1、非选择题专项训练二1(2021河北张家口质量监测)配制培养基时可根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求,加入某些物质或除去某些物质以抑制其他微生物的生长,也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性,设置特殊培养条件或在培养基中加入某种化学物质,从而筛选出特定的微生物,这种培养基叫作选择培养基。根据有关内容回答以下问题:(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是:计算、称量、溶化、_、_。(2)某同学在做微生物实验时,不小心把大肠杆菌和酵母菌混合在了一起。请回答有关分离得到纯度较高的大肠杆菌和酵母菌的实验的问题:主要步骤:制备两种培养基:一种加伊红美蓝的培养基,一种加青霉素的培养基。两种培
2、养基分别分成两份,依次标上A、A、B、B备用。培养基应采用_法灭菌。分别向A、B培养基中接种_。接种后,放在恒温箱中培养34天。试说明观察到的培养结果:加伊红美蓝的培养基上有黑色的大肠杆菌群落,_。从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的两种目的菌种,分别接种到A、B培养基中。接种后,把A、B培养基放入恒温箱中培养34天。第两个步骤的目的是_。【答案】(1)灭菌倒平板(2)高压蒸汽灭菌混合菌加青霉素的培养基上只有酵母菌菌落获得纯度较高的大肠杆菌和酵母菌【解析】(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。(2)青霉素不影响酵母菌的生长繁殖,但会抑制大肠杆菌的生长繁殖
3、,大肠杆菌的代谢产物能与伊红美蓝发生特定的颜色反应,使菌落呈黑色,所以应一种培养基中加入伊红美蓝,一种培养基中加入青霉素。培养基采用高压蒸汽灭菌法灭菌。分别向A、B培养基中接种混合菌,培养后加伊红美蓝的培养基上的黑色菌落是大肠杆菌菌落,加青霉素的培养基上生长的菌落是酵母菌菌落。从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的两种目的菌种,分别接种到A、B培养基中培养,目的是获得纯度较高的大肠杆菌和酵母菌。2(2021江西南昌十中期末)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题:(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前,随机取
4、若干空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是_;然后,将1 mL水样稀释100倍,在4个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,4个平板上的菌落数分别为29、39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为_个。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过_灭菌。(3)图A和B中,_表示的是用平板划线法接种培养后得到的结果。能够得到单菌落的是图示_。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中_的含量,同时可使菌体与培养液充分
5、接触,提高营养物质的利用率。(5)得到图B所示结果所用的接种工具是_。测定土壤中细菌的数量时,一般稀释倍数为_倍。【答案】(1)检测培养基灭菌是否合格3.8107(2)灼烧(3)AAB(4)溶解氧(5)涂布器104、105、106【解析】(1)在微生物培养过程中应该进行无菌操作,配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌,将未接种的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底、合格;由题意知1 mL水样中的活菌数是(393837)30.11003.8104(个),每升水样中的活菌数是3.81041033.8107(个)。(2)对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌。(3)分析题图可知,图A表示用平板划线法接种培养后
