋白使细胞分散开，细胞能与培养液充分接触（7）细胞增殖抗生素维持培养液的pH动物血清、血浆接触抑制课后分层训练（时间：35分钟）1.（2018淮中、南师附中、海门、天一四校联考）下列关于植物组织培养及其应用的叙述，正确的是（）A.离体的植物组织、器官必需经过灭菌才能接种到组织培养基中B.以植物芽尖为材料通过组织培养可以获得抗毒新品种C.生长素、细胞分裂素的协同调节作用在组织培养中非常重要D.以人工膜包裹植物愈伤组织
26、和营养物质可制得人工种子解析离体的植物组织、器官必须经过消毒才能接种到组织培养基中，灭菌会杀死细胞；以茎尖为材料通过组织培养可以获得脱毒苗，但不是新品种，获得抗病毒的新品种必须经过转基因技术；以人工薄膜包裹胚状体等可制得人工种子。答案C2.（2018扬州一模）以某植物的绿色叶片和白色花瓣为材料进行植物组织培养，下列相关叙述正确的是（）A.外植体脱分化形成愈伤组织的过程需要生长调节剂和光照B.绿色叶片和白色花瓣作为外植体，进行组织培养均能获得试管苗C.若选用花粉进行组织培养，能获得与原植株基因型相同的个体D.组织培养所选用的外植体细胞必须有完整的细胞核和叶绿体解析外植体脱分化形成愈伤组织不需要光
27、照；绿色叶片和白色花瓣是细胞分化的结果，遗传物质并没有改变，所以两者进行组织培养均能获得试管苗；花粉是经减数分裂形成的，花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同，用花粉粒进行组织培养得到的植株属于单倍体，其基因型不同于原植株；植物组织培养的原理是细胞的全能性，所以所选用的外植体细胞必须有完整的细胞核，但不一定要有叶绿体。答案B3.（2018苏锡常镇三模）下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（）A.接触抑制的细胞经分散后继续培养，细胞将不再增殖B.动物细胞培养选用的培养材料大多是胚胎或幼龄动物的组织C.经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可直接生产特定的单克隆抗体D.常在培养基中添加一定种类和数量的抗
28、生素以防止培养的细胞被病毒感染解析接触抑制的细胞经分散后继续培养，细胞可以增殖；动物细胞培养一般选用胚胎或幼龄动物的组织，因为这些细胞分裂增殖能力强；经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞还需要进行第二次筛选，即单一抗体阳性检测，选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，才可生产特定的单克隆抗体；培养基中添加一定种类和数量的抗生素是防止培养的细胞被细菌感染。答案B4.（2018南京、盐城、连云港二模）下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（）A.用胰蛋白酶处理动物组织后，可用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液B.少数细胞在连续培养50代后可获得不死性，是某些基因选择性表达的结果C.根据在高倍镜下观察到基因突变
29、的比例可推知某化学药品的毒性D.PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养能得到优良动物个体解析少数细胞连续培养获得不死性，是某些基因突变的结果；基因突变在光学显微镜下看不到；动物细胞培养不能得到动物个体。答案A5.（2018通、泰、淮、连、扬、徐、宿三模）下图是单克隆抗体制备过程示意图，相关叙述错误的是（）A.过程注射一种灭活病毒可使小鼠体内产生多种浆细胞B.过程形成的两两融合细胞只有图中的3种类型C.过程采用抗原抗体反应进行特定杂交瘤细胞的筛选D.过程获得的全部杂交瘤细胞都只能产生同一种抗体解析由图可知，灭活的病毒含多种抗原决定簇，可使小鼠体内产生多种浆细胞；过程形成的两两融合细
30、胞除图中的AD、BD、CD这3种外，还有浆细胞的两两融合（AA、BB、CC、AB、AC、BC）和骨髓瘤细胞的两两融合（DD）；过程采用抗原抗体反应筛选产生特定抗体的杂交瘤细胞；过程获得的全部杂交瘤细胞都是经过单一抗体阳性检测过的，都只能产生同一种抗体。答案B6.（2018盐城三模）某研究者利用细胞工程制备抗A的单克隆抗体。先用抗原（A）分别免疫3只同种小白兔（X、Y和Z），每只小白兔免疫5次，每次免疫一周后测定各小白兔血清抗体的效价（能检测出抗原、抗体反应的血清最大稀释倍数），制备B淋巴细胞时，免疫小鼠的血清抗体效价需达到16 000以上，结果如下图所示。下列有关叙述错误的是（）A.将抗原A注
