1、河北省石家庄市辛集市一中2020-2021学年高二生物第一次月考试题（含解析）一、单选题（每题1分，共60分，请将答案填写在答题纸相应区域）1. 为了增加牡丹的花色类型，研究者从某植物中克隆出花色基因C （图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。下列操作与实验目的不符的是A. 用限制性核酸内切酶EcoR和DNA连接酶构建重组质粒B. 用含C基因的农杆菌侵染牡丹的愈伤组织，将C基因导入细胞C. 在培养基中添加青霉素，筛选被转化的菊花细胞D. 用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上【答案】C【解析】【分析】本题考查基因工程的相关知识，掌握基因工程操作流程及各个操作依据的原
2、理是正确解答该题的关键。【详解】A、用限制性核酸内切酶EcoRI处理目的基因和质粒，可以使目的基因两侧和质粒产生相同的黏性末端，再用连接酶把切口连起来就能构建成重组质粒，A正确；B、农杆菌转化法适用于双子叶植物或裸子植物，菊花属于双子叶植物，故可用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞，B正确；C、质粒中只有潮霉素抗性基因，被转化的菊花细胞只对潮霉素具有抗性，在培养基中添加青霉素，不能筛选被转化的菊花细胞，C错误；D、检测目的基因是否整合到受体细胞的染色体上，可采用DNA分子杂交技术，D正确。故选C。2. 如图所示，hok 基因位于大肠杆菌的R1质粒上，能编码产生一种毒蛋白，会导致
3、自身细胞裂解死亡，另外一个基因sok也在这个质粒上，转录产生的sokmRNA能与与hokmRNA结合，这两种mRNA结合形成的产物能被酶降解，从而阻止细胞死亡。下列说法合理的是（ ）A. sokmRNA和hokmRNA碱基序列相同B. 当sokmRNA存在时，hok基因不会转录C. 当sokmRNA不存在时，大肠杆菌细胞会裂解死亡D. 两种mRNA结合形成的产物能够表达相关酶将其分解【答案】C【解析】【分析】分析题图：hok基因和sok基因都位于大肠杆菌的Rl质粒上，其中hok基因能编码产生一种毒蛋白，会导致自身细胞裂解死亡，而sok基因转录产生的sokmRNA能与hokmRNA结合，这两种m
4、RNA结合形成的结构能被酶降解，从而阻止细胞死亡。据此答题。【详解】A、sokmRNA能与hokmRNA结合，说明这两种mRNA的碱基序列互补而不是相同，A错误；B、当sokmRNA存在时，hok基因仍能转录，只是转录形成的hokmRNA会与sokmRNA结合，B错误；C、根据题干信息“转录产生的sokmRNA能与hokmRNA结合”可知，当sokmRNA不存在时，hokmRNA才能翻译合成毒蛋白，大肠杆菌细胞会裂解死亡，C正确；D、两种mRNA结合形成的产物能够被酶降解，但是这种酶不是它们结合形成的产物表达产生的，D错误。故选C。【点睛】3. 下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，有关说法
5、错误的是A. AB过程中一般用4种脱氧核苷酸为原料，并加入两种引物B. BC为转基因绵羊的培育过程，常选用的受体细胞是卵母细胞C. AB过程利用了DNA（双链）复制原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶D. BD为转基因植物的培育过程，其中过程常用的方法是农杆菌转化法【答案】B【解析】【分析】图中AB过程是PCR，PCR扩增DNA片段的原理是DNA复制原理，利用DNA分子热变性的原理通过控制温度来控制双链的解聚与结合，包括DNA分子的变性、复性和延伸阶段，需要四种游离的脱氧核糖核苷酸、两种引物和耐高温的DNA聚合酶；利用转基因技术培育新品种常用的受体细胞的受精卵；转基因植物的培育过程将目的基因导入
6、受体细胞常用农杆菌转化法。【详解】A. AB过程是多聚酶链式反应扩增DNA片段的过程，需要加入两种引物和4种脱氧核苷酸，A正确；B. BC为转基因绵羊的培育过程，常选用的受体细胞是受精卵，B错误；C. AB过程是多聚酶链式反应扩增DNA片段的过程，利用了DNA复制原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶，C正确；D. BD为转基因植物的培育过程，其中过程常用的方法是农杆菌转化法，D正确。4. 科学家在某种植物中找到了抗枯萎的基因，并以质粒为运载体，采用转基因方法培育了抗枯萎病的金茶花新品种，下列有关说法不正确的是（ ）A. 抗枯萎病的金茶花与原金茶花之间没有形成生殖隔离B. 质粒是能自我复制的小型细
7、胞器，因此适合做运载体C. 抗枯萎基因最终整合到植物的染色体组中，该技术应用的原理是基因重组D. 通过该方法获得的抗病金茶花，将来产生的配子不一定含抗病基因【答案】B【解析】【分析】本题考查基因工程的相关知识，要求识记基因工程的概念、原理、操作工具及操作步骤等，掌握各操作步骤中需要注意的细节。基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转
8、化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】抗枯萎病的金茶花不是新物种，所以与原金茶花之间没有形成生殖隔离，A正确；质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子，质粒不是细胞器，B错误；抗枯萎基因通过基因工
9、程的方法最终整合到植物的染色体组中，该技术应用的原理是基因重组，C正确；通过该方法获得的抗病金茶花，其抗病基因只存在于某一条染色体上，相当于杂合子，其产生的配子有1/2含有抗病基因，1/2不含抗病基因， D正确；故选B。5. 科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的 -珠蛋白，治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计中正确的是（ ）A. 用 -珠蛋白基因的编码序列加启动子、终止子、抗四环素基因等元件来构建表达载体B. 利用小鼠的成熟红细胞提取 mRNA，再经逆转录可获得 -珠蛋白基因的编码序列C. 用含有四环素的培养基筛选出能繁殖的大肠杆菌，即可产生-珠蛋白D.
10、 用 Ca2处理大肠杆菌后，将表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中【答案】A【解析】【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是
11、否插入目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术，个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】基因表达载体的组成包括启动子、目的基因、标记基因和终止子，因此用-珠蛋白编码序列加启动子、抗四环素基因等元件来构建基因表达载体，A正确；小鼠的成熟红细胞中提取不到mRNA，B错误；导入大肠杆菌的可能是普通质粒或重组质粒，用含有四环素的培养基筛选出的大肠杆菌，不一定含有-珠蛋白基因，则不能生产-珠蛋白，C错误；标记基因是四环素抗性基因，因此受体细胞不能具有四环素抗性，即用Ca2+处理大肠杆菌后，将表达载体导
12、入不具有四环素抗性的大肠杆菌中，D错误，故选A。【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项。6. 下图是某转基因抗虫水稻培育流程图,下列有关分析错误的是()A. 过程依据细胞的全能性原理B. 毒蛋白基因的获得需要RNA聚合酶C. 过程所依据的理论基础之一是DNA分子结构的相似性D. 该基因工程成功标志是毒蛋白基因在宿主细胞中稳定维持和表达其遗传特性【答案】B【解析】过程是植物组织培养，依据细胞的全能性原理，A正确；毒蛋白基因的获得需要限制酶，RNA聚合酶是催化RNA合成的酶，不需要，B错误；过程
13、所依据的理论基础之一是DNA分子结构的相似性，C正确；该基因工程的目的就是让毒蛋白基因在宿主细胞中稳定存在并高效的表达所需的遗传特性，D正确。7. 基因工程和蛋白质工程的区别是A. 基因工程需对基因进行操作，蛋白质工程不对基因进行操作B. 基因工程在分子水平操作，蛋白质工程在细胞水平（或性状水平）操作C. 基因工程合成自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程可制造一种新的蛋白质D. 蛋白质工程与基因工程没有任何联系【答案】C【解析】【分析】本题考查蛋白质工程与基因工程的区别与联系，要求考生理解蛋白质过程的概念和特征，理解蛋白质工程的基础是基因工程，蛋白质工程又被称为是第二代基因工程，蛋白质工程可制造一
14、种新的蛋白质。【详解】A、基因工程和蛋白质工程都需对基因进行操作，A错误；B、基因工程和蛋白质工程都是在分子水平上进行的操作，B错误；C、基因工程合成自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程可制造一种新的蛋白质，C正确；D、蛋白质工程的基础是基因工程，蛋白质工程又被称为是第二代基因工程，D错误。故选C。8. 下图表示通过基因工程培育抗虫棉时，从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因“放入”棉花细胞中与棉花的DNA分子结合起来而发挥作用的过程示意图。以下说法正确的是()A. 该技术的核心内容是构建基因表达载体B. 目的基因在抗虫棉中的遗传要遵循基因的分离定律C. 图中常直接从大肠杆菌中获取D. 剔除培育成功的抗虫
15、棉体内的四环素抗性基因会影响抗虫基因的表达【答案】A【解析】【分析】基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品基因工程的基本操作步骤主要包括四步：目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定【详解】A、基因工程的核心内容是构建基因表达载体，A正确；B、目的基因在抗虫棉中与棉花的核DNA分子结合起来才遵循基因的分离定律，B错误；C、图中为质粒，从大肠杆菌中获取后需要经过加工才能作为运载体使用，C错误；D、剔除培育成功的抗虫棉体内的四环素抗性基因不会影响抗虫
16、基因的表达，但会影响目的基因的检测，D错误。故选A。【点睛】本题考查基因工程、基因表达等相关知识，意在考查学生的识图和判断能力。9. 来源于细菌的蓝色色素（谷氨酰胺蓝靛素）合成酶基因在白色玫瑰的花瓣中成功表达，观察到玫瑰花瓣呈现蓝色。下列相关叙述错误的是A. 目的基因为谷氨酰胺蓝靛素基因B. 花瓣中的蓝色化合物是谷氨酰胺蓝靛素C. 可利用农杆菌转化法将目的基因导入玫瑰细胞D. 构建基因表达载体是培育蓝色玫瑰的核心步骤【答案】A【解析】【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达
17、载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等【详解】目的基因为谷氨酰胺蓝靛素合成酶基因，A错误；花瓣中的蓝色化合物是谷
18、氨酰胺蓝靛素，B正确；由分析可知，根据受体细胞不同，导入的方法也不一样将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法，C正确；基因工程有四个步骤，其中构建基因表达载体是培育蓝色玫瑰的核心步骤，D正确【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查10. 中国农科院生物技术研究所郭三堆研究员领导的研究小组将自主设计的Bt杀虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了国产抗虫棉。有关国产抗虫棉研制过程的叙述，不正确的是（ ）。A. Bt杀虫基因在棉花细胞中的表达需要经过转录和翻译两个过程B.