6、得到的结果,图B表示用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果,二者都能得到单菌落。(4)振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快,其原因是振荡培养提高了培养液中溶解氧的含量,同时使菌体与培养液充分接触,提高了营养物质的利用率。(5)图B表示用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果,接种工具是涂布器。测定土壤中细菌的数量时,为了保证培养基平板上菌落的数目为30300,一般稀释倍数为104、105、106倍。3(2021福建毕业班质检)硒是一种生命必需的微量元素。亚硒酸钠对细菌的生长有明显的毒害作用,土壤中的一些富硒细菌可将其还原为红色单质硒。如图为土壤中富硒细菌的筛选和纯化过程。回答下列问题。(1)若中
7、出现_的现象,则说明培养基中的亚硒酸钠被细菌还原。(2)梯度稀释的目的是_。将细菌从接种至应采用_法。(3)研究人员筛选出一种富硒菌株,现欲通过观察菌落来判断菌株对亚硒酸钠的耐受值,请将下列实验补充完整:配制系列浓度梯度的亚硒酸钠_(填“液体”或“固体”)培养基;向培养基中分别接种_的该菌株菌液,在适宜条件下培养一段时间;观察菌落的生长情况,_的培养基对应的最高亚硒酸钠浓度即为该菌株对亚硒酸钠的最高耐受值。【答案】(1)培养基变红(2)使聚集在一起的细胞分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落平板划线(3)固体等量有菌落生长【解析】(1)由题意可知,土壤中的一些富硒细菌可将亚硒酸钠还原
8、为红色单质硒,因此若中培养基变红,则说明培养基中的亚硒酸钠被细菌还原。(2)梯度稀释的目的是使聚集在一起的细胞分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落;从中挑取菌种接种至应采用平板划线法。(3)由题意可知,研究人员筛选出了一种富硒菌株,若要通过观察菌落来判断菌株对亚硒酸钠的耐受值,步骤如下:配制系列浓度梯度的亚硒酸钠固体培养基;向培养基中分别接种等量的该菌株菌液,在适宜条件下培养一段时间;观察菌落生长情况,有菌落生长的培养基对应的最高亚硒酸钠浓度即为该菌株对亚硒酸钠的最高耐受值。4(2021云南昆明三中测试)某些细菌可将尿素分解成CO2和NH3。欲从土壤中分离能分解尿素的细菌,某研究小
9、组利用成分为KH2PO4、Na2HPO4、葡萄糖、琼脂、尿素的培养基进行了相关实验。请回答:(1)在土壤微生物的培养过程中,培养基中的KH2PO4与Na2HPO4除了可以作为_被细菌利用外,它们还具有的功能为_。(2)该培养基对土壤中的微生物具有选择作用,理由是_。微生物能分解尿素的原因是其能合成_。(3)为获得目的菌的单菌落,常对土壤样液做_处理。为便于确认目的菌,可在培养基中加入_指示剂,接种并培养菌种后,可根据菌落周围_判断出该菌能分解尿素。【答案】(1)无机盐维持培养基的pH相对稳定(2)尿素为该培养基中的唯一氮源,只有能以尿素为氮源的微生物才能在此培养基上生长、增殖脲酶(3)稀释酚红
10、出现红色【解析】(1)培养基中的KH2PO4与Na2HPO4除可作为无机盐被细菌利用外,还可构成缓冲液,维持培养基的pH相对稳定,利于微生物的生长与增殖。(2)该培养基中的尿素为唯一氮源,只有能以尿素为氮源的微生物才能在此培养基上生长、增殖,所以该培养基对土壤中的微生物具有选择作用。微生物能分解尿素的原因是其能合成脲酶,脲酶可将尿素分解为氨。(3)为获得目的菌的单一菌落,常用无菌水对土壤样液做稀释处理。尿素分解菌合成的脲酶可将尿素分解成氨,氨可使培养基的pH升高,进而使酚红指示剂变红,所以为便于确认目的菌,可在培养基中加入酚红指示剂,接种并培养菌种后,可根据菌落周围出现红色判断出该菌能分解尿素
