1、我院 2019 年临床分离大肠埃希菌耐药表型调查分析江素香 郑港森 练明建摘要目的 分析臨床分离大肠埃希菌的耐药表型分布，为临床医生提供实验室数据以更好地指导抗生素治疗。方法 回顾性分析 2016 年 112 月厦门大学附属第一医院临床分离的 851 株大肠埃希菌，采用法国 BioMerieux VITEK2Compact 全自动细菌鉴定及药敏分析系统对菌株进行细菌鉴定和药物敏感性检测。结果 2016 年临床分离的大肠埃希菌 851 株，主要包括尿液 425 株，占49.9%;全血 157 株，占 18.4%;无菌体液（包括胆汁、腹腔积液、胸腔积液、关节液不包括脑脊液）132 株，占 15.5
2、%;痰液 50 株，占 5.9%。四环素类抗生素（四环素和替加环素）共有 4 种耐药表型，以四环素（R/I）替加环素（S）为主;喹诺酮类抗生素（环丙沙星和左氧氟沙星）共有 4 种耐药表型，环丙沙星（R/I）左氧氟沙星（R/I）和环丙沙星（S）左氧氟沙星（S）为主;氨基糖苷类抗生素（庆大霉素、妥布霉素和阿米卡星）共有 6 种耐药表型，庆大霉素（S）妥布霉素（S）阿米卡星（S）和庆大霉素（R/I）妥布霉素（R/I）阿米卡星（S）耐药表型为主;-内酰胺酶抑制剂复合物（阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦）共有 5 种耐药表型，主要是阿莫西林/克拉维酸（S）氨苄西林/舒巴坦（R/I
3、）哌拉西林/他唑巴坦（S）耐药表型;-内酰胺类抗生素（氨苄西林、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南和美罗培南）共有 11 种耐药表型，以氨苄西林（R/I）头孢呋辛（S）头孢噻肟（S）头孢他啶（S）头孢吡肟（S）氨曲南（S）亚胺培南（S）美罗培南（S）和氨苄西林（R/I）头孢呋辛（R/I）头孢噻肟（R/I）头孢他啶（S）头孢吡肟（S）氨曲南（S）亚胺培南（S）美罗培南（S）为主。不同标本的耐药表型分布存在一定的差别，但主要的耐药表型分布基本一致，大肠埃希菌对四环素、喹诺酮类和氨基糖胺类抗生素的耐药率超过或接近 50%，但对替加环素、亚胺培南和美罗培南保持极高的敏感性。结论
4、大肠埃希菌主要引起尿路感染、血流感染、胆囊炎和腹腔感染等疾病。临床流行的细菌耐药表型相对稳定，细菌耐药主要模式比较明显;从标本类型分析，不同标本之间的耐药表型有所差别，临床可根据具体标本来源，选用合适的抗生素进行相关治疗，可为临床经验用药选择提供更具体的理论依据。关键词大肠埃希菌;耐药;表型;抗生素Abstract Objective To analyze the distribution of drug-resistancephenotypes of clinically isolated Escherichia coli，and to provideclinicians with labo
5、ratory data to better guide antibiotic therapy.Methods The clinical isolates of 851 Escherichia coli in the FirstAffiliated Hospital of Xiamen University from January to December2016 were retrospectively analyzed.Strain identification and drugsensitivity test were conducted by BioMerieux VITEK2 Comp
6、actautomatic bacterial identification and drug sensitivity analysissystem.Results A total of 851 strains of Escherichia coli wereclinically isolated in 2016，mainly including 425（49.9%）strainsfrom urine，157（18.4%）strains from whole blood，132（15.5%）sterile strains from body fluid（including bile，ascite
7、s，pleuraleffusion，joint fluid but not cerebrospinal fluid），and 50（5.9%）strains from sputum.There were four drug-resistantphenotypes of Tetracycline antibiotics（Tetracycline andTegacycline），among which Tetracycline（R/I）Tegacycline（S）was the dominant phenotype.There were four drug-resistant phenotypes