19、基因表达载体的构建需要用到限制酶和DNA连接酶C. Bt杀虫基因具有毒性，可以直接杀死棉铃虫D. 转基因棉花是否具有抗虫特性可通过检测棉花是否对棉铃虫有抗性来确定【答案】C【解析】【分析】基因工程的工具是限制酶、DNA连接酶和运载体；抗虫鉴定时用虫食用棉花，观察其存活情况，来鉴定棉花是否具有抗虫特性【详解】A、基因的表达需要经过转录和翻译两个过程，A正确；B、构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶，B正确；C、杀虫基因没有毒性，其表达形成的蛋白质有毒性，可杀死棉铃虫，C错误；D、转基因棉花是否具有抗虫特性，个体水平上可通过检测棉花是否对棉铃虫有抗性来确定，D正确。故选C11. 在用基因工
20、程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是( )A. 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B. 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C. 将重组DNA分子导入烟草细胞D. 用含除草剂培养基筛选转基因烟草细胞【答案】A【解析】【分析】限制性核酸内切酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。基因工程的基本操作步骤主要包括四步：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。【详解】限制性核酸内切酶只能切割特定的脱氧核苷酸序列，而烟草花叶病毒的核酸是核糖核苷酸，A错误；构建基因表达
21、载体时，需要用限制酶切割得到抗除草剂基因和切开运载体，再用DNA连接酶将两者连接形成重组DNA，B正确；基因表达载体构建好之后，需要将重组DNA分子导入受体细胞（烟草细胞），C正确；基因工程的最后一步是目的基因的检测和鉴定，可以用含有除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞，D正确。【点睛】本题考查基因工程相关知识，包括基因工程的工具、操作步骤等知识点，相关内容不仅需要考生识记，还需要考生理解，特别是A选项，要求考生掌握限制酶的特点，明确限制酶只能切割特定的脱氧核苷酸序列，不能切割核糖核苷酸序列。12. 下列关于构建人胰岛素基因表达载体并导入大肠杆菌的叙述，正确的是A. 表达载体中的胰岛素基因可通过人
22、肝细胞mRNA反转录获得B. 有关的DNA聚合酶能识别并结合到启动子区域从而驱动转录C. 人胰岛素基因与基因探针能通过磷酸二酯键结合而形成杂交带D. 含目的基因的大肠杆菌表达出来的胰岛素不一定有生物学活性【答案】D【解析】分析】本题考点主要涉及遗传信息的转录和翻译，以及基因工程的原理、技术和应用。【详解】A. 由于基因的选择性表达，在人的肝细胞中，没有胰岛素基因转录形成的mRNA，A错误；B. RNA聚合酶与启动子结合，启动转录过程，B错误；C. 人胰岛素基因与基因探针通过形成氢键形成杂交带，C错误；D. 含目的基因的大肠杆菌表达出来的是胰岛素原，没有生物学活性，需要加工后才能成为胰岛素，D正
23、确。【点睛】解答本题关键是正确理解基因的选择性表达，此外D选项也是易错点，需注意大肠杆菌是原核生物，没有复杂的蛋白质加工系统，因此无法表达出有生物活性的胰岛素。13. 金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病。科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，通过如图所示的方法培育出了抗枯萎病的金茶花新品种。下列相关叙述正确的是A. 图中在基因工程中依次叫做标记基因、目的基因B. 形成的操作中使用的酶有限制酶、DNA聚合酶和DNA连接酶C. 由培育至的过程中，依次经历了脱分化、再分化的过程D. 抗枯萎病这一性状，在后代中能稳定遗传【答案】C【解析】【分析】根据题意和图示分析可知：图示表示抗枯萎病新品种的
24、培育过程，其中为质粒，为目的基因，为基因表达载体，为含有目的基因的受体细胞，为抗枯萎病新品种的幼苗。【详解】图中是质粒，是目的基因，为基因表达载体，A错误；构建基因表达载体的操作中，首先需用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒，其次还要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子，可见该操作过程中使用的酶有限制酶和DNA连接酶，不需要DNA聚合酶，B错误；由转基因受体细胞培育至转基因植株过程中还需要采用植物组织培养技术，而植物组织培养包括脱分化和再分化两个过程，C正确；抗枯萎病这一性状，在后代中不一定能稳定遗传，D错误；故选C。【点睛】本题结合抗枯萎病新品种的培育过程图，考查
25、基因工程和植物细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节；识记植物组织培养技术的过程及应用，能结合图中信息准确判断各选项。14. “筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述中正确的有几项（ ）重组质粒上的标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞基因工程中用同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因，酶切产物用DNA连接酶连接，为了保证成功率
26、，需将获得的产物筛选后导入受体细胞为了快速繁殖无子西瓜，需筛选出特定的体细胞才能进行组织培养A. 二项B. 三项C. 四项D. 五项【答案】C【解析】【分析】【详解】根据标记基因的作用，重组质粒上的标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，正确；单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞，第二次筛选出既能快速增殖，又能产生所需抗体的杂交瘤细胞，正确；基因工程中用同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因，酶切产物用DNA连接酶连接，为了保证成功率，需将获得的产物筛选后导入受体细胞，正确；快速繁殖无子西瓜，不需筛选出特定的体细胞就能进
27、行组织培养，错误；综上分析，共四项正确，故选C。【点睛】15. 继在上海和安徽首次发现 H7N9 禽流感病例，我国多地出现禽流感疫情，为此某研究小组为了研制预防H7N9 禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图。下列有关叙述错误的是( ) A. 步骤所代表的过程是反转录B. 步骤需使用限制酶和 DNA 连接酶C. 步骤可用显微注射法将表达载体导入受体细胞D. 检验 Q 蛋白的免疫反应特性，可用 Q 蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原抗体特异性反应实验【答案】C【解析】本题考查基因工程的应用，要求考生利用所学知识解读图形，判断出图中是反转录，是形成重组质粒，是将目的基因导入
28、受体细胞，是目的基因在受体细胞内表达，进而结合题意分析、判断各选项。分析图形可知，步骤代表反转录，是以禽流感病毒的RNA为模板合成DNA的过程，A正确；步骤是用限制酶和 DNA 连接酶将目的基因与质粒相连形成重组质粒，B正确；步骤将目的基因导入大肠杆菌的方法是用Ga2+处理，使大肠杆菌细胞处于感受态，进而吸收重组质粒，C错误；检验 Q 蛋白的免疫反应特性，可用 Q 蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原抗体特异性反应实验，D正确。【点睛】将目的基因导入受体细胞受体细胞种类不同，导入方法也不同，可通过下表比较记忆：生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法显微注射法转化法受体细胞体细胞
29、或受精卵受精卵原核细胞转化过程将目的基因插入到Ti质粒的TDNA上导入农杆菌侵染植物细胞整合到受体细胞的染色体DNA上表达将含有目的基因的表达载体提纯取卵(受精卵)显微注射受精卵发育获得具有新性状的动物Ca2处理细胞感受态细胞重组表达载体与感受态细胞混合感受态细胞吸收DNA分子16. 科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶蛋白。以下有关该基因工程的叙述错误的是（ ）A. 基因工程能定向地改变生物的遗传性状B. 基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的C. 马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞D. 采用反转录的方法得到的目的基因有内含子【答案】D【解析】【分析】基因工程的基本原理是
30、让目的基因在宿主细胞中稳定和高效地表达。基因工程的基本操作步骤包括：获取目的基因；形成重组DNA分子；将重组DNA分子导入受体细胞；筛选含有目的基因的受体细胞；目的基因的表达。【详解】基因工程是人为地将目的基因转入目标受体细胞中的过程，可以定向改变生物的遗传性状，A选项正确；基因非编码区虽然不能参与合成蛋白质，但是却能够调控非编码区的转录翻译，是目的基因表达必不可少的部分，B选项正确；马铃薯叶肉细胞可作为受体细胞转入目的基因，再利用组织培养技术获得转基因马铃薯，C选项正确；内含子转录得到的mRNA会在加工过程中被剪切丢失，用mRNA反转录则得不到内含子，D选项错误。因此错误的选项为D。17.
