1、第33讲微生物的培养与应用1.(2018山东武城模拟)稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是()A.操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B.需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面C.不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D.对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理答案C只有菌液稀释到一定程度后,在固体培养基表面才能形成单个的菌落,否则可能会出现两个或两个以上的细菌共同形成一个菌落,或菌落出现重叠。2.(2018山东博兴质检)下列关于微生物培养和利用的叙述,错误的是()A.利用稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数B.接种时连续划线的目的是
2、将聚集的菌种逐步分散获得单个菌落C.以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D.选择培养基作用的原理是显现某微生物的特征,以区别于其他微生物答案D稀释涂布平板法能分离纯化微生物也能对微生物进行计数;连续划线是将聚集的菌种逐步分散,以获得单菌落;尿素分解菌的分离可以选用以尿素为唯一氮源,且含酚红的培养基;选择培养基是在培养基中加入某一化学物质或改变某一理化性质,使某一微生物正常生长,而其他微生物则被杀灭或生长受到抑制,从而选出所需要的微生物。3.工业上常用酵母菌来改善酿造酱油的风味,在稀释发酵阶段,由于添加了较多的盐,抑制了大部分微生物的生长,而一些耐盐酵母菌会继续生长,发酵产生乙
3、醇、有机酸等小分子物质,增加酱油的风味。某实验小组从传统发酵酱油中筛选并分离耐盐酵母菌,请回答下列问题:(1)将酵母菌用于酱油发酵过程中,密封的发酵罐要留有一定的空间,其目的是。(2)若用牛肉膏蛋白胨培养基培养大肠杆菌,则培养基的pH需要调至。实验室对培养基灭菌的常见方法是。(3)筛选耐盐酵母菌的培养基中需要加入青霉素,其目的是。为了保证筛选出的酵母菌具有耐盐性,培养基中还需要加入。酵母菌发酵产生的乙醇与(试剂)反应会呈现灰绿色,该反应可用于乙醇的检验。(4)在对菌液中的耐盐酵母菌进行计数时,一般要将多个稀释倍数的菌液分别涂布在平板上培养,其目的是。答案(1)为酵母菌提供氧气,以促进酵母菌的繁
4、殖(2)中性或微碱性高压蒸汽灭菌法(3)抑制细菌的繁殖一定浓度的食盐溶液酸性重铬酸钾(4)保证能从中筛选出菌落数在30300的平板进行计数4.(2018河南安阳调研)如图表示研究者从土壤中筛选分解尿素的细菌并计数的相关实验,请据图回答下列问题:(1)进行过程和的目的分别是和;图中弧线箭头上“?”的具体操作是。(2)进行培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是。倒平板时,待平板冷却凝固后,应将平板倒过来放置,并用记号笔在皿底上标明培养微生物名称、平板上培养样品的稀释度、制作者姓名、培养日期及培养基种类等信息。纯化菌种时为了得到单一菌落,常采用的接种方法是。(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中
5、加入。培养后,若出现色就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。(4)在实验中,研究者每隔24小时统计一次菌落数目,并选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止。答案(1)选择培养增加分解尿素的细菌的数量挑出菌落(2)先调节pH,后灭菌平板划线法、稀释涂布平板法(3)酚红指示剂红(4)因培养时间不足导致遗漏细菌数目5.(2018宁夏平罗月考)实现生态农业,让秸秆回归农田的关键是获得能够高效分解秸秆的微生物。请回答下列相关问题:(1)秸秆的主要成分易被酶分解;从功能上看,筛选能产生该酶的微生物所用的培养基属于培养基。(2)甲、乙两组同学设计了两种培养基(成分见下表):培养基硝酸铵无机盐淀粉纤维素
6、粉琼脂CR溶液水A+-+B+-+注:“+”表示有;“-”表示无;CR为刚果红。A培养基(填“能”或“不能”)用于分离要筛选的分解菌,原因是;加入刚果红(CR)的目的是:。(3)甲、乙两组同学分别采用稀释涂布平板法和平板划线法接种。甲组同学将1 mL水样稀释100倍后,在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液,经适当培养后,3个平板上的菌落数分别是39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为个;示意图a和b中,是甲组同学接种培养后得到的结果;乙组同学划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是。(4)甲、乙两组同学在微生物接种培养过程中,均留下一个未接种的平板同时培养,目的是。答案(
7、1)纤维素选择(2)能纤维素粉是唯一碳源CR可与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,培养基上会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈(3)3.8107图b将聚集的菌体逐步稀释,以便获得单个菌落(4)作为对照解析(1)秸秆的主要成分是纤维素,易被纤维素酶分解;筛选能产生纤维素酶的微生物的培养基属于选择培养基。(2)从表中培养基的成分来看,A培养基能用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是该培养基是固体培养基,且以纤维素粉为唯一碳源。刚果红可与纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,无法形成红色复合物,培养基上会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,可据此来筛选纤维素分解菌。(3)从示意图看,图b是采用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。根据题意得知每升水样中的活菌数为380.1100103=3.8107(个)。图a是采用平板划线法接种培养后得到的结果,划线时总是从上一次划线的末端开始,这样做的目的是通过划线次数的增加,使每次划线时菌体的数目逐渐减少,以便得到单个菌落。(4)为了确定培养基的灭菌是否彻底,应设置空白对照:随机取若干灭菌后的空平板培养一段时间,观察培养基上是否有菌落生成。