11、。5(2021山东淄博模拟)乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的危害奶牛养殖业的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽(抗细菌)和人干扰素(抗病毒)的双转基因奶牛新品种。下图1为基因表达载体,图2为培育流程。(1)培育双转基因奶牛涉及的生物技术有_(至少写出2项)。(2)牛乳铁蛋白肽基因必须与_等调控组件重组在一起,才能在转基因奶牛的乳腺细胞表达,人干扰素基因则可在全身细胞表达。据图可知,干扰素基因与_基因可同时转录,但在翻译时,核糖体可识别mRNA上IRES序列的对应部分,启动另一种肽链的合成,因此用含有新霉素的培养基可筛选出_ _。(3)将基因导入牛胎儿成纤维细胞的方法是_,
12、在导入前,需用_将其处理成单个细胞。成纤维细胞无法直接发育成个体,需要去核卵母细胞的细胞质诱导,以实现细胞核的全能性。(4)研究者利用抗原抗体杂交技术筛选出_(填“牛乳铁蛋白基因”或“干扰素基因”)成功表达的胚胎进行移植。【答案】(1)基因工程、早期胚胎培养、核移植、胚胎移植(写出2项即可)(2)牛乳腺蛋白基因的启动子新霉素抗性干扰素基因成功表达的细胞(3)显微注射法胰蛋白酶(4)干扰素基因【解析】(1)培育双转基因奶牛需要通过转基因技术将目的基因转入受体细胞,据图可知,除转基因技术(基因工程)外,获得双转基因奶牛还借助于核移植技术、早期胚胎培养和胚胎移植技术。(2)构建表达载体时启动子的位置
13、可决定目的基因在何种细胞中表达。牛乳铁蛋白肽基因必须与牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,才能在转基因奶牛的乳腺细胞表达。据图可知,干扰素基因与新霉素抗性基因均位于相同的启动子和终止子之间,可同时转录,在翻译时,核糖体可识别mRNA上IRES序列的对应部分,启动另一种肽链的合成,使新霉素抗性基因得到表达,因此在含有新霉素的培养基可生存的细胞干扰素基因也已成功表达,因此用含有新霉素的培养基可筛选出干扰素基因成功表达的细胞。(3)目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法。导入前对牛胎儿成纤维细胞用胰蛋白酶处理,可水解细胞间的胶原纤维,使细胞分散。将成纤维细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中,卵母
14、细胞的细胞质可诱导已分化的细胞核恢复分裂、分化,并最终发育为新个体,实现动物细胞细胞核的全能性。(4)牛乳铁蛋白基因在成年牛的乳腺中才能表达,人干扰素基因可在牛全身细胞表达,因此筛选胚胎时可利用抗原抗体杂交技术筛选干扰素基因成功表达的胚胎进行移植。6(2021黑龙江哈尔滨六中期末)将苏云金杆菌Bt抗虫蛋白基因导入棉花细胞中,可获得转基因抗虫棉,其过程如图所示:注:质粒中“Bt”代表“Bt抗虫蛋白基因”,“KmR”代表“卡那霉素抗性基因”。(1)过程所需要的酶是_,卡那霉素抗性基因的作用是_ _。(2)过程将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养,旨在让重组Ti质粒上的_转移进入棉花细胞,并整合到棉花细
15、胞的_上。(3)若要检测转基因棉花细胞中Bt抗虫蛋白基因是否转录出了mRNA,可采用_技术;若要鉴定转基因棉花是否被赋予抗虫特性,需要做_实验。(4)种植转基因抗虫棉可以大大减少_的使用,以减轻环境污染。【答案】(1)限制酶和DNA连接酶作为标记基因,检测目的基因是否导入受体细胞(或供重组DNA的鉴定和选择)(2)TDNA染色体DNA(3)PCR抗虫接种(4)农药(或杀虫剂)【解析】(1)过程为基因表达载体的构建,需要对含有Bt毒蛋白基因的DNA和Ti质粒进行酶切和连接,故需要的工具酶有限制酶和DNA连接酶。卡那霉素抗性基因作为标记基因,其作用是检测目的基因是否导入受体细胞,供重组DNA的鉴定
16、和选择。(2)过程中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养的目的是让TDNA进入棉花细胞,并整合到棉花细胞的染色体DNA上。(3)若要检测转基因棉花细胞中Bt抗虫蛋白基因是否转录出了mRNA,应采用PCR技术;检验转基因棉花的抗虫性状,常用方法是投放棉铃虫,做抗虫接种实验,若棉铃虫大量死亡,说明转基因成功。(4)种植转基因抗虫棉能减少农药的使用,以减轻环境污染。7(2020云南昆明一模)2020年3月16日,中国科学家陈薇院士团队研制的重组新冠疫苗通过临床研究注册审评,获批进入临床试验。重组新冠疫苗的制备流程如图。回答下列问题。(1)步骤需要_作为原料。步骤需要的工具酶主要是_。(2)被用作载体的A