31、入小白兔体内的目的是为了获得已免疫的B淋巴细胞B.最适合用于制备B淋巴细胞的是第五次免疫后的Y小白兔C.骨髓瘤细胞与B淋巴细胞的融合必须使用灭活的病毒进行促融D.融合细胞需经两次筛选才可获得只分泌抗A抗体的杂交瘤细胞解析多次注射抗原是为了获得已免疫的B淋巴细胞；第五次免疫后的Y小白兔血清抗体的效价最高，最适合用于制备B淋巴细胞；骨髓瘤细胞与B淋巴细胞的融合可以使用灭活的病毒进行促融，也可以使用PEG、离心、振动、电激等方法；融合细胞经第1次筛选获得杂交瘤细胞，再经第2次筛选才可获得只分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。答案C7.（2018通、泰、扬、徐、淮、宿二模）在利用细胞融合技术生产单克隆抗体的过程
32、中，不需要考虑（）A.多次注射特定抗原蛋白，对实验小鼠进行免疫B.淋巴B细胞和骨髓瘤细胞之间的免疫排斥C.向细胞培养液中加入促融剂的种类和处理时间D.选择特定试剂筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞解析淋巴B细胞和骨髓瘤细胞取自同种生物，不存在免疫排斥，且可以诱导融合。答案B8.（2018南京、盐城、连云港二模）某小鼠生活过程中被多种病原体感染过，科学家以该小鼠为实验材料，利用单克隆抗体技术，获得了抗某种病原体的高纯度单克隆抗体。下列有关叙述错误的是（）A.被多种病原体感染过的小鼠体内会产生多种浆细胞B.经细胞融合后形成的单个杂交瘤细胞可分泌多种特异性抗体C.使用人鼠嵌合单克隆抗体进行疾病治疗可减少
33、副作用的发生D.单克隆抗体的制备过程中应用了动物细胞培养和细胞融合技术解析一种浆细胞只能分泌一种抗体，单个杂交瘤细胞只能分泌一种特异性抗体。答案B9.（2018镇江一模）下图表示抗胃癌单克隆抗体的制备过程，相关叙述错误的是（）A.抗胃癌单克隆抗体可以和甲特异性结合B.用特定的选择培养基对乙选择后获得的细胞均能增殖C.需对丙进行抗体检测，经过筛选后才可获得丁D.用生物导弹杀死癌细胞利用了单克隆抗体的杀伤作用解析用生物导弹杀死癌细胞利用了单克隆抗体的靶向作用，单克隆抗体上连接的药物或放射性同位素起杀伤作用。答案D10.（2018镇江一模）（多选）下列关于植物组织培养的叙述，错误的是（）A.以一株植
34、物的叶片或花药为外植体培育的植株基因型相同B.培养过程中应给予适当光照以促进愈伤组织的光合作用C.适当提高培养基中细胞分裂素的比例有利于愈伤组织分化成芽D.常用茎尖进行组织培养获得脱毒苗是因为茎尖不含有毒物质解析以花药为外植体培育的植株是单倍体，与叶片培育成的植株基因型不同；脱分化形成的愈伤组织没有叶绿体，不能进行光合作用，再分化培养过程中需给予适当光照；培养基中细胞分裂素的比例大，有利于愈伤组织分化成芽，生长素的比例大，有利于生根；常用茎尖进行组织培养获得脱毒苗是因为茎尖含极少甚至不含病毒。答案ABD11.（2018淮中、南师附中、海门、天一四校联考）（多选）下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的
35、制备过程。下列叙述正确的是（）A.反复给小鼠注射甲的目的是让小鼠体内产生更多的抗体B.人工诱导细胞融合获得乙的常用方法是用灭活的病毒C.丁细胞既能无限增殖又能产生抗甲抗原的抗体D.制备的单克隆抗体可以早诊断人体胃癌的发生情况解析反复给小鼠注射甲的目的是让小鼠体内产生更多的浆细胞。答案BCD12.（2018无锡一模）多年生禾本科碱茅属草本植物，小花碱茅种子细小，外包被颖壳，研究人员以小花碱茅成熟种子为外植体，对种子脱颖处理，用不同浓度激素配比诱导愈伤组织形成及分化，成功建立了完整的小花碱茅组织培养植株再生体系。以下是部分研究数据，请分析回答：处理激素浓度/（mgL1）愈伤组织诱导率%2，4D6B