8、of Quinolone antibiotics（Ciprofloxacin and Levofloxacin）and twomajor phenotypes were Ciprofloxacin（R/I）Levofloxacin（R/I）andCiprofloxacin（S）Levofloxacin（S）.There were six drug-resistantphenotypes of aminoglycoside antibiotics（Gentamycin，Tobramycinand Amikacin）and two major phenotypes were Gentamycin（
9、S）Tobramycin（S）Amikacin（S）and Gentamycin（R/I）Tobramycin（R/I）Amikacin（S）.There were five drug-resistant phenotypes of-lactam enzyme inhibitor complexes（Amoxicillin/Clavulanic Acid，Ampicillin/Sulbactam and Piperacillin/Tazobatam）andAmoxicillin/Clavulanic Acid（S）Ampicillin/Sulbactam（R/I）Piperacillin/Ta
10、zobattan（S）was the dominant phenotype.There wereeleven drug-resistant phenotypes of-lactam antibiotics（Ampicillin，Cefuroxime，Ceftaxime，Ceftadime，Cefepime，Aztreonam，Imipenem and Meropenem）and two major phenotypes wereAmpicillin（R/I）Cefuroxime（S）Ceftaxime（S）Ceftadime（S）Cefepime（S）Aztreonam（S）Imipenem（
11、S）Meropenem（S）andAmpicillin（R/I）Cefuroxime（R/I）Ceftaxime（R/I）Ceftadime（S）Cefepime（S）Aztreonam（S）Imipenem（S）Meropenem（S）.There were some differences in the distribution of drug-resistantphenotypes among different specimens，but the distribution of majordrug-resistant phenotypes was basically consisten
12、t.The resistancerate of Escherichia coli to Tetracycline，Quinolones andaminoglycosamines was more than or close to 50%，but Escherichiacoli remained highly sensitive to Tegacycline，Imipenem andMeropenem.Conclusion Escherichia coli mainly causes urinary tractinfection，blood stream infection，cholecysti
13、tis and abdominalinfection.The clinical prevalence of bacterial resistance phenotypesis relatively stable and the main kind of resistant pattern isrelatively obvious.There are some differences in the distribution ofdrug-resistant phenotypes among different specimens.Depending on thesource of the spe
14、cimen，the clinicians can select appropriateantibiotics for relevant treatment，which can provide more specifictheoretical basis for clinical experience in drug selection.Key words Escherichia coli;Resistance;Phenotype;Antibiotic大肠埃希菌是医院感染最重要的致病菌之一，可引起尿路感染、血流感染、胆囊炎等疾病。近年来细菌耐药问题日益严重，尤其是“超级细菌 NDM-1”的报道1