17、d5应具有的特点是_(答出1点即可)。(3)步骤是_。(4)重组疫苗注入志愿者体内后,S蛋白基因指导合成的S蛋白作为_,刺激机体产生能与之相结合的抗体,抗体的分泌量可作为检测疫苗对志愿者免疫效果的指标。参加临床试验的志愿者需要满足的条件之一是_(填“有”或“无”)新型冠状病毒感染史,理由是_。(5)为探究疫苗的注射剂量对志愿者产生的免疫效果,需进一步试验,请写出试验思路:_。【答案】(1)脱氧核苷酸Taq DNA聚合酶(2)能自我复制(或有一个或多个切割位点、有标记基因位点、对受体细胞无害)(3)基因表达载体的构建(4)抗原无有新型冠状病毒感染史的志愿者血清中存在一定量的相应抗体,会对试验结果
18、产生干扰(5)给不同组志愿者分别注射不同剂量的疫苗,一段时间后采集血样并检测相应抗体的水平【解析】(1)步骤为逆转录过程,合成的产物是c DNA,因此需要脱氧核苷酸作为原料。步骤为利用PCR技术扩增获得S蛋白基因的过程,该过程需要的酶是Taq DNA聚合酶(耐高温的DNA聚合酶)。(2)Ad5作为载体应具有的特点是能自我复制、有一个或多个限制酶切割位点、有标记基因、在宿主细胞中可以存活并表达、对宿主细胞无害等。(3)步骤为构建目的基因表达载体的过程,即重组新冠疫苗的过程。(4)重组疫苗注入志愿者体内后,S蛋白基因指导合成的S蛋白可作为抗原,刺激机体产生特异性免疫过程,使机体免疫系统产生能与之相
19、结合的抗体,抗体的分泌量可作为检测疫苗对志愿者免疫效果的指标。参加临床试验的志愿者需要满足无新型冠状病毒感染史的条件,即未感染过新冠病毒的志愿者,因为感染过新冠病毒的人体内含有相应的记忆细胞,若注射疫苗,则会出现二次免疫的特征,即体内的记忆细胞会迅速增殖分化,产生大量的浆细胞,浆细胞合成并分泌大量的抗体,从而导致无法检测出该疫苗的真正效果。(5)实验目的为探究疫苗的注射剂量对志愿者产生的免疫效果,根据实验目的可知,该实验的自变量为疫苗的注射剂量,因变量为抗体产生量,因此设计实验如下:将同性别且年龄相当的志愿者随机分成若干组,然后给不同组别的志愿者注射不同剂量的疫苗,一段时间之后,检测志愿者体内
20、的抗体产生量,做好记录并进行比较、分析,从而得出结论。8(2021黑龙江哈尔滨调研)回答下列问题:(1)干扰素是动物体内合成的一种糖蛋白,可以用于治疗病毒感染和癌症。建立乳腺生物反应器可大量生产干扰素,此生产过程需借助基因工程,常以哺乳动物的_为受体细胞。为了保证干扰素基因只在乳腺细胞内表达,构建表达载体时必须在目的基因的前端加入_。基因工程中往往不以原核细胞为受体细胞生产干扰素,是由于有活性的干扰素需要_(填细胞器)等的加工。(2)干扰素体外保存相当困难,如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸,就可在70 条件下保存半年,给广大患者带来福音。对蛋白质进行改造,应该直接对蛋白质分子进行操作,还
21、是通过对基因的操作来实现呢?_。原因:_。(3)动物基因工程技术有可能使建立移植器官工厂的设想成为现实。实现这一目标的最大难题是免疫排斥。科学家利用基因工程的方法对猪的器官进行改造以便获得对人无免疫排斥的可供移植的器官,所使用的方法是_。(4)试管婴儿技术解决了部分夫妻不育的难题,它和母亲正常怀孕生产过程的相同之处是都以_为发育起点,不同之处在于试管婴儿是在体外进行受精后,在试管中进行早期胚胎培养;如果需要“设计试管婴儿”,还可以对胚胎进行_,最后选取健康的胚胎进行移植,保证生出健康的孩子。【答案】(1)受精卵乳腺蛋白基因的启动子内质网、高尔基体(2)通过对基因的操作来实现蛋白质都是由基因编码