31、下列关于细胞工程的有关叙述，正确的是()A. 利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄 、马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术B. 在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，不可能会发生细胞脱分化和基因突变，而可能发生细胞分化和基因重组C. 动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体D. 动物难以克隆的根本原因是基因组中的基因不完整【答案】A【解析】花药离体培养和杂种细胞培育成杂种植株都利用了植物组织培养技术，A正确；在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，
32、因细胞分裂则可能发生基因突变，但因不发生减数分裂，所以不会发生基因重组，B错误；动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均不相同，而且只有植物体细胞杂交能产生杂种植株，C错误；动物难以克隆的根本原因是其全能性较低，D错误。18. 某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处是不正确的植物细胞工程动物细胞工程技术手段植物组织培养，植物体细胞杂交动物细胞培养和融合，动物细胞核移植等特殊处理机械法去除细胞壁胰蛋白酶处理，制成细胞悬液融合方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、生物方法典型应用人工种子、杂种植株单克隆抗体的制备培养
33、液区别生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化通常含有动物血清A. 1B. 2C. 3D. 4【答案】A【解析】【分析】植物细胞工程的技术手段主要有植物组织培养和植物体细胞杂交，其中植物组织培养是植物细胞工程的基础。动物细胞工程的技术手段主要有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植和核移植，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。【详解】（1）技术手段：植物细胞工程的技术手段有植物组织培养和植物体细胞杂交，动物细胞工程技术有动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植等，该项的描述正确。（2）特殊处理：植物体细胞杂交时，利用纤维素酶和果胶酶（酶解法）去除细胞壁，动物细胞培养时，常
34、利用胰蛋白酶处理，制成细胞悬液，该项的描述错误。（3）融合方法：诱导植物细胞融合的方法有物理（离心、振动和电激等）和化学方法（聚乙二醇），诱导动物细胞融合的方法有物理、化学和生物方法（灭活的病毒），该项的描述正确。（4）应用：植物细胞工程技术可应用于制备人工种子、培育杂种植株，动物细胞工程中的动物细胞融合技术可以用于制备单克隆抗体，该项的描述正确。（5）培养液：植物细胞工程中的培养基中需要用生长素和细胞分裂素以影响愈伤组织的生长和分化，动物细胞工程的培养液中需要加入动物血清、血浆等天然成分，该项的描述正确。由此可见，表中只有1处不正确，A正确，BCD错误。故选A。【点睛】识记植物细胞工程和动物
35、细胞工程在技术手段、特殊处理、融合方法、应用和培养基成分的区别便可解答本题。19. 粮食问题是当今举世瞩目的迫切问题之一。改善农作物的遗传性状、提高粮食产量是科学工作者不断努力的目标，如图是遗传育种的一些途径。下列有关分析不正确的是（ ）A. 若要在较短时间内获得图示新品种小麦，可选图中EFG的育种方法B. HI、JK都必须用到与G过程相同的技术操作C. CD和HI过程都可以克服远源杂交不亲和的障碍D. 图中的遗传育种途径，AB所表示的方法具有典型的不定向性【答案】B【解析】【分析】【详解】根据题意和图示分析可知：AB为诱变育种，CD为基因工程育种，EFG为单倍体育种，HI为细胞工程育种，JK
36、为多倍体育种。要尽快获得新品种小麦，应该采用单倍体育种法，A正确；G过程是用秋水仙素诱导染色体数目加倍，HI过程是植物体细胞杂交，不需要用秋水仙素诱导染色体数目加倍，B错误；基因工程育种和植物体细胞杂交都克服了远源杂交不亲和的障碍，C正确；由于基因突变是不定向的，所以图示的遗传育种途径中，AB所表示的方法具有典型的不定向性，D正确。【点睛】解答本题的关键是判断图中的几种育种方法的名称，并确定各自的育种原理是什么。20. 下列有关细胞工程的叙述错误的是（ ）A. 选择高度分化的动物体细胞进行培养不利于获得大量细胞B. 选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率C. 植物组织培养过程中
37、形成愈伤组织时需要避光培养D. 用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物细胞原生质体失去了全能性【答案】D【解析】【分析】细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法、通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。根据操作对象的不同，可分为植物细胞工程和动物细胞工程两大领域。胚胎细胞或幼龄动物细胞的增殖能力强；高度分化的植物细胞仍然保持着全能性，但是动物细胞和植物细胞不同，动物细胞的全能性会随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱，因此用动物体细胞克隆的生物，实际是通过核移植来实现的。植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶。【详
38、解】A、动物细胞培养中一般选取胚胎细胞或幼龄动物细胞培养，此时细胞的增殖能力强，高度分化的细胞一般分裂能力较低，不利于获得大量细胞，A正确；B、胚胎细胞的分化程度低，恢复其全能性相对容易，所以选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率，B正确；C、植物高度分化的细胞经过脱分化的过程转变为未分化的细胞，得到愈伤组织，愈伤组织中的细胞是未分化的细胞，在恒温箱中需要避光培养，C正确；D、在植物细胞工程中，植物体细胞杂交，需要用纤维素酶和果胶酶将植物体外阻碍杂交的细胞壁去除，获得具有活性的原生质体，仍具有全能性，再进行细胞融合得到杂交细胞，D错误。故选D。【点睛】识记并理解有关动植物细胞工
39、程的操作过程是解答本题的关键。21. 如图所示为培育农作物新品种的一种方式。下列说法正确的是（ ）A. 过程分别称为细胞分裂和细胞分化B. 该育种与传统杂交育种相比，最大的优点是繁殖速度快C. 该育种过程说明已分化细胞中不表达的基因仍具有表达的潜能D. 该育种方式涉及到转基因技术、胚胎移植技术【答案】C【解析】【分析】分析题图可知：图中表示基因工程技术，表示植物组织培养技术，其中表示脱分化，表示再分化，表示在胚状体外面加入人工胚乳和人工种皮制备人工种子的过程。【详解】A、图中表示基因工程技术，表示植物组织培养技术，其中表示脱分化，表示再分化，表示在胚状体外面加入人工胚乳和人工种皮制备人工种子的
40、过程，A错误；B、该育种方法为基因工程育种，其最大的优点是目的性强，B错误；C、该技术依据的原理主要是细胞的全能性，已分化的细胞仍然能发育成完整的个体，说明其中一部分不表达的基因又开始表达，C正确；D、该育种过程不涉及胚胎工程，D错误。故选C。【点睛】传统杂交育种技术往往需要6-7年，容易误认为基因工程育种与传统杂交育种相比，最大的优点是繁殖速度快，错选B。22. 现有甲、乙两种植物（均为二倍体纯合子），其中甲种植物的光合作用能力高于乙种植物，但乙种植物很适宜在盐碱地种植，相关性状均由核基因控制。若要利用甲、乙两种植物培育出高产、耐盐碱的植株，最佳的方案是A. 利用植物体细胞杂交技术获得目的植
41、株B. 将乙种植物的耐盐碱基因导入甲种植物的卵细胞中，然后进行离体培养C. 使两种植物有性杂交获得F1，再利用单倍体育种技术获得目的植株D. 诱导两种植物的花粉融合，并直接培育成幼苗【答案】A【解析】【详解】A、C.甲、乙两种植物之间存在生殖隔离，很难通过有性杂交获得F1，而利用植物体细胞杂交技术可以打破生殖隔离，进而获得目的植株，A正确，C错误；B.将乙种植物的耐盐碱基因导入甲种植物的卵细胞中，然后进行离体培养得到的是高度不育的单倍体植株，B错误；D.由两种植物的“花粉融合”后直接培育成的幼苗中不含同源染色体，后代不可育，D错误。故选A。23. “白菜甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新
42、品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜甘蓝”的杂交过程示意图。以下说法正确的是（）A. 除去细胞壁形成原生质体，可运用的酶是纤维素酶、淀粉酶和果胶酶B. 通常可诱导上述原生质体相互融合的方法是PEG和灭活的病毒诱导C. 杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁D. 愈伤组织形成“白菜甘蓝”植物体必须经过脱分化和再分化两个过程【答案】C【解析】【分析】分析题图：图示表示“白菜-甘蓝的培育过程，首先需要用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁；其次需要用物理（如电激、离心、振动）或化学（聚乙二醇）诱导原生质体融合；再采用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，包括脱分化和再分
43、化两个重要过程。【详解】A、除去细胞壁的酶有纤维素酶和果胶酶，A错误；B、诱导原生质体融合不能用灭活的病毒诱导，B错误；C、杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁，C正确；D、愈伤组织形成“白菜一甘蓝”植物体属于再分化过程，D错误。故选C。24. 下图为培育甘蔗脱毒苗的两条途径，研究发现经过程获得的幼苗脱毒效果更好。下列叙述不正确的是（ ）A. 带叶原基的芽与植物体其他组织中的病毒含量相同B. 过程的作用是使组织中的病毒在图中处理温度下部分或全部失活C. 过程、所用培养基中生长素和细胞分裂素的含量和比例不同D. 上图中脱毒苗的培育过程体现了植物细胞的全能性【答案】A【解析】植物的茎尖或根尖不
44、带病毒或病毒极少，其他部位带的病毒很多，带叶原基的芽是茎尖，A项符合题意；过程的作用是使组织中的病毒在图中处理温度下部分或全部失活，B项不符合题意；是脱分化、是再分化，两个过程所用培养基中生长素和细胞分裂素的含量和比例不同，C项不符合题意；细胞的全能性是已经分化的细胞发育成完整个体的潜能。图示过程是离体的带叶原基的芽脱分化形成愈伤组织，再分化形成幼苗，体现了植物细胞的全能性，D项不符合题意。【名师点睛】解答本题的关键有：一是看懂图、二是能利用植物组织培养的原理和条件的有关知识解题。25. 花粉植株是体细胞遗传研究和突变育种的理想材料。下面是培育四季柑桔(2N=18)花粉植株的过程示意图，有关叙
45、述错误的是A. 花粉植株培育的原理是花粉粒细胞具有全能性，其技术是植物组织培养B. 过程是细胞再分化，其根本原因是基因选择性表达C. 四种培养基均属于固体培养基，其中所含植物激素的种类和比例有差异D. 观察处于分裂中期的四季柑桔花粉植株根尖细胞，可观察到18条染色体【答案】D【解析】花粉细胞培育成单倍体植株，培育的原理是花粉粒细胞具有全能性，其技术是植物组织培养，A正确；由愈伤组织到从芽的过程是再分化，其根本原因是基因选择性表达，B正确；图中四种培养基的差异主要表现在植物激素的种类和含量，C正确；观察处于分裂中期的四季柑桔花粉，其染色体数为9条，D错误。【点睛】注意：在植物组织培养时，植物激素
