1、微生物的分离和纯培养练习1 对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒的方法依次是（）。化学消毒灼烧灭菌干热灭菌紫外线灭菌高压蒸汽灭菌巴氏消毒法A BC D2 高压蒸汽灭菌的原理是（）。A高压使细菌DNA变性B高压使细菌蛋白质凝固变性C高温烫死细菌D高温使细菌DNA变性3 有关微生物营养物质的叙述中，正确的是（）。A氨既能为一些微生物提供氮源也能提供能量BNaHCO3只能为微生物提供碳源C维生素是微生物的能源D牛肉膏蛋白胨只能为微生物提供氮源和碳源4 有关平板划线操作正确的是（）。A使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取
2、出菌种后需马上塞上棉塞C将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D最后将平板倒置，放入培养箱中培养5 下列叙述错误的是（）。A培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素B培养霉菌时需将培养基的pH调至碱性C培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性D培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件6 下列操作属于灭菌的是（）。A接种前用火焰灼烧接种环B接种前用酒精擦拭双手C将平板倒置，放入培养箱中培养D接种在酒精灯的火焰旁完成7 牛肉膏、蛋白胨培养基中加入琼脂这一理想的凝固剂，对这一说法不正确的是（）。A不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用B在微生物生长温度范围内保持固体状态C琼脂
3、凝固点温度低，利于微生物的生长D凝固剂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强8 有关倒平板操作错误的是（）。A在火焰旁进行操作B使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上D等待平板冷却凝固后需要倒过来放置9 含C、H、O、N的大分子有机化合物可以作为（）。A异养微生物的氮源、能源B异养微生物的碳源、能源C自养微生物的碳源、氮源、能源D异养微生物的碳源、氮源、能源10 将50 mL牛奶煮沸，倒入经消毒的一个锥形瓶内，锥形瓶口用棉团堵住，每日观察牛奶的情况（如下图），共进行4天。（1）这个实验可证明_。（2）为这个实验设计的对照实验应该是_。（3）实验结束时，牛奶会_，
4、检测方法是_，产生这一现象的原因是_。（4）牛奶在这个实验中的作用是_。（5）实验前先将牛奶煮沸的原因是_。（6）加入土样前，先让牛奶冷却至室温的原因是_。（7）用棉团堵住锥形瓶的原因是_。（8）实验前对锥形瓶进行消毒这一个步骤是否是必要的？_，理由是_。11 下表中给出某培养基的配方。请完成问题：牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂H2O0.5 g1 g0.5 g2 g100 mL（1）蛋白胨能提供的营养要素有_、_、_等。琼脂的作用为_。 （2）在各种成分溶化分装前必须进行的重要步骤是_。（3）此培养基一般不适用于工业生产，工业生产常用_培养基。（4）此培养基能培养的细菌的同化类型是_。（5）若要分离
5、出金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入_。（6）若用此培养基纯化大肠杆菌，最常用的方法是_、_。若在此培养基中加入_和_，可直接鉴定大肠杆菌，其菌落特征是_。 参考答案1 解析：培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。答案：A2 答案：D3 答案：A4 解析：使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中对接种环也要灭菌；含菌种的试管在打开后和塞棉塞前都要通过酒精灯火焰灭菌；平板划线时，划线的方法包括连续划线法和交叉划线法。连续划线法是从
6、平板边缘的一点开始，连续作紧密的波浪式划法。交叉划线法从平板的一边作第一次平行划线若干条，转动培养皿约70角进行第二次平行划线。同法进行第三次、第四次划线。只划三至五条平行线微生物不易分离成单个菌落。答案：D5 解析：霉菌适宜的pH为5.06.0；细菌适宜的pH为6.57.5；放线菌适宜的pH为7.58.5。答案：B6 解析：要正确区分灭菌、消毒和防止杂菌污染。A属于灭菌，B属于消毒，C、D都是实验操作过程中防止杂菌污染的措施，与灭菌无关。答案：A7 解析：理想的凝固剂应具备以下条件：不被所培养的微生物分解利用；在微生物生长的温度范围内保持固体状态；凝固剂的凝固点不能太低，否则不利于微生物的生
7、长；对所培养的微生物无毒害作用，并且在灭菌时不会被破坏；透明度好，凝固力强；配制方便，价格低廉。常用凝固剂有琼脂、明胶。答案：C8 解析：整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵，因此，灭过菌的培养皿放在火焰旁。打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰。培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙进行操作，不能将培养皿盖完全打开。平板冷却凝固后需要倒过来放置。答案：C9解析：含C、H、O、N的大分子有机化合物，可能是蛋白质，因此可以给异养型微生物提供碳源、氮源和能源。答案：D10 答案：（1）土壤中存在微生物（2）在将土样放入锥形瓶之前，先对其进行烘烤以杀死所有微生物（3）变酸蓝色石蕊试纸变红土壤中微生物进行发酵产生乳酸（4）为土壤中的微生物生长提供养分（5）杀死牛奶中存在的所有微生物（6）避免温度较高的牛奶杀死土壤中的微生物（7）阻止飘浮在空气中的微生物进入锥形瓶内（8）是证明在土样加入之前，锥形瓶内无任何微生物存在11 答案：（1）碳源氮源生长因子使培养基凝固（2）调节pH（3）液体（4）异养型（5）高浓度的NaCl（6）平板划线法稀释涂布平板法伊红美蓝菌落呈紫色并带有金属光泽