22、的,改造了基因也就间接对蛋白质进行了改造,改造过的基因可以指导新的蛋白质的合成;对基因进行改造比对蛋白质直接进行改造要容易操作,难度要小得多(3)向猪基因组导入某种调节因子,以抑制抗原决定基因的表达(或设法除去猪基因组中有关抗原决定基因),再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官(4)受精卵基因检测【解析】(1)受精卵可发育为个体,培育转基因动物时,通常使用受精卵作为受体细胞。为保证干扰素基因只在乳腺细胞内表达,在构建表达载体时,需在干扰素基因前端加上在乳腺中特异性表达的乳腺蛋白基因的启动子。有活性的干扰素需要在内质网和高尔基体等处加工,原核细胞中没有内质网和高尔基体,所以一般
23、不选择原核细胞作为受体细胞来生产干扰素。(2)对干扰素进行改造,应该对干扰素基因进行操作来实现,原因:蛋白质由基因编码,蛋白质不能复制,但基因可以遗传;对基因的改造比对蛋白质的改造要容易操作。(3)科学家利用基因工程方法对猪的器官进行改造,常用的方法是在器官供体基因组中导入某种调节因子,其目的是抑制抗原决定基因的表达(或设法去除抗原决定基因),再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。(4)试管婴儿技术指人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,体外发育至早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。这种技术和母亲正常怀孕生产过程的相同之处是都以受精卵为发育起点,不同之处在于试管婴儿是
24、在体外进行受精后在试管中进行早期胚胎培养的。如果需要“设计试管婴儿”,还可以对胚胎进行基因检测,最后选取健康的胚胎进行移植,保证生出健康的孩子。9(2021新疆适应检测)天山雪莲具有消炎镇痛、清除自由基等作用,其中具有药理活性的主要物质是黄酮类物质。多年来盲目采挖天山雪莲导致天山雪莲濒临灭绝,研究人员运用植物组织培养技术进行雪莲有效成分的提取,如图为相关过程。请回答下列有关问题:幼苗的叶或茎愈伤组织提取黄酮类物质(1)进行组织培养时,将雪莲幼苗的叶或茎切成0.5 cm长的小段作为_,用酒精溶液和次氯酸钠溶液进行_,然后立即用无菌水清洗并用_吸取材料表面的水分。(2)图中过程表示植物组织培养的_
25、过程。在植物组织培养的过程中,通常需要用植物生长调节剂对植物组织的_进行诱导,使用时应严格控制用量,才能准确地发挥“激素杠杆”的作用。(3)利用转基因技术也可以实现雪莲有效成分的工厂化生产。若选择大肠杆菌作为工程菌,需用_处理大肠杆菌细胞,使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态,这种细胞称为_细胞。通常选择大肠杆菌作为基因工程受体细胞的原因是_。【答案】(1)外植体消毒无菌滤纸(2)脱分化分裂和分化(3)Ca2感受态大肠杆菌是原核生物,具有繁殖快、遗传物质相对较少等特点【解析】(1)进行组织培养时,离体的组织(雪莲幼苗的叶或茎切成0.5 cm长的小段)称为外植体。为了防止感染杂菌,需用酒
26、精溶液和次氯酸钠溶液进行消毒,然后立即用无菌水清洗并用无菌滤纸吸取材料表面的水分。(2)外植体愈伤组织需要经过脱分化过程,如图中所示。在植物组织培养的过程中,植物组织的分裂和分化需要用植物生长调节剂进行诱导。(3)若选择大肠杆菌作为工程菌,需用Ca2处理大肠杆菌细胞,使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态,这种细胞称为感受态细胞。大肠杆菌(原核生物)具有繁殖快、遗传物质相对较少等特点,因此通常选择大肠杆菌作为基因工程受体细胞。10(2021河南百校联盟联考)如图是单克隆抗体制备过程示意图。请回答下列有关问题:(1)动物细胞融合是依据_原理将两个或多个动物细胞融合形成一个细胞的过程。(2)
27、单克隆抗体制备需要利用动物细胞融合与动物细胞培养技术。在体外培养动物细胞时,培养液中除了要加入促生长因子、无机盐、微量元素、糖、氨基酸等必需的营养成分,往往还需要加入_等一些天然成分,同时在含_混合气体的无菌、恒温培养箱中进行培养。(3)图中操作的目的是_。过程常在化学诱导剂_的诱导下完成,假设仅考虑细胞的两两融合,则可形成_种类型的融合细胞。过程中至少涉及两次筛选:第一次是利用_进行初步筛选,第二次是利用_的方法,最终筛选出既能无限增殖,又能产生所需抗体的杂交瘤细胞。【答案】(1)细胞膜的流动性(2)(动物)血清、血浆95%空气和5% CO2(3)刺激机体产生特异性B淋巴细胞聚乙二醇(PEG