46、的使用：激素使用情况结果先使用生长素,后使用细胞分裂素有利于细胞分裂,但细胞不分化先使用细胞分裂素,后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用,且比例适中促进愈伤组织的形成同时使用,且生长素用量较高有利于根的分化、抑制芽的形成同时使用,且细胞分裂素用量较高有利于芽的分化、抑制根的形成26. 下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图，没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列说法不正确的是A. 单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的B. 活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程C. 在治疗中，应先注射非活化磷酸阿
47、霉素再注射生物导弹D. 单克隆抗体特异性强，能减轻阿霉素对正常细胞的伤害【答案】C【解析】【详解】A、单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和B细胞融合形成的杂交瘤细胞合成和分泌的，A正确；B、活化的阿霉素是抑制DNA和RNA的合成的，DNA合成是经过DNA的复制，RNA的合成是转录，B正确；C、根据图形信息阿霉素的活化需要生物导弹携带的碱性磷酸酶，所以在治疗中，应先注射生物导弹再注射非活化磷酸阿霉素，但不能间隔时间太长，因为没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除，C错误；D、单克隆抗体具有特异性强，灵敏度高可大量制备的特点，根据特异性强这一特点，在该过程中是针对肿瘤细胞的，所以能减轻阿霉素对
48、正常细胞的伤害，D正确。故选C。27. 犬细小病毒(CPV)单克隆抗体(Cpv McAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制，进而杀灭幼犬体内病毒。下列相关叙述，错误的是A. 在Cpv McAb的制备过程中用到了动物细胞培养和动物细胞融合技术B. 给幼犬注射CPV后，CPV抗体检测呈阳性，说明发生了体液免疫反应C. 经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可直接生产Cpv McAbD. 对杂交细胞培养时，需要无菌无毒环境，且温度、气体环境等要适宜【答案】C【解析】【分析】由题文和选项的描述可知，该题考查学生对单克隆抗体的制备过程及动物细胞培养的相关知识的识记和理解能力。【详解】在单克隆抗体的制
49、备过程中，使用的动物细胞工程技术有动物细胞培养和动物细胞融合技术，A正确；给幼犬注射CPV后，会激发体液免疫，产生相应的抗体，因此若 CPV抗体检测呈阳性，说明发生了体液免疫反应，B正确；经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞并不都符合人们需要，还需经过克隆化培养和抗体检测，筛选出能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞，C错误；对杂交细胞培养时，需要无菌无毒环境，且温度、气体环境等要适宜，D正确。28. 下列有关核移植的叙述中，正确的是A. 卵母细胞最好选择减数第一次分裂中期的卵母细胞B. 胚胎核移植难度明显高于体细胞核移植C. 供体细胞应选择传代10代以内的细胞D. 通过体细胞核移植方法生产的克隆动
50、物是对体细胞动物进行了100%的复制【答案】C【解析】【分析】动物细胞培养过程中10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。动物胚胎分化程度低，全能性的恢复更容易，而动物体细胞分化程度高，恢复全能性十分困难。【详解】减数第二次分裂中期的卵母细胞才具备与精子受精的能力，故核移植时卵母细胞最好选择减数第二次分裂中期的卵母细胞，A错误；动物胚胎分化程度低，恢复全能性更容易，而动物体细胞分化程度高，恢复全能性十分困难，故动物体细胞核移植难度明显高于胚胎核移植，B错误；10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，故供体细胞应选择传代10代以内的细胞，C正确；生物的性状是由细胞核基因和细胞质基因共同控制的
51、，体细胞核移植方法生产的克隆动物只是将核基因传递给了子代，质基因并没有传给子代，故对体细胞动物并不是进行了100%的复制，D错误。故选C。【点睛】熟悉核移植的过程是解题的关键。29. 下面是畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，说法正确的是A. 方法、均用到的生物技术只有胚胎移植B. 方法、处理B牛和G牛所用的激素均为雌激素C. E和F的产生过程不同，前者经历了体外受精过程，后者经历了核移植过程D. 生产上要求A、B、C、D都是遗传性能和生产性能优良的个体【答案】C【解析】【详解】A、方法和方法分别是试管动物技术和核移植技术，二者均用到的主要生物技术有动物细胞培养、早期胚胎培养和胚胎移植，A
52、错误；B、方法、处理B牛和G牛所用的激素均为促性腺激素，B错误；C、E试管牛是有性生殖的产物，F克隆牛是无性生殖的产物，前者经历了体外受精过程，后者经历了核移植过程，C正确；D、A、B、C均提供细胞核，需是遗传性能和生产性能优良的个体，D受体母牛体内进行胚胎发育，具有健康体质和优良繁殖性能的特点，D错误。故选C。30. 在单克隆抗体制备中，关于杂交瘤细胞制备的叙述，正确的是A. 可利用电激等物理方法直接诱导两个细胞的融合B. 可利用细胞中染色体的数目和形态筛选出杂交瘤细胞C. 利用了细胞膜的流动性和基因重组等原理D. 用选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞可直接用于生产单克隆抗体【答案】A【解析】【
53、分析】单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与效应B细胞结合，经过选择培养基筛选后得到杂交瘤细胞，经专一抗体检测后培养能够产生特定的抗体的杂交瘤细胞即可获得单克隆抗体的技术。该技术涉及细胞融合技术和动物细胞培养技术。【详解】诱导细胞融合通常有物理法、化学法、生物法等，电激和离心是常用的物理融合法，A选项正确；杂交瘤细胞的筛选需要使用特定的筛选培养基，观察细胞染色体数目和形态只能判断细胞是否融合，B选项错误；杂交瘤细胞的制备利用了细胞膜的流动性，但不涉及基因重组，C选项错误；经选择培养基筛选出的杂交瘤细胞还需要进行克隆化培养和专一抗体检测，才能用于生产单克隆抗体，D选项错误。31. 下列对哺乳动物体内受
54、精、早期胚胎发育过程和胚胎工程的叙述，正确的是()A. 注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育B. 早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清、抗生素和激素等C. 原肠胚时期的细胞具备发育成完整个体的能力，该时期是胚胎移植的最佳时期D. 卵子释放顶体酶溶解放射冠和透明带，卵黄膜封闭作用是防止多精入卵的屏障之一【答案】A【解析】【分析】本题考查胚胎工程的相关内容，主要考察学生的识记能力、理解能力。【详解】内细胞团细胞具有发育的全能性，注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育，A项正确；动物细胞培养的培养液不需要加入激素，B项错误；桑椹胚和囊胚期的细胞具备发育成完整个体的
55、能力，该时期是胚胎移植的最佳时期，C项错误；精子释放顶体酶溶解放射冠和透明带，卵黄膜封闭作用是防止多精入卵的屏障之一，D项错误。【点睛】动物细胞培养和胚胎培养的要求基本相同，但并不完全一样，细胞培养的目的是细胞增殖，而胚胎培养除细胞增殖外，还希望细胞分化，故其培养基的成分也不同。32. 下图表示精子入卵后，发生（或引起的）一系列变化形成受精卵的过程，下列叙述错误的是（ ）A. 图中X指卵细胞膜反应，Y指卵子的减数第二次分裂B. 经图中Y过程只形成了雌原核C. 精子入卵主要指精子的头部外膜与卵细胞膜融合D. 精子入卵后精子的尾部留在外面，并在溶酶体的作用下自溶【答案】B【解析】【分析】精子入卵后
56、，精子的尾部脱落，并且原有的核膜破裂；随后，精子形成一个新的核膜，最后形成一个比原来精子核还大的核，叫做雄原核。与此同时，精子如卵后被激活的卵子完成减数第二次分裂，排出第二极体后，形成雌原核，雌原核一般略小于雄原核。【详解】AB、透明带反应形成第一道屏障，卵细胞膜反应形成第二道屏障，在受精过程中卵子完成减数第二次分裂，排出第二极体，形成雌原核，A正确，B错误；C、精子入卵主要指精子的头部外膜与卵细胞膜融合，C正确；D、尾部留在外面并在溶酶体的作用下自溶，D正确。故选B。33. 下列哪些过程发生在受精过程中精子发生顶体反应释放顶体酶顶体酶的作用使精子穿过放射冠、透明带、卵细胞膜卵子完成减数第一次
57、分裂精子的核变成雄原核、卵子的核成为雌原核防止多精入卵的透明带反应A. B. C. D. 【答案】B【解析】受精过程中，获能后的精子与卵子相遇时，首先发生顶体反应，顶体内的酶释放出来，故正确；顶体释放的顶体酶可溶解放射冠卵丘细胞之间的物质和透明带，形成精子通过的通道；精子与卵黄膜结合是由于卵细胞膜表面有大量微绒毛，当精子与卵细胞膜接触时，立即被微绒毛抱合，随后，精子外膜和卵细胞膜相互融合，这里不再是顶体酶的作用，故错误；精子入卵后被激活的卵子完成减数第二次分裂，故错误；精子入卵后，尾部脱落，原有核膜破裂，随后形成新的核膜，形成一个比原来精子核还大的核，叫做雄原核；减数第二次分裂后形成的成熟卵细
58、胞的核叫做雌原核，故正确；透明带反应是在精子触及卵细胞膜的瞬间，产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应，防止多个精子进入透明带，是引起多个精子入卵的第一道屏障，故正确；综上所述，因为正确，错误，所以，本题正确答案为B。【点睛】顶体酶的作用：溶解放射冠卵丘细胞之间的物质和透明带，形成精子通过的通道；尤其注意不能溶解卵细胞膜。34. 下图是胚胎发育过程中某阶段示意图，下列有关叙述错误的是（ ）A. 图中将发育为胎膜和胎盘等结构B. 图中可发育成胎儿的各种组织C. 高等哺乳动物细胞分化开始于桑椹期，终止于生命结束D. 胚胎从中伸展出来的过程叫做孵化【答案】C【解析】【分析】【详解】A、图中是滋养层，
59、将发育为胎膜和胎盘等结构，A正确；B、图中为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，B正确；C、高等哺乳动物细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束，C错误；D、胚胎从透明带中伸展出来的过程叫做孵化，D正确。故选C【点睛】35. 关于体内受精的顺序，正确的是第一次卵裂开始释放第二极体顶体反应穿越透明带雌、雄原核的形成核膜消失，两个原核融合A. B. C. D. 【答案】D【解析】【分析】1、受精前的准备阶段：（1）准备阶段1：精子获能。刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力。（2）准备阶段2：卵子的准备。动物排出的可能是初级卵母细胞，也可能是次级
60、卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。2、受精过程：顶体反应：精子释放顶体酶溶解卵丘细胞之间的物质，穿越放射冠。透明带反应：顶体酶可将透明带溶出孔道，精子穿入，在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应（它是防止多精子入卵受精的第一道屏障）；卵黄膜的封闭作用：精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程（它是防止多精子入卵受精的第二道屏障）；精子尾部脱落，原有核膜破裂形成雄原核，同时卵子完成减二分裂，形成雌原核（注意：受精标志是第二极体的形成；受精完成标志是雌雄原核融合成合子）。【详解】体内受精的具体过程为：