36、A13052.12.225055.22.1330.142.41.9450.146.92.0570.138.61.4650.343.72.8（1）诱导小花碱茅愈伤组织最佳的激素配比浓度为_。 （2）诱导形成愈伤组织的过程称为，该过程在以MS3%蔗糖0.7%琼脂（pH 78）为基本培养基，25 左右的条件下无菌培养，基本培养基中加入蔗糖的目的是_。 （3）从上图分析可知，种子脱颖后，发芽率、污染率的变化是，种子颖壳影响发芽率可能的原因有很多，其中之一是因为颖壳妨碍了种子和的接触，从而影响了种子细胞的有氧呼吸。 （4）对脱颖种子无菌处理的方法有（多选）。 用75%的酒精处理5%的次氯酸钠处理无菌水冲
37、洗高压蒸汽灭菌解析（1）由表中数据可以看出，5.0 mgL1 的2，4D，不添加6BA的激素配比愈伤组织诱导率最大，是诱导小花碱茅愈伤组织最佳的激素配比浓度。（2）脱分化诱导形成愈伤组织，该过程需在避光条件下进行，基本培养基中的蔗糖既能提供营养物质，又能调节渗透压。（3）从图中可以看出，无颖种子发芽率显著提高，污染率降低，可能是因为颖壳妨碍了种子和培养基、O2的接触，从而影响种子细胞的有氧呼吸。（4）脱颖种子可以用75%的酒精、 5%的次氯酸钠或无菌水冲洗达到消毒的目的，高压蒸汽灭菌会使种子死亡。答案（1）5.0 mgL1 2，4D，不添加6BA（2）脱分化避光提供营养物质，调节渗透压（3）种
38、子发芽率显著提高，污染率降低培养基、O2（4）13.双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。如图是科研人员通过杂交杂交瘤细胞技术（免疫的B细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性单克隆抗体的部分过程。分析回答：（1）过程的目的是_，制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的技术_（至少答出两条）。（2）过程诱导融合的方法是，过程选用的骨髓瘤细胞（填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。（3）经过程筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板中进行过程，原因是_。（4）请根据所学知识，用箭头和文字补全图中方框内获取单克隆杂交杂交瘤细胞的生产过程。（
39、5）获得的单克隆杂交杂交瘤细胞在体外条件下培养或，均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。解析（1）过程表示给小鼠注射抗原，目的是刺激小鼠产生能分泌识别癌胚抗原抗体的浆细胞（B淋巴细胞）；根据单克隆抗体制备流程可知，该过程涉及的技术包括动物细胞融合技术、动物细胞培养技术。（2）诱导动物细胞融合的方法有聚乙二醇、灭活病毒、电激等。HAT培养基的作用是筛选出杂交瘤细胞，骨髓瘤细胞不能在HAT培养基上生长。（3）从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种类型，故筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体不是单克隆抗体，因此经过程筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板上运用抗原抗体杂交法筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞。（4）单克
40、隆抗体制备过程为将获得的B淋巴细胞与单克隆杂交瘤细胞融合在选择培养基上筛选出杂交杂交瘤细胞克隆化培养、抗体检测筛选出单克隆杂交杂交瘤细胞。（5）获得的单克隆杂交杂交瘤细胞在体外条件下培养或注射到小鼠腹腔内增殖，均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。答案（1）使小鼠产生能分泌识别癌胚抗原抗体的浆细胞（B淋巴细胞）动物细胞融合、动物细胞培养（2）聚乙二醇（PEG）诱导、电激等不能（3）从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种类型（筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体不是单克隆抗体）（4）将获得的B淋巴细胞与单克隆杂交瘤细胞融合在选择培养基上筛选出杂交杂交瘤细胞克隆化培养、抗体检测筛选出单克隆杂交杂交瘤细胞（5）注射到小鼠腹腔内增殖