28、)3选择性培养基专一抗体检测【解析】(1)动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性。(2)用于动物细胞体外培养的培养液除无机盐、促生长因子、糖、氨基酸等必需的营养成分外,还需要加入动物血清、血浆等天然成分;同时在含95%空气和5%CO2混合气体的无菌、恒温培养箱中进行培养。(3)图中操作是注射特定的抗原,目的是刺激小鼠产生特异性B淋巴细胞。促进动物细胞融合过程常用的化学诱导剂是聚乙二醇,仅考虑两个细胞的融合,则可形成2种自融细胞和1种互融细胞,共3种。过程至少涉及两次筛选,第一次筛选利用的是选择性培养基,筛选出的是杂交瘤细胞,第二次筛选是利用专一抗体检测的方法,做专一性抗体阳性检测实验,最终筛选出既
29、能无限增殖又能产生所需抗体的杂交瘤细胞。11(2021四川成都诊断)利用细胞工程技术可以生产单克隆抗体和“人鼠嵌合抗体”,在人类征服疾病方面展现出诱人的前景。回答下列问题:(1)将小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫的B细胞融合,形成杂交瘤细胞,动物细胞融合的诱导因素有_、_、电激等。对融合的细胞需要进行筛选、克隆化培养和_,进而获得可以产生单克隆抗体的细胞群体。(2)临床发现,利用上述方法产生的抗体具有外源性,会被人体免疫系统清除。科学家通过分析抗体的结构发现,抗体由“C区”和“V区”构成,引起人体免疫反应的主要是“C区”。科学家通过“人鼠嵌合抗体”成功解决了这个问题,制备“人鼠嵌合抗体”时,先从小鼠
30、杂交瘤细胞中提取RNA,在_酶的作用下形成DNA,扩增筛选得到编码抗体“_区”的基因,再与人的_基因通过DNA连接酶连接后,插入适当的表达载体,导入宿主细胞表达。与鼠源单克隆抗体相比,“人鼠嵌合抗体”的优点是_。【答案】(1)聚乙二醇(PEG)灭活的病毒专一抗体检测(2)逆转录V抗体“C区”降低人体对鼠源单克隆抗体的免疫排斥反应,提高治疗效果【解析】(1)聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等可以诱导动物细胞融合。对融合的细胞需要进行筛选、克隆化培养和专一抗体检测,进而获得可以产生单克隆抗体的细胞群体。(2)RNA通过逆转录过程可以得到DNA,该过程需要逆转录酶的催化。引起人体免疫反应的主要是
31、“C区”,因此先从小鼠杂交瘤细胞中筛选得到编码抗体“V区”的基因,再与人的抗体“C区”基因通过DNA连接酶连接后,插入适当表达载体,导入宿主细胞表达。与鼠源单克隆抗体相比,“人鼠嵌合抗体”的优点是降低人体对鼠源单克隆抗体的免疫排斥反应,提高治疗效果。12(2021重庆巴蜀中学联考)如图为利用小鼠制备抗登革热病毒的单克隆抗体过程示意图,图中AF分别表示生物技术名称或细胞名称。(1)过程A是指将_(填“抗原”或“抗体”)类物质注入小鼠体内,一段时间后,取小鼠的脾脏组织,剪碎后用_处理使其分散成单个细胞,以获得相应的_细胞;图中细胞B一般选用_细胞。(2)如果仅考虑两两融合的细胞,则最多可形成_种类
32、型的细胞C。需用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞,再对杂交瘤细胞进行培养和检测,经多次筛选,就可获得足够数量的细胞D。(3)杂交瘤细胞体外培养时,在5%_培养箱中培养,为防止培养过程中的污染,培养基中需要加入适量的_。【答案】(1)抗原胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)B淋巴骨髓瘤(2)3(3)CO2抗生素【解析】(1)过程A是指将抗原类物质注入小鼠体内,一段时间后,取小鼠的脾脏组织,剪碎后用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使其分散成单个细胞,以获得相应的B淋巴细胞;图中细胞B一般选用能无限增殖的骨髓瘤细胞。(2)如果仅考虑两两融合的细胞,则最多可形成3种类型的细胞C。(3)杂交瘤细胞体外培养时,在5%CO2培养箱中培养,为防止培养过程中的污染,培养基中需要加入适量的抗生素。