61、顶体反应穿越放射冠穿越透明带（透明带反应）卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体雌、雄原核的形成核膜消失，雌、雄原核融合形成合子第一次卵裂开始。综上分析，D正确，ABC错误。故选D。【点睛】本题比较基础，考查受精作用的相关知识，只要考生识记受精作用的具体过程即可正确答题，属于考纲识记层次的考查。36. 下面是科学家设计的快速繁殖良种奶牛的两种方法，下列叙述错误的是A. 在试管牛E和克隆牛G的培育过程中都必须用到胚胎移植技术B. 为了获得更多的卵细胞需要用促性腺激素处理良种母牛BC. 良种母牛B与良种公牛C杂交后代的遗传信息与克隆牛G的相同D. 要培育高产奶率的转基因
62、牛，则目的基因的受体细胞一般是受精卵【答案】C【解析】【分析】试管牛是有性生殖的结果，其遗传信息来自双亲；克隆牛G属于无性生殖，其主要遗传信息来自提供细胞核的个体。【详解】A、在试管牛和克隆牛的培育过程中都必须用到动物细胞培育技术和胚胎移植技术，正确。B、培育试管牛要对良种母牛进行超数排卵处理（使用促性腺激素），正确。C、克隆牛G属于无性生殖，其主要遗传信息来自提供细胞核的个体：公牛C，错误。D、培育高产奶牛的转基因牛，属于基因工程范畴，一般转基因动物的目的基因的受体细胞是受精卵，正确。故选C。【点睛】考生要对繁殖良种奶牛的两种方法的路线图加以区分，试管牛属于有性生殖的结果，克隆牛G属于无性生
63、殖。37. 下图为某二倍体哺乳动物卵子及早期胚胎的形成过程示意图。下列叙述错误的是（ ）A. 下丘脑、垂体分泌的相关的激素参与该哺乳动物次级卵母细胞的形成B. 受精作用促进次级卵母细胞完成减数第二次分裂C. 细胞的卵细胞膜和透明带之间出现两个极体时，说明卵子已经完成受精D. 个体性成熟后在排卵期，在相关激素的作用下完成细胞细胞【答案】D【解析】【分析】结合题意分析图解可知：图中细胞为卵原细胞，细胞为经过复制的初级卵母细胞，细胞可表示次级卵母细胞，细胞是经过受精作用形成的受精卵，受精卵进行的是有丝分裂。【详解】A、据图可知，减数第一次分裂完成需要促性腺激素处理，而下丘脑合成的促性腺激素释放激素作
64、用于垂体，使得垂体分泌促性腺激素，A正确；B、图中看出次级卵母细胞在精子的作用下才能完成减数第二次分裂，产生成熟的卵细胞，从而形成受精卵，B正确；C、在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体，说明卵细胞已经完成了受精，这是判断卵细胞是否受精的重要标志，C正确；D、细胞细胞表示卵原细胞的增殖和形成初级卵母细胞，是在胚胎性别分化之后就开始，D错误。故选D。38. 梅花鹿胚胎移植试验的主要流程： 供体超数排卵配种胚胎收集_胚胎移植子代梅花鹿下列相关叙述正确的是（）A. 过程需要是注射有关激素，目的是获得更多的卵原细胞并完成减数分裂B. 过程是以哺乳动物早期胚胎与子宫中建立正常联系为前提C. 过程是“对胚
65、胎进行质量检查”，可移植的胚胎应发育到囊胚或原肠胚D. 过程成功的关键是移植的胚胎能与子宫建立正常联系【答案】D【解析】【分析】【详解】A、过程需要注射促性腺激素，促进其超数排卵，但所获得的卵原细胞还未完成减数分裂，A错误；B、哺乳动物早期胚胎在输卵管或子宫中处于游离状态，这为胚胎的收集提供了可能，B错误；C、过程是“对胚胎进行质量检查”，可移植的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚，C错误；D、过程成功的关键是移植的胚胎能与子宫建立正常联系，D正确。故选D【点睛】39. 下图是利用胚胎工程技术培育优质奶牛的主要步骤。下列叙述正确的是 A. A所表示的细胞不一定是受精卵细胞B. 图中a过程包括卵裂、囊胚和
66、原肠胚等阶段C. 应把移植到处于发情状态的母牛的输卵管中D. 图示过程属于有性生殖【答案】A【解析】【分析】此题考查的是胚胎分割和胚胎移植。胚胎移植不会改变胚胎的遗传物质，但可以改变胚胎发育的场所。胚胎移植可以在胚胎发育的桑椹胚时期或囊胚时期。和两个胚胎的遗传物质是相同的，因为两个胚胎来自同一个受精卵。胚胎移植时，供体和受体的生理状况必须是相同的。【详解】A表示的细胞不一定是受精卵分裂分化成的囊胚阶段的胚胎，也可以是核移植得到的重组细胞分裂分化形成的囊胚阶段的胚胎，故A正确；图中a过程包括卵裂和囊胚，不包括原肠胚，故B错误；胚胎移植时应移植到发情状态相同的母牛的子宫内进行着床发育，故C错误；图
67、示过程不一定属于有性生殖，有可能是无性繁殖，如利用克隆技术得到A所示细胞，故D错误；综上所述，选A项。40. 以下对于胚胎分割的描述，正确的有胚胎分割移植可产生基因型完全相同的新个体内细胞团一般到囊胚才出现，胚胎分割时最好将其均等分割，移植成功率才高只能对囊胚期细胞进行分割不仅内细胞团要均等分割，滋养层也要均等分割，否则不易成功胚胎分割移植属于有性生殖胚胎分割次数越多，产生的新个体也越多A. 一项B. 两项C. 三项D. 四项【答案】B【解析】胎分割移植由于不改变细胞内的遗传物质，所以可产生基因型完全相同的新个体，正确；内细胞团一般到囊胚才出现，胚胎分割时最好将其均等分割，移植成功率才高，正确
68、；对桑葚期和囊胚期细胞都可以进行胚胎分割，错误；不仅内细胞团要均等分割，滋养层不发育成个体的组织器官，所以不要求均等分割，错误；胚胎分割移植属于无性生殖，错误；胚胎分割次数越多，得到的胚胎发育成功率越低，错误；综上分析，正确选项有两项，选B。41. 下列有关高等哺乳动物胚胎工程的叙述，错误的是（ ）A. 早期胚胎培养通常需要加入动物血清B. 为了获得更多的卵母细胞，需对受体动物进行同期发情处理C. 从动物体内获取的精子不能直接与卵母细胞结合完成受精过程D. 为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎【答案】B【解析】早期胚胎培养通常需要加入动物血清，以补充合成培养基缺乏的物质，A正
69、确；为了获得更多的卵母细胞，对供体母畜注射促性腺激素可促其超数排卵，B错误；从动物体内获取的精子经过获能处理后才能与卵子结合完成受精作用，C正确；为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵多胎，该技术应该选择发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚进行，D正确。42. 科学家将4个关键基因移植入已分化的肌肉细胞中并表达，使这个细胞成为多能干细胞(iPS细胞)。下图为该实验示意图。下列有关叙述正确的是()A. 应用该技术可提高器官移植的成功率B. iPS细胞所带遗传信息与肌肉细胞相同C. 关键基因表达使细胞功能趋向专门化，降低了细胞的分化程度D. 图示过程体现了iPS细胞的全能性【答案】A【解析
70、】用iPS细胞诱导分化成需要的器官后进行自体移植，没有免疫排斥反应，故提高了器官移植的成功率，A正确；iPS细胞中多了4个关键基因，故iPS细胞所带遗传信息与肌肉细胞不同，B错误；关键基因表达使细胞功能趋向专门化，增加了细胞的分化程度，C错误；图示过程只是分化形成各种细胞，没有形成个体，故没有体现iPS细胞的全能性，D错误；故选A。43. 下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是A. 卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加B. 囊胚期的细胞出现了细胞分化,但遗传物质未发生改变C. 胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割D. 受精过程中防止多精入卵的两道屏障分别是顶体反应和卵细胞膜
71、反应【答案】B【解析】【分析】受精作用过程中，防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵黄膜的封闭作用；顶体反应是指精子获能后，与卵相遇时，顶体开始产生的一系列改变。本题着重考查了卵裂期特点及胚胎干细胞的特点和来源，识记相关知识即可解答。卵裂即为受精卵的有丝分裂，该过程中细胞数目增多、DNA总量增多，但是细胞总体积基本不变或略有减小，并且有机物总量减少。【详解】卵裂期细胞不断分裂，故细胞数目增多，但有机物逐渐消耗而减少，A错误；囊胚期细胞分化的实质是基因的选择性表达，而分化过程中遗传物质未发生改变，B正确；胚胎分割时需将囊胚期的内细胞团均等分割，C错误；受精时防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵
72、黄膜的封闭作用，D错误；故选B。【点睛】本题考查动物受精作用、胚胎发育以及胚胎干细胞等的有关知识，意在考查考生的识记能力和理解能力，考生平时要能够积累常考易错点，难度不大。44. 杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点,被称为“钻石级”肉用绵羊。 科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示,相关叙述正确的是A. 为了获得更多的卵母细胞,需用雌激素对雌性杜泊羊进行处理B. 从卵巢中采集的卵母细胞可直接与获能的精子进行体外受精C. 为避免代孕绵羊对植入胚胎产生排斥反应,应注射免疫抑制剂D. 为了进一步扩大繁殖规模,可通过胚胎分割技术获得同卵双胎【答案】D【解析】【分析】阅读题干可知本题涉及的
73、知识点是胚胎工程，明确知识点，梳理相关知识，分析题图，根据选项描述结合基础知识做出判断。【详解】A、超数排卵用促性腺激素而不是雌激素，故A选项错误；B、根据采集部位而定，如果是从输卵管采集的卵细胞，已发育成熟，可直接与获能的精子在体外受精；如果是从卵巢是采集的卵细胞，未发育成熟，都要经过体外人工培养成熟后才能与获能的精子受精，故B选项错误；C、受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，不需要注射免疫抑制剂，故C选项错误；D、为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎或多胎，故D选项正确。故选D。45. 大田种植转基因抗虫棉的同时，间隔种植少量非转基因的棉花等其他农作物，供棉
74、铃虫取食。这种做法的主要目的是A. 维持棉田物种的多样性B. 减缓棉铃虫抗性基因频率增加的速度C. 使食虫鸟有虫可食D. 维持棉田生态系统中的能量流动【答案】B【解析】【分析】转基因技术在农业生产上已经应用，转基因抗虫棉可以有效地防御棉铃虫，减少农药的使用，但也会出现一些环境或生态问题。例如棉铃虫抗性基因频率的增加速度加快等问题。【详解】农田种植植物的目的是获得产量高的农作物，人工种植，人工管理，不需要题干抗虫棉与非转基因棉花间隔种植维持棉田物种多样性，A错误。非转基因棉花与抗虫棉间隔种植，供棉铃虫取食，主要目的就是减缓棉铃虫抗性基因频率增加的速度，缓解棉铃虫抗性更强的新品种出现，不是为了获得
75、更多的食虫鸟，B正确。C错误。棉田生态系统应该尽可能的使能量流入到对人类有益的棉花中去，减少能量的损耗，避免棉铃虫摄食，D错误。【点睛】转基因技术在抗虫方面的应用广泛，把需要的作物基因组中转入抗虫害的基因，这种作物就具有抗虫害的功能。一方面因减少了虫害而增加了产量，另一方面减少了有毒农药的使用量，从而降低了成本，降低了农药残留。但也会出现一些转基因风险，例如加快害虫抗性的进化速度，因此要客观看待转基因技术，有效避免一些危害。46. 人们对转基因生物安全性的关注，随着转基因成果的不断涌现而与日俱增。下列叙述中，不正确的是（ ）A. 外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，有可能会出现意想不到的
76、后果B. 应该严格地选择转基因植物的目的基因，以避免产生对人类有害的物质C. 一旦发现转基因生物出现了安全性问题，应该马上停止实验，并销毁重组生物D. 转基因生物不会对生物多样性构成威胁，也不会影响生态系统的稳定性【答案】D【解析】【详解】A、在导入外源基因时，外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，可能会出现意想不到的后果，所以一定要慎重，A正确。B、应严格的选择目的基因导入植物，确保表达产物无毒、无害，以避免产生对人类有害的物质，B正确。C、一旦发现转基因生物出现了安全性问题，就必须停止并销毁重组生物，C正确。D、转基因生物可能会对生物多样性构成威胁，进而影响生态系统的稳定性，D错误。故
