1、专题二课题1一、选择题1关于倒平板操作，叙述错误的是(C)A将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞B右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰C用左手将培养皿打开，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手缓慢盖上皿盖D等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置解析将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，防止培养皿被污染，A正确；使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰，对锥形瓶的瓶口处进行灼烧灭菌，防止空气中的杂菌污染，B正确；用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基(约1020 mL)倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，而不能打开皿盖，C错误；倒平板后冷却需要倒过来
2、放置，防止皿盖上的水珠滴落到培养基上，D正确。2有关平板划线法接种微生物的操作的叙述，不正确的是 (C)A第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养基B每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种C在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来自菌液D划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者解析平板划线操作中，接种环蘸取菌液前灼烧的目的，是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线后残留的菌种；划线结束仍需灼烧接种环，是为了能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。从第
3、二次划线开始，每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，而不是菌液。3下列有关平板划线接种法的操作错误的是(D)A将接种环放在火焰上灼烧B将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液C蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连解析将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他的金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，故A正确；接种环必须冷却后，才可以伸入菌液中蘸取一环液，否则会烧伤或烧死微生物，故B正确；蘸取菌液和划线要在火焰旁进行，防止空气中的杂菌污染，故C正确；划线时要避免最后一区的划线与第一区划线连，因为最后一区是细菌最稀少的，而第一区是
4、细菌最致密的，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，故D错误。故选D。4下列关于灭菌的说法中，错误的是(A)A灭菌是指杀死一定环境中所有微生物的细胞，不包括芽孢和孢子B对不同的生物材料，应当采取不同的灭菌方法C培养基一般采取高压蒸汽灭菌法D高压蒸汽灭菌法最终使菌体蛋白质凝固变性解析灭菌是一种严格的使所有微生物(包括胞体、孢子、芽孢等)均死亡的措施。5甲、乙、丙是三种微生物，下表、是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖；甲能在中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是(D)粉状硫10 gK2HPO44 gFeSO40.5 g蔗
5、糖10 g(NH4)2SO40.4 gH2O100 mLMgSO49.25 gCaCl20.5 g注：“”表示培养基中加入了这种物质，“”表示培养基中没有加入这种物质。A甲、乙、丙都是异养型微生物B甲、乙都是自养型微生物，丙是异养型微生物C甲是异养型微生物、乙是固氮微生物、丙是自养型微生物D甲是固氮微生物、乙是自养型微生物、丙是异养型微生物解析根据题意可知，甲能在中正常生长繁殖，而乙和丙都不能，而培养基缺氮，说明甲能够自身固氮，属于固氮微生物；乙能在中正常生长繁殖，而甲和丙都不能，培养基中没有有机碳源，说明乙能够合成有机物，属于自养微生物；而丙不能在培养基生长，说明不能固氮；又不能在培养基中生
6、长，说明不能合成有机物，只能在培养基中生长，说明属于异养微生物，故D正确。二、非选择题6某种产脂肪酶菌常被用作饲料添加剂。下表是从土壤中初筛该菌的培养基配方，请回答下列问题：(NH4)2SO4NaClMgSO47H2OK2HPO41%橄榄油蒸馏水pH0.1 g0.05 g0.01 g10 g4 mL定容至100 mL7.0(1)在上述培养基中，橄榄油能为产脂肪酶菌提供_碳源_。为增大产脂肪酶菌的浓度，需用该培养基进行富集培养，富集培养基宜选用液体培养基的原因是_液体培养基能增大菌体与培养基的接触面积，为菌株的生长和繁殖提供更多营养和空间_。(2)用涂布平板法分离产脂肪酶菌时，在上述培养基的基础
7、上，还应加入_琼脂_和溴甲酚紫(碱性条件下呈紫色，在酸性条件下为黄色)。在平板上产脂肪酶菌落的周围会出现黄色圈，原理是_脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸，脂肪酸使溴甲酚紫变为黄色_。筛选时常选择菌落大、黄色圈直径大的菌落，二者分别说明_菌体繁殖能力强、脂肪酶活性高(产脂肪酶能力强)_。(3)菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。在平板上，有的菌落较小，呈乳白色，表面光滑，无丝状物，这些菌落可能为_细菌_(填“细菌”或“霉菌”)。有的菌落连成一片，形成原因最可能是_接种菌液的浓度过高_。(4)研究发现，在饲料中添加产脂肪酶菌剂后，动物的体重明显增加，这说明_脂肪酶菌剂能提高饲料转化率(
8、利用率)_。解析(1)橄榄油是本培养基中的唯一碳源，能为产脂肪酶菌提供碳源。由于液体培养基能增大菌体与培养基的接触面积，为菌株的生长和繁殖提供更多的营养和空间，所以进行富集培养时宜选用液体培养基。(2)用涂布平板法分离产脂肪酶菌时所用的培养基为固体培养基，所以在上述培养基的基础上，还应加入琼脂。脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸，脂肪酸呈酸性，能使溴甲酚紫变为黄色，因此在平板上产脂肪酶菌落的周围会出现黄色圈。菌落大，说明菌体繁殖能力强；黄色圈直径大，说明所产脂肪酶的活性高或产脂肪酶能力强。(3)菌落较小，呈乳白色，表面光滑，无丝状物，这些特征与细菌的菌落特征相符。平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。如果接种菌液的浓度过高，则会导致菌落在平板上连成一片。(4)在饲料中添加产脂肪酶菌剂后，因脂肪酶能催化脂肪水解，有利于脂肪的吸收，即脂肪酶菌剂能提高饲料转化率(利用率)，导致动物的体重明显增加。