15、-2，临床和实验耐碳青霉烯类抗生素大肠埃希菌呈增长趋势3-4，及时了解大肠埃希菌耐药表型的流行情况，掌握医院感染大肠埃希菌耐药模式，为临床抗感染治疗提供依据，有利于临床抗生素的合理应用。本研究拟对厦门大学附属第一医院 2016 年临床分离大肠埃希菌进行统计分析，现报道如下。1 材料与方法1.1 菌株来源回顾性分析 2016 年 112 月厦门大学附属第一医院临床送检培养标本中分离的大肠埃希菌，共 851 株。本研究经医院医学伦理委员会审核批准。1.2 质控菌株大肠埃希菌 ATCC25922 和大肠埃希菌 ATCC3 5218，由卫生部临检中心提供。1.3 试剂和仪器哥伦比亚血平板为郑州安图公司
16、产品;GN 鉴定卡和 AST-GN67 和 AST-GN04 药敏卡为法国梅里埃公司产品。1.4 细菌鉴定与药敏测定法国 BioMerieux VITEK2 Compact 全自动细菌鉴定及药敏分析系统进行细菌的鉴定和药物敏感性分析。药敏检测方法为微量稀释法测定最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration，MIC），结果判读按照 2015 年临床与实验室标准化协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）制定的标准5，以敏感（S）、中介（I）、耐药（R）报告结果。2 结果2.1 菌株分布2016 年临床
17、分离的 851 株大肠埃希菌，其中尿液 425 株，占 49.9%;全血 157株，占 18.4%;无菌体液（包括胆汁、腹腔积液、胸腔积液、关节液不包括脑脊液）132 株，占 15.5%;痰液 50 株占 5.9%（同一患者同类标本分离株不重复计入）。2.2 耐药表型分析2.2.1 四环素类抗生素四环素类抗生素耐药表型共有 4 种，以四环素（R/I）替加环素（S）为主，占 59.7%;此种耐药表型构成比依次是全血、痰液、尿液和无菌体液，具体见表 1。2.2.2 喹诺酮类抗生素喹诺酮类抗生素耐药表型共有 4 种，以环丙沙星（R/I）左氧氟沙星（R/I）和环丙沙星（S）左氧氟沙星（S）为主，各占5
18、5.9%和 43.3%;全血标本中，环丙沙星（S）左氧氟沙星（S）耐药表型占58.6%，具体见表 2。2.2.3 氨基糖苷类抗生素氨基糖苷类抗生素耐药表型共有 6 种，以庆大霉素（S）妥布霉素（S）阿米卡星（S）和庆大霉素（R/I）妥布霉素（R/I）阿米卡星（S）耐药表型为主，各占 58.9%和 34.8%，具体见表 3。2.2.4-内酰胺酶抑制剂复合物-内酰胺酶抑制剂复合物耐药表型共有 5种，主要是阿莫西林/克拉维酸（S）氨苄西林/舒巴坦（R/I）哌拉西林/他唑巴坦（S）耐药表型为主，占 47.2%，具体见表 4。2.2.5-内酰胺类抗生素-内酰胺类抗生素耐药表型共有 11 种，以氨苄西林（
19、R/I）头孢呋辛（S）头孢噻肟（S）头孢他啶（S）头孢吡肟（S）氨曲南（S）亚胺培南（S）美罗培南（S）和氨苄西林（R/I）头孢呋辛（R/I）头孢噻肟（R/I）头孢他啶（S）头孢吡肟（S）氨曲南（S）亚胺培南（S）美罗培南（S）为主，各占 24.5%和 21.9%，具体见表 5。3 讨论大肠埃希菌是人类肠道中正常菌群，也是医院感染中最常见的致病菌之一6-7。随着临床创伤性治疗和抗生素的广泛使用以及免疫力低下患者的增多，大肠埃希菌的耐药性也在不断增加，尤其随着“超级细菌 NDM-1”的发现报道，耐碳青霉烯类的大肠埃希菌在医院感染中不断的出现9-10，临床抗感染治疗面临着越来越大的挑战。从临床标本
20、分析，临床分离大肠埃希菌主要来自尿液，其次是全血、无菌体液（主要是胆汁和腹腔积液）和痰液标本，在医院感染中主要引起尿路感染、血流感染、胆囊炎和腹腔感染11-15。从四环素类抗生素耐药表型分析，四环素的敏感率比较低，已经不适合临床的经验用药。近年来，一种新型甘氨酰环素类抗生素替加环素，由于具有广谱、抗菌活性强的特点，在临床逐渐被开展使用，从耐药监测结果看，其敏感性极高，可以根据临床需要参考使用。喹诺酮类抗生素主要有左氧氟沙星和环丙沙星，从耐药表型分析，两者主要表现出同时敏感或耐药的情况，说明两者对大肠埃希菌的抗菌活性基本一致，耐药机制也可能基本一致，在药物敏感性实验结果上可以互相推测。另外，两者
21、同时耐药的比例大，超过 50%（除了全血标本），其敏感性令人堪忧16-17。庆大霉素、妥布霉素和阿米卡星是临床常见的氨基糖苷类抗生素，从耐药表型监测结果分析，庆大霉素和妥布霉素对大肠埃希菌的抗菌活性基本一致（无菌体液结果稍有差异），其药物敏感性实验结果可以相互推测，但庆大霉素或妥布霉素的药敏结果无法推测阿米卡星的药敏结果，反之亦然。敏感性方面，庆大霉素和妥布霉素已经低于 70%，阿米卡星仍保持在 90%以上18。-内酰胺类抗生素是临床治疗大肠埃希菌重要的抗菌药物，在医院感染治疗中广泛被应用。从耐药表型分析，对大肠埃希菌的抗菌活性由强到弱依次是碳青霉烯类、头孢菌素类、青霉素类，其中头孢他啶好于头
22、孢噻肟，本次结果未出现头孢噻肟敏感，头孢他啶耐药的情况;头孢他啶与头孢吡肟基本一致，氨曲南略差于头孢他啶，好于头孢噻肟。大肠埃希菌对三代头孢菌素（主要指头孢噻肟或头孢曲松）的敏感性已经低于 50%，但仍对亚胺培南和美罗培南保持高度敏感性，但已出现耐碳青霉烯类的大肠埃希菌，临床实验室应加强耐药菌株的检测和监测。-内酰胺酶是大肠埃希菌对-内酰胺类抗生素产生耐药最重要的耐药机制，尤其是超广谱-内酰胺酶和头孢菌素酶19-22;临床通过一些酶抑制复合物的使用，如阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦，治疗产-内酰胺酶大肠埃希菌的感染。從酶抑制剂耐药表型分析，阿莫西林/克拉维酸（S）氨苄