77、选D。47. 下列关于转基因生物安全性的叙述，错误的是A. 种植转基因作物应与传统农业种植区隔离B. 转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中C. 种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性D. 转基因植物的目的基因可能转入感染转基因植物的微生物【答案】B【解析】【分析】本题考查生物技术安全这一知识，主要考察学生的识记能力、理解能力，解答本题的关键是对于转基因作物对食物、物种、生态等方面的安全性的理解。【详解】转基因作物可能会造成基因污染，故种植的转基因作物应与传统农业种植区隔离，A正确；动物取食转基因作物后，要经过消化吸收才进入身体，目的基因不可能直接进入动物细胞中，
78、B错误；转基因植物可能与野生植物发生杂交而出现基因交流，影响野生植物的遗传多样性，C正确；目的基因被微生物摄入细胞内后，可能进入这些微生物中，D正确。【点睛】转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。48. 下列有关生物技术安全性和伦理问题的观点，不合理的是（）A. 对于转基因技术，我们应该趋利避害，理性看待B. 我国禁止生殖性克隆和治疗性克隆C. 我国不发展、不生产、不储存生物武器，并反对其扩散D. 对于基因检测应该保护个人遗传信息隐私权【答案】B【解析】【分析】1、转基因生物的安全性问题：食物安全
79、（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。2、治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。3、生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的，即用于产生人类个体。4、中国政府：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆。【详解】A、对于转基因技术，我们应该趋利避害，理性看待，A正确；B、中国政府的态度是禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆，B错误；C、中国在任何情况下不发展、不生产
80、、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C正确；D、对于基因检测应该保护个人遗传信息的隐私权，D正确。故选B。【点睛】本题考查现代生物工程技术应用安全性及关注生物技术的伦理问题，意在考查学生识记和理解能力。49. 美国科学家在研究生长在墨西哥某地的野生玉米后发现，这种玉米含有包括苏云金杆菌（一种产生抗虫毒蛋白的细胞）基因在内的转基因作物的基因，由此可见：转基因作物的基因可传播到野生植物中 转基因作物可对天然植物的遗传多样性构成威胁 为防止基因污染，应当禁止转基因作物的研究 转基因作物的基因甚至可以传播到其它物种中造成基因污染。其中正确的说法是（ ）A. B. C. D. 【答案】
81、D【解析】【分析】根据题意，“野生玉米含有包括苏云金杆菌基因在内的转基因作物的基因”，可知转基因植物的基因传播到野生植物中，这样会对植物遗传多样性构成威胁。【详解】根据题意可知，转基因作物的基因可传播到野生植物中，正确； 转基因植物的基因能通过花粉传播到野生植物中，这样会对植物遗传多样性构成威胁，正确； 为防止基因污染，应当采取措施防止基因污染，如将目的基因导入细胞质基因中，而不是禁止转基因作物的研究，错误； 转基因作物的基因甚至可以传播到其它物种中造成基因污染，正确；据此，符合题意的有，D正确。50. 下列关于基因工程安全性的说法中不正确的是A. 转基因作物的基因可通过花粉扩散到它的近亲植物
82、上，可能出现对农业不利的“超级杂草”B. 杂草、害虫从它的近亲获得抗性基因，可能破坏生态系统的稳定性C. 转基因必须在人为控制下才能完成，自然条件下基因污染是不增殖和不扩散的D. 转基因食品转入的新基因产生的异种蛋白有可能引起人食物过敏【答案】C【解析】【分析】转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。生物安全：转基因植物扩散到种植区外变成野生种或杂草，转基因植物竞争能力强，可能成为“入侵的外来物种”，转基因植物的外源基因与细菌或病毒杂交，重组出有害的病原体，可能使杂草成为有抗除草剂基因的“超级杂草”
83、。【详解】转基因作物可通过花粉扩散到它的近亲作物上，可能出现对农业不利的“超级植物”，A正确；杂草、害虫从它的近亲获得抗性基因，可能破坏生态系统的稳定性，B正确；转基因在自然条件下可增殖和扩散，形成基因污染，C错误；转基因食品转入的新基因产生的异种蛋白有可能引起人食物过敏，D正确。【点睛】本题考查对转基因生物的安全性问题的认识，深入认识转基因生物的安全性问题是正确解答该题的关键。51. 据人民网报道，“一对名为露露和娜娜的基因编辑婴儿于2018年11月在中国健康诞生。这对双胞胎的一个基因经过修改，使她们出生后即能天然抵抗艾滋病。这是世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿”。下列有关说法正确的是（）A
84、. 基因编辑制造人类的行为是符合伦理道德的B. 基因编辑技术，可改变人类进化的速度和方向，有利于人类的进化C. 通过基因编辑技术改变了人类的遗传物质，使人类进化成新物种D. 基因编辑技术可用于疾病预防领域研究，但不能用于编辑婴儿【答案】D【解析】【分析】一对名为露露和娜娜的基因编辑婴儿于2018年11月在中国健康诞生。这对双胞胎的一个基因经过敲除，使她们出生后即能天然抵抗艾滋病。这是世界首例免疫艾滋病的基因婴儿，也意味着中国在基因编辑技术用于疾病预防领域实现历史性突破。但这项研究也引起了争议，具体表现在：伦理上的担忧；基因编辑技术存在潜在脱靶效应；基因编辑技术敲除基因后对其他基因的表达有可能存
85、在影响。【详解】基因编辑制造人类的行为不符合伦理道德，A错误；基因编辑技术，只是对个别人个别基因进行编辑，不一定改变人类进化的速度和方向，B错误；基因编辑技术改变了人类的遗传物质，但并没有出现生殖隔离，即没有形成新物种，C错误；基因编辑技术可用于疾病预防领域研究，但不能用于编辑婴儿，D正确；故选D。【点睛】本题主要考查基因工程的安全性和伦理问题的分析，此题容易混淆，基本知识必须扎实，易混知识必须区分清楚。52. 2003年7月，我国卫生部在体外受精胚胎移植及其衍生技术规范中规定，“实施体外受精胚胎移植及其衍生技术必须获得卫生部的批准证书”。下列对这句话的理解中，正确的是A. 我国不允许进行植入
86、前胚胎遗传学诊断B. 我国不赞成进行试管婴儿C. 进行试管婴儿和设计试管婴儿必须得到国家批准D. 我国不支持试管婴儿和设计试管婴儿研究【答案】C【解析】【分析】【详解】有些遗传病与性别有关，如红绿色盲患者和正常男人结婚，所生女孩均正常，所生男孩均色盲，为保证孩子健康，就需要设计这对夫妇的孩子为女孩，而“实施体外受精胚胎移植及其衍生技术必须获得卫生部的批准证书”是指进行试管婴儿和设计试管婴儿必须得到国家批准， C项正确。故选C【点睛】注意：试管婴儿和设计试管婴儿不是同一概念，试管婴儿是为解决夫妇不孕不育而进行的体外受精及胚胎移植技术；而设计试管婴儿是从某种医学角度考虑，让夫妇产生符合预期目的的孩
87、子，在孩子出生前，一般会进行医学诊断。53. 下列生物通常不用作生物武器的是( )A. 炭疽杆菌B. 酵母菌C. 天花病毒D. 肉毒杆菌【答案】B【解析】【分析】【详解】生物武器的种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等；这些微生物一般有一个共同特点：营寄生，有致病性，在上述四种生物中酵母菌不是寄生生物，常用在发酵工业上，它也不会使人畜患病。故选B【点睛】54. 图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoR、BamH、Hind的酶切位点。下列有关叙述错误的是( )A. 在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则
88、可选EcoRB. 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoR酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoR酶切点有1个C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamH和Hind两种限制酶同时处理D. 一个图1所示的质粒分子经EcoR切割后，含有2个游离的磷酸基团【答案】B【解析】目的基因两侧都有，且质粒也有的限制酶是EcoR，所以在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，可选EcoR，A正确；如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoR酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此
89、重组DNA中EcoR酶切点有2个，B错误；为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamH和Hind 两种限制酶同时处理，C正确；一个图1所示的质粒分子经EcoR切割后，产生两个黏性末端，含有2个游离的磷酸基团，D正确。55. 某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp)，先用限制性核酸内切酶a完全切割，再把得到的产物用限制性核酸内切酶b完全切割，得到的DNA片段大小如下表。限制性核酸内切酶a和b的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关叙述错误的是a酶切制产物(bp)b酶再次切割产物(bp)2100；1400；1000；5001900；200；800；600；1000；5
90、00A. a酶与b酶切断的化学键相同B. 该DNA分子中a酶能识别的碱基序列有3个C. 仅用b酶切割该DNA分子至少可得到三种DNA片段D. 限制性核酸内切酶a和b切出的DNA片段不能相互连接【答案】D【解析】【分析】本题结合图表信息，考查学生对限制性核酸内切酶的功能等相关知识的识记和理解能力，意在考查学生获取图示信息的能力、分析和判断能力。【详解】a酶与b酶切断的化学键相同，都是磷酸二酯键，A正确；a酶把含有5000个碱基对（bp）的线性DNA分子切成4段，说明该DNA分子上有3个a酶能识别的碱基序列，B正确；b酶把含有2100个bp的DNA片段切成大小分别为1900个bp和200个bp的两
91、个片段，把含有1400个bp的DNA片段切成大小分别为800个bp和600个bp的两个片段，说明该DNA分子上至少有2个b酶能识别的碱基序列，因此仅用b酶切割该DNA分子至少可得到三种DNA片段，C正确；分析图示可知：限制性核酸内切酶a和b切割后产生的DNA片段的黏性末端相同，它们之间能相互连接，D错误。故选D。【点睛】以图示呈现的限制酶a和b 的识别序列和切割位点、表中呈现的DNA片段的种类及其大小等信息为切入点，明辨该线性DNA分子上含有的酶a和b 的识别序列和切割位点的数目，据此分析各选项（下图为分析得出限制酶a和b在含有5000个bp的线性DNA分子上分布的一种情况）。56. 下图甲、
92、乙、丙分别是目的基因、质粒载体、重组DNA（重组质粒）的三个示意图，限制酶有Bgl、EcoR和Sau3A。要获得理想的可表达目的基因的重组DNA，最佳的限制酶组合方式是（）A. 用EcoR切割目的基因和质粒载体B. 用Bgl和EcoR切割目的基因和质粒载体C. 用Bgl和Sau3A切割目基因和质粒载体D. 用EcoR和Sau3A切割目的基因和质粒载体【答案】D【解析】【分析】本题以图文结合为情境，考查学生对生基因工程的基本操作程序的相关知识的识记和理解能力，以及识图分析能力。【详解】依题意并分析图示可知：只有用EcoR和Sau3A切割目的基因和质粒载体，在构建的重组DNA（重组质粒）中，RNA
