1、易错点精析 【例1】下列关于细胞工程的叙述，错误的是A电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同【解析】本题考查的是细胞工程中的动物细胞杂交和植物细胞融合方面的内容，在植物体细胞杂交和动物体细胞融合时，均可采用离心、电刺激、振动等物理方法或化学促融剂如聚乙二醇等方法促融；植物细胞的外面有细胞壁会影响细胞的融合，故应在实验前用纤维素酶或果胶酶除去细胞壁，而动物细胞培养过程中存在着接触性抑制效应，故需要用胰蛋白
2、酶进行处理；单克隆抗体的制备就是利用经抗原免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合再经筛选而成的；两个品种的植物体细胞杂交，杂种细胞中的染色体数目是两品种染色体数之和，而常规的杂交的后代染色体数目与亲代保持相同。所以本题应该选D。【误区警示】A种植物细胞（基因型为Aa）和B种植物细胞（基因型为Bb），去掉细胞壁后，诱导两种细胞的原生质体融合，形成单核的杂种细胞，若经过组织培养得到的杂种植株基因型为AaBb。【例2】（原创题)科研人员研究得出，某些无限增殖的细胞中存在有无限增殖调控基因（PrG），该基因能激发许多动物细胞进行有丝分裂。现欲利用PrG基因通过基因工程技术制备单克隆抗体，请据图回
3、答。（1） 从无限增殖细胞中获得PrG基因的常用方法为_或_。（2）经酶2处理过的A带有与质粒相同的_，酶3是_酶。（3）如果B能正常导入C，且能被检测并稳定表达，它必需具备的条件是_.（4）C作为受体细胞，此处必需是_，才能产生单克隆抗体。（5）D细胞的特点是_；如果要想获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，还需对D进行_和_。（6）除了本题中的方法外，请列出利用该无限增殖的细胞进行单克隆抗体制备的方法:_。(写出一种即可) 【解析】带有无限增殖基因的重组质粒的构建中，酶1和酶2应均为限制性内切酶且是同一种酶；要能被检测和表达，重组质粒上必须有标记基因和启动子、终止子，构建完成后，将其导入受体
4、细胞（B淋巴细胞）中。答案：（1）从基因文库中获取目的基因，利用PCR技术扩增目的基因（或人工合成）；（2）黏性末端； DNA连接酶；（3）有标记基因，有启动子和终止子；（4）B淋巴细胞（或浆细胞）；（5）能在体外迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体；克隆化培养，抗体检测。（6）细胞融合技术（细胞核移植技术）。【误区警示】利用基因工程生产单克隆抗体是一种新型技术，它是将无限增殖的基因导入B淋巴细胞中，使淋巴细胞无限增殖。【例3】（改编题）研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定甲、乙两种物质是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请回答有关问题。1实验原理：有毒物质加入细胞培养液后，培养的动物细胞会发生染色
5、体结构和数目的变异根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。 2实验步骤：（1）制备细胞悬浮液：将小白鼠胚胎用胰蛋白酶处理，制成细胞悬浮液。（2）进行细胞培养：取A、B、C三个洁净的培养瓶， 。分别向A、B、C培养瓶中加入_，并将培养瓶摇匀。 。（3）制作临时装片并镜检和统计。3结果与结论：经统计三个培养瓶的Q值依次为：Q甲=13%、Q乙=125%、Q水=01%，由此得出的结论是 。【解析】此实验中，首先在培养瓶中加入等量的细胞悬浮液，然后分别加入等量甲、乙物质，并加等量的蒸馏水进行对照，然后在一定温度下培养。答案：2.（2）分别加入等量的细胞悬浮液；等量的
6、物质甲、物质乙和蒸馏水；把三个培养瓶放在37 （或适宜温度）的恒温箱中培养；3.甲乙两种化学物质均有毒性，且乙的毒性比甲的毒性大。【误区警示】解答此类题主要注意以下几个方面：（1）熟悉动物细胞培养的过程及条件，如恒温培养、一定的PH值，血清的作用、细胞悬液的制备等等；（2）掌握动物细胞染色体观察的方法：制作临时装片，观察其中期的染色体行为；（3）明晰实验题的解题步骤：可采用“六步骤”的解题模式,即细心审题、原理分析、材料分析、变量分析、结果分析和正确表达。如此题的自变量为毒性有无（或强弱），设置方法为甲乙两种物质为实验组，空白为对照组；因变量为毒性的有无（或强弱），具体观测指标为染色体的结构和
7、数目的变化。观测方法用镜检法。正确表达要求语言叙述讲究用词科学、准确，考虑周全，要注意充分利用题目的条件，如果给出了实验的材料及试剂而没有用上，那得考虑实验步骤中是否还有考虑不周之处。【例4】1955年，布拉舍用洋葱根尖和变形虫为材料进行实验，他用核糖核酸酶（RNA酶）分解细胞中的核糖核酸（RNA），蛋白质的合成就停止。而如果再加入从酵母中抽提的RNA，蛋白质的合成就有一定程度的恢复。同年，戈尔德斯坦（Goldstein）和普劳特（Plaut）观察到用放射性标记的RNA从细胞核转移到细胞质。因此，人们猜测RNA是DNA与蛋白质合成之间的信使。现提供下列实验材料，请你模拟戈尔德斯坦和普劳特的实验
8、，设计实验证明：RNA是在细胞核中合成的，然后再从细胞核转移到细胞质中。实验材料：变形虫若干、培养液、标记过的尿嘧啶核苷酸，未标记过的尿嘧啶核苷酸、相关的仪器设备。实验步骤1将生长状况相同的变形虫分为A、B两组。2 。3 。实验结果： 。【解析】此实验的目的为“验证RNA在细胞核中合成，然后再从细胞核转到细胞质中”，采用同位素标记法，标记RNA合成的原料即尿嘧啶核苷酸，自变量为是否标记尿嘧啶核苷酸，因变量为RNA是否在细胞核中合成的，观察指标为细胞核中是否有放射性。如果要证明RNA从细胞核转到细胞质，可采用核移值技术，将有RNA标记的和无RNA标记的细胞核的细胞，核相互移植，观察移植后细胞质内
9、的放射性。答案：实验步骤：A组变形虫用同位素标记的尿嘧啶核苷培养液来培养，发现标记的RNA分子首先在细胞核中合成；B组变形虫培养在未标记的尿嘧啶核苷培养液中；3.分别检测细胞质、细胞核中是否有放射性物质存在；4.发现A组中放射性物质首先出现在细胞核，然后出现在细胞质；B组的细胞核和细胞质中均未发现有标记的RNA。在适当的时候，用这两组变形虫进行核移植实验。将A组变形虫的细胞核移植到B组变形虫的细胞质中，将B组变形虫的细胞核移植到A组变形虫的细胞质中，分别进行培养观察。实验结果：发现大部分标记的RNA相继从细胞核转移到细胞质中。【误区警示】与核移植技术有关的实验设计题见得虽少，但在必修一的课本中有四例经典的实验，即美西螈的核移植实验、蝾螈的受精卵横缢实验、变形虫去核培养实验和伞藻嫁接实验等，从这些经典的实验中，分析得出其实验原理并应用于答题。w.w.w.k.s.5.u.c.o.m