23、西林/舒巴坦（R/I）哌拉西林/他唑巴坦（S）耐药表型所占比例接近 50%，可见酶抑制活性由强到弱依次是哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦;哌拉西林/他唑巴坦的敏感性超过 90%，提示对于大肠埃希菌产生的-内酰胺酶，都能被哌拉西林/他唑巴坦所抑制;阿莫西林/克拉维酸（R/I）氨苄西林/舒巴坦（R/I）哌拉西林/他唑巴坦（R/I）耐药表型可能主要是产生 AmpC 酶引起的，但所占比例低于 10%，提示 AmpC 酶不是大肠埃希菌对-内酰胺类抗生素产生耐药的主要机制，但由于不被酶抑制剂所抑制，加上临床实验室目前缺乏简便的检测方法，其所带来的耐药问题也不容忽视。综上所述，通过了
24、解大肠埃希菌抗生素耐药表型情况，及时监测医院感染大肠埃希菌耐药菌株的流行情况，有利于医院细菌耐药性监测，同时更好为临床治疗相关性感染提供用药依据。参考文献1Yong D，Toleman MA，Giske CG，et al.Characterization of a newmetallo-beta-lactamase gene，bla（NDM-1），and a novel eryehromycinesterase gene carried on a unique genetic structure in Klebsiellapneunoniae sequence type 14 from Ind
25、iaJ.Antimicrob AgentsChemother，2009，53（12）：5046-5054.2孫鹏飞，夏文颖，王钰，等.ST131 型产 NDM-1 型碳青霉烯酶大肠埃希菌的耐药机制研究J.临床检验杂志，2018，36（9）：655-659.3陈韩，陈思思，余方友.2011 年至 2015 年耐亚胺培南大肠埃希菌临床分离的耐药性分析J.中国临床药理学杂志，2017，33（2）：232-234.4刘周，李昕，储雯雯，等.碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌临床分布及耐药特征分析J.安徽医学，2018，39（3）：274-277.5M100-S25.Performance standards f
26、or antimicrobial susceptibilitytestingS.Twenty-five informational supplement，CLSI，2015，35（3）：1-236.6胡付品，朱德妹，复，等.2014 年 CHINET 中国细菌耐药性监测J.中国感染与化疗杂志，2015，15（5）：401-410.72015 年全国细菌耐药监测报告.http：/ 3 年分离大肠埃希菌耐药性的分析J.中国抗生素杂志，2018，43（5）：620-623.14孙景熙，王福斌，陈剑明，等.2012 年-2016 年医院大肠埃希菌分布特征及耐药性分析J.中国卫生检验杂志，2019，29
27、（6）：669-672.15展冠军，朱国龙，戴真南，等.临床不同标本及不同科室的大肠埃希菌耐药性分析J.中国抗生素杂志，2018，43（6）：734-738.16潘玫，陈山，李稳，等.大肠埃希菌耐药特征及质粒介导喹诺酮耐药基因分布J.国感染与化疗杂志，2016，16（1）：15-19.17石莹，刘亚男，李锐，等.大肠埃希菌对碳青霉烯类及喹诺酮类抗菌药物的耐药性分析J.中华医院感染学杂志，2017，27（21）：4808-4810，4814.18HU F，OHARA JA，RIVERA JI，et al.Molecular features ofcommunity-associated exte
28、nded-spectrum-lactamase-producingEscherichia coli strains in the United StatesJ.Antimicrob AgentsChemother，2014，58（11）：6953-6957.19毛炜，费林立，陈柯婷，等.20162017 年诸暨地区产超广谱内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出及药敏情况J.实用预防医学，2019，26（4）：481-484.20赵鑫，程勇，杨海帆，等.泌尿系患者感染大肠埃希菌的耐药基因分布特征J.中国病原生物学杂志，2019，14（4）：468-472.21闫妹姝，陶晓明，华正祥，等.产超广谱-内酰胺酶大肠埃希菌临床分布及耐药性分析J.中国中西医结合外科杂志，2018，24（5）：609-612.22罗瑜，黄永茂，林雁，等.大肠埃希菌耐多药与产超广谱-内酰胺酶关系的研究J.西南军医，2018，20（3）：315-318.（收稿日期：2019-06-26本文编辑：任秀兰）