93、聚合酶在插入目的基因上的移动方向才与图丙相同，A、B、C均错误，D正确。57. 如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoR、BamH的酶切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcoR、BamH的酶切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是（ ）A. 将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoR酶切，在DNA连接酶作用下，生成由两个DNA片段之间连接形成的产物有两种B. DNA连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来形成重组质粒，该过程形成两个磷酸二酯键C. 为了防止目的基因反向粘连和质粒自身环化，酶切时可选用的酶是EcoR和BamHD. 能在
94、含青霉素的培养基中生长的受体细胞表明该目的基因已成功导入该细胞【答案】C【解析】【分析】基因工程中，构建基因表达载体选择限制酶的种类时，要保证所选的限制酶能切割质粒和获取目的基因，又要保证使用DNA连接酶连接时，既能让质粒与目的基因相互连接形成重组质粒，又能有效避免质粒自身环化或目的基因自身环化；本题中若单独使用EcoR或BamH处理，虽然都能保证质粒与目的基因相互连接形成重组质粒，但都不能有效避免质粒自身环化或目的基因自身环化，因此要同时满足上述两个条件，应同时使用 EcoR和BamH处理。【详解】A、根据题意，目的基因的两端有EcoR、BamH的酶切位点，将含有目的基因的DNA用EcoR酶
95、切，会得到含目的基因的DNA片段和不含目的基因的DNA片段；根据质粒的简图可知，将质粒用EcoR酶切，会得到与质粒周长等长的链状DNA；因此将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoR酶切，在DNA连接酶作用下，可生成含目的基因的原DNA片段两个之间进行连接、由含目的基因的DNA片段与质粒周长等长的链状DNA相互连接形成的链状DNA、二倍于原质粒周长的环状DNA三种类型，A错误；B、DNA连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来形成一个重组质粒，该过程形成四个磷酸二酯键，B错误；C、EcoR和BamH的识别序列不同，获取目的基因和切割质粒时，同时选用EcoR和BamH切割，目的基因两端形成的
96、末端不同，切割开的质粒两端形成的末端不同，再用DNA连接酶连接，可以防止目的基因反向连接和质粒自身环化，C正确；D、题图显示，在构建基因表达载体的过程中质粒中的青霉素抗性基因和四环素抗性基因都不会被破坏，因此能在含青霉素和四环素的培养基中生长的受体细胞不能表明目的基因已成功导入该细胞，D错误。故选C。【点睛】本题结合图形考查基因表达载体的构建，要求考生理解构建基因表达载体的方法，明确构建的基因表达载体应含有哪些部件及这些部件的功能，此题难度稍大。58. 科学家创造了“基因敲除”的方式：用外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中，使某一个基因被取代或破坏而失活，形成杂合体细胞。然后将“修饰
97、”后的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎，生成嵌合体小鼠。科学家已经利用上述技术成功地把人类囊肿性纤维化病的致病基因移植到小鼠身上，培育出了患囊肿性纤维化病的小鼠。下列有关叙述错误的是A. 这种嵌合体小鼠长大后体内存在外源基因，而且可能会遗传给后代B. 在基因敲除中需要用到限制性核酸内切酶、DNA连接酶等C. 通过“基因敲除”方式导致的变异类型属于基因突变D. 基因敲除技术有利于人类对某些遗传因素引发的疾病进行研究【答案】C【解析】【分析】根据题干信息，“基因敲除”技术用外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中，实质采用基因工程的技术，原理是基因重组，涉及到限制酶和DNA连接酶。【详解】这种嵌
98、合体小鼠长大后，体内存在人类囊肿性纤维化病的致病基因，属于杂合体，可能会遗传给后代， A正确；根据题干信息“用外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中”，则需要限制酶和DNA连接酶， B正确；依题干信息可知，“基因敲除”实质上是用外源基因取代或破坏DNA同源序列中的某一个基因，导致其失活，属于基因重组，C错误；“基因敲除”技术成功的培育出了患囊肿性纤维化病的小鼠，可作为实验材料利于人类对遗传病进行研究，D正确。【点睛】本题关键在于围绕“用外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中，使某一个基因被取代或破坏而失活”这一信息和解题的切入点进行发散思维，结合所学基因工程的知识展开联想。在此
99、基础上，结合题意分析每一选项，进行知识的整合和迁移。59. 为使玉米获得抗除草剂性状，需进行如图所示的操作。报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。下列叙述不正确的 （ ）A. 筛选1需要用氨苄青霉素培养基筛选出成功导入表达载体的农杆菌B. 筛选2需要用无色物质K处理愈伤组织并筛选出呈现蓝色的组织C. 报告基因在玉米的愈伤组织和农杆菌细胞中均能正确表达D. 诱导幼胚脱分化形成愈伤组织的培养基需添加植物激素【答案】C【解析】【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术
100、扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性
101、鉴定等。【详解】A、据图分析可知，质粒上含有氨苄青霉素抗性基因，可以作为标记基因，因此筛选1需要用氨苄青霉素培养基筛选出成功导入表达载体的农杆菌，A正确；B、根据提供信息可知，报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色，因此筛选2需要用无色物质K处理愈伤组织并筛选出呈现蓝色的组织，B正确；C、由于基因是选择性表达的，因此报告基因在玉米的愈伤组织和农杆菌细胞中不一定都能正确表达，C错误；D、植物组织培养过程包括脱分化和再分化过程，两个过程都需要加入植物激素，D正确。故选C。60. 下图1列举了几种限制酶识别序列及其切割位点（箭头表示相关酶的切割位点）。下图 2是酶切后产生的几种末端。下列说法正确的是
102、A. BamH切割的是磷酸二酯键， Alu切割的是氢键B. 能被Sau3A识别的序列，一定也能被BamH识别C. DNA连接酶能连接、，也能连接、D. EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶都能连接、【答案】C【解析】【分析】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及具体的操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合题干信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查【详解】BamH与Alu切割的均是磷酸二酯键，A错误；BamH切割，Sau3A切割，故BamH能切割的碱基序列，Sau3A一定能切割，但是Sau3A能切割的序列，BamH不一定能切割，B错误；、的粘性末端相同，、的黏性末
103、端也相同，因此DNA连接酶能连接、，也能连接、，C正确；EcoliDNA连接酶是从大肠杆菌中获得的DNA连接酶，只能连接粘性末端，T4DNA连接酶既可以连接粘性末端也可以连接平末端，而图中、属于平末端，只能用T4DNA连接酶连接，D错误。二、非选择题（每空1分，共40分，请将答案填写在答题纸相应区域）61. 2015年,屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获奖。工业上青蒿素一般从青蒿植株中提取,产量低,价格高。基因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路。科学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗后,偶然发现一株高产植株。通过基因测序发现该高产植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突
104、变。(1)提取了高产植株的全部DNA后,要想快速大量获得该突变基因可以采用_技术,该技术的原理是_。(2)如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段,用该双链cDNA进行PCR扩增,进行了30个循环后,理论上可以产生约为_个DNA分子,该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫做青蒿的_,获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列_(填“相同”或“不同”)。(3)将获得的突变基因导入普通青蒿之前,先构建基因表达载体,图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答:用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SamI切割,原因是_,构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特
105、殊的启动子,启动子是_识别结合的位点。(4)检测目的基因是否表达出相应蛋白质,应采取_技术。目的基因导入组织细胞后,通过_技术培育出青蒿幼苗。【答案】 (1). PCR (2). DNA复制 (3). 230 (4). cDNA文库(或部分基因文库) (5). 不同 (6). Sma会破坏质粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因 (7). RNA聚合酶 (8). 抗原抗体杂交 (9). 植物组织培养【解析】【分析】1、PCR技术扩增目的基因的原理：DNA双链复制；过程：第一步：加热至9095DNA解链；第二步：冷却到5560，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至7075，热稳定DNA聚合酶从引
106、物起始互补链的合成。2、cDNA文库和基因文库的比较表：文库类型cDNA基因组文库文库大小小大基因中启动子无有基因中内含子无有基因多少某种生物的部分基因某种生物的全部基因物种间的基因交流可以部分基因可以【详解】（1）PCR技术扩增目的基因的原理为DNA双链复制。（2）由于PCR技术利用的是DNA双链复制的原理，因此用该双链cDNA进行PCR扩增，进行了30个循环后，理论上可以产生约为230个DNA分子；又由于该基因库是由青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段，因此只包含某种生物的部分基因，因此该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫做青蒿的cDNA文库（或部分基因文库
107、）通过逆转录得到的目的基因中缺少基因结构中的非编码区以及编码区的内含子，因此获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列不同。（3）分析图2可知，目的基因和抗生素抗性基因中含有Sma限制酶的切割位点，因此用Sma切割图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，Sma会破坏质粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因。构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子，启动子是RNA聚合酶识别结合位点。（4）检测目的基因是否表达出相应蛋白质，应采取抗原抗体杂交技术目的基因导入组织细胞后，通过植物组织培养技术培育出青蒿幼苗。【点睛】关键点：一是PCR技术的原理以及过程；二是选择限制酶的要求；三是目的基因以及表达出的检
108、测方法。62. 类风湿性关节炎(RA)是一种自身免疫病，致残性强。研究表明，该病的病理改变与肿瘤坏死因子-(TNF-a)密切相关，而一种人鼠嵌合的抗TNF-a单克隆抗体能有效治疗RA。下图为该单克隆抗体制备过程示意图。(1)_技术是单克隆抗体技术的基础，该过程中需要的气体条件是_。(2)图中的抗原A是_，常用的促融剂是_。图中“( )和抗体检测”，括号内应填_。(3)细胞融合完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有_。体系中出现多种类型细胞的原因是_。(4)单克隆抗体主要的用途有：_(至少答出两点)。【答案】 (1). 动物细胞培养 (2). 95%空气和5%CO2 (3)
109、. 肿瘤坏死因子-a(TNF-a) (4). 聚乙二醇(PEG) (5). 克隆化培养 (6). 骨髓瘤细胞自身融合细胞、淋巴细胞自身融合细胞 (7). 细胞融合是随机的,且融合率达不到100% (8). 作为诊断试剂、用于治疗疾病、用于运载药物【解析】【分析】据图分析，单抗制备过程：将特定的抗原注射小鼠，筛选出产生抗体的B淋巴细胞；诱导细胞融合；筛选出杂交瘤细胞：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞，转移到HAT培养基中培养，未融合的细胞死亡，而杂交瘤细胞存活；获得能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。【详解】(1) 动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础，是单克隆抗体技术的基础。该过程中需要的气体条件
110、是95%空气和5%CO2，以保证细胞代谢所必需的氧气和培养液的pH。(2) 要制备抗TNF-a单克隆抗体需要给小鼠注射肿瘤坏死因子-a(TNF-a)。常用物理或化学方法促融，最常用的化学促融剂是聚乙二醇(PEG)。在抗体检测之前需要进行克隆化培养，以增加杂交瘤细胞数量。(3) 细胞融合是随机的,且融合率达不到100%，所以细胞融合完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有骨髓瘤细胞自身融合细胞、淋巴细胞自身融合细胞。(4)单克隆抗体最广泛的用途是作为诊断试剂；也可用于治疗疾病、用于运载药物，主要是用于癌症治疗、也有少量是是用于其他治疗的。【点睛】本题以单克隆抗体制备流程阶段示
111、意图为载体，考查单克隆抗体制备的过程，动物细胞培养的条件，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断，难度不大。63. 马铃薯植株在长期栽培过程中容易遭受病毒的侵染，从而导致严重减产。科学家通过基因工程技术将抗病毒的PVX基因成功导入马铃薯细胞中，培育出抗病毒的马铃薯植株。回答下列问题（1）以相关mRNA为材料在_酶的作用下，可以获得抗病毒的PVX基因。将获得的PVX基因在体外进行扩增，可以采用_（填中文名称），该技术中所利用的特殊酶是_。（2）若要使抗病毒的PVX基因在受体细胞中复制并表达，需要通过质粒载体而不能直接将抗病毒
112、的PVX基因导入受体细胞，其原因是目的基因无_(答出两点即可）（3）在进行基因操作时，将抗病毒的PVX基因导入马铃薯细胞常用的方法为_。检测目的基因是否表达出相应的蛋白质，在个体水平上可以采用_。（4）相比于将抗病毒基因导入植物细胞的细胞核中，若将抗病毒基因导入植物细胞的叶绿体基因组中具有很多优势，从环境保护和生物工程安全性问题的角度分析，其优势体现在_。【答案】 (1). 反转录 (2). 聚合酶链式反应 (3). 热稳定DNA聚合酶(Taq酶) (4). 复制原点、表达所需的启动子，终止子 (5). 农杆菌转化法 (6). 相应病毒接种马铃薯植株 (7). 花粉中的精子细胞中通常不存在叶绿
113、体，导人叶绿体基因组中的抗病毒基因不会随花粉扩散传播，从面不会产生基因污染【解析】【分析】基因工程技术的基本步骤：1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入
114、目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术。（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）mRNA为材料，获得抗病毒的PVX基因，可通过逆转录酶的催化获得。将获得的PVX基因在体外进行扩增，可以采用聚合酶链式反应（PCR），该技术中所利用的特殊酶是热稳定DNA聚合酶(Taq酶) ，该酶可以耐受九十几度的高温环境。（2）目的基因上无复制原点、表达所需的启动子，终止子，故要使抗病毒的PVX基因在受体细胞中复制并表达，需要通过质粒载体而不能直接将抗病毒的PVX基因导入受体细胞。（3）将目的基因
115、导入受体细胞：植物细胞常用的有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法；动物常用显微注射法；微生物常用钙离子处理法。故将抗病毒的PVX基因导入马铃薯细胞常用的方法为农杆菌转化法。检测受体细胞DNA 分子上是否插入了目的基因采用DNA分子杂交技术；检测目的基因是否翻译形成蛋白质采用抗原-抗体杂交技术；在个体生物学水平鉴定马铃薯植株是否具有抗病毒特性的方法是将相应的马铃薯病毒接种到马铃薯植株上。（4）从环境保护和生物工程安全性问题的角度分析，将抗病毒基因导入植物细胞的叶绿体基因组比导入植物细胞的细胞核中，具有很多优势，如花粉中的精子细胞中通常不存在叶绿体，导入叶绿体基因组中的抗病毒基因不会随花粉扩散传
116、播，从面不会产生基因污染。【点睛】题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查。64. 自然情况下，牛的生育率很低，通过胚胎工程的技术手段，可以实现良种牛的快速繁殖。回答下列问题：(1)自然条件下，哺乳动物的受精作用是在雌性动物的_内完成的。当在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到_时，说明卵子已经完成受精。(2)釆用胚胎移植的方法，可使一头良种雌性黄牛一年生下数十头自己的后代。该方法的操作过程中需要用激素对该良种母牛和代孕母牛进行_处理。一般来说，胚胎移植的适宜时期是胚胎发育至_阶段。在胚胎移植过程中，移入子宫的胚胎能
117、在受体内存活的生理学基础是_。(3)釆用试管动物技术还可以使普通雌性黄牛产下奶牛、良种肉牛等不同品种小牛。该技术中首先要做的是体外受精和早期胚胎培养。采集的精子需要经过_处理，才具备受精能力。一般情况下，符合受精要求的精子和卵子可以在_溶液中完成受精过程。培养早期胚胎时，所用培养液的成分除了一些_类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及动物血清等物质。【答案】 (1). 输卵管 (2). 两个极体 (3). 同期发情 (4). 桑椹胚或囊胚 (5). 受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应 (6). 获能 (7). 获能(或专 用的受精) (8). 无机盐和有机盐
118、【解析】分析】自然条件下，受精是在雌性动物的输卵管内完成的，当在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体时，说明卵子已受精，受精作用完成的标志是核融合。在胚胎移植过程中，供、受体母牛选择好后，要用促性腺激素进行同期发情处理，使供体和受体生殖器官的生理变化相同，为胚胎移入受体提供相同的生理环境，以保证移植的胚胎能够继续正常发育，而受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。试管动物中首先要做的是体外受精和早期胚胎培养，体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等几个主要步骤，体外受精完成后，还需要进行早期胚胎培养，早期胚胎的培养液除了一些无机盐和有机盐类
119、外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等，为防止杂菌污染可在培养液中添加抗生素，当培养到桑椹胚或囊胚时再通过胚胎移植。【详解】(1)自然条件下，哺乳动物的受精作用是在雌性动物的输卵管内完成的。当在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时，说明卵子已经完成受精。(2)釆用胚胎移植的方法，可使一头良种雌性黄牛一年生下数十头自已的后代。该方法的操作过程中需要用激素对该良种母牛和代孕母牛进行同期发情处理。一般来说，胚胎移植的适宜时期是胚胎发育至桑椹胚或囊胚阶段。在胚胎移植过程中，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这是移入子宫的胚胎能在受体内存活的生理学基础。(3)釆用试管
120、动物技术还可以使普通雌性黄牛产下奶牛、良种肉牛等不同品种小牛。该技术中首先要做的是体外受精和早期胚胎培养。采集的精子需要经过获能处理，才具备受精能力。一般情况下，符合受精要求的精子和卵子可以在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。培养早期胚胎时，所用培养液的成分除了一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及动物血清等物质。【点睛】本题考查体外受精、胚胎移植，胚胎体外培养的相关知识，要求学生识记体外受精的过程，胚胎移植的基本程序和生理学基础，能结合所学的知识准确答题。65. 科学家将绿色荧光蛋白(GFP)基因转入小鼠胚胎干细胞(ES)内，GFP基因若表达就会
121、使细胞带有绿色荧光，继而利用带有绿色荧光的ES细胞培育出嵌合型的小鼠用于科学研究，流程如图所示。请回答：(1)在步骤中构建基因表达载体时，需要在GFP基因的首端加入_酶识别和结合的部位，有了它才能驱动GFP基因转录出mRNA，最终获得GFP。GFP基因的尾端还需有_，使转录在需要的地方停止下来。(2)步骤的受体细胞是小鼠ES细胞，ES细胞一般从囊胚的_分离得到，且ES细胞在形态上表现为_的特点。在培养ES细胞时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为_。如果想继续培养则需要重新用_处理，然后分瓶继续培养，这样的培养过程通常被称为_培养。(3)图中重组囊胚在步骤之前要先检测是否有绿色荧光细胞
122、，再通过_技术移入代孕母鼠子宫内继续发育。【答案】 (1). RNA聚合 (2). 终止子 (3). 内细胞团 (4). 体积小、细胞核大、核仁明显 (5). 接触抑制 (6). 胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) (7). 传代 (8). 胚胎移植【解析】【分析】本题目考查基因工程原理以及胚胎移植相关内容，分析题图：图示为是转基因绿色荧光嵌合小鼠的培育过程，其中表示基因表达载体的构建过程；表示将目的基因导入受体细胞的过程；表示受精作用；表示早期胚胎发育过程；表示胚胎移植过程；表示妊娠产生转基因鼠的过程。【详解】（1）启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，能启动转录过程，因此，构建基因表达载体时，必须在目的基因首端加入启动子，在末端加入终止子，使转录在需要的地方停止下来；（2）ES细胞来自早期胚胎（囊胚的内细胞团），ES细胞在形态上表现为体积小、细胞核大、核仁明显，对ES细胞进行的初次培养成为原代培养，在培养ES细胞时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为接触抑制，已经接触抑制的细胞需要用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)，使细胞分散，便于传代培养；（3）由图可知，目的基因和标记基因都是GFP基因，因此图中重组囊胚在步骤之前要先检测是否有绿色荧光细胞，再通过胚胎移植技术移入代孕母鼠子宫内继续发育。【点睛】注意：基因工程操作的一般流程，以及动物细胞培养过程。