1、专题一基因工程1.2基因工程的基本操作程序.1.提取目的基因的方法2.目的基因导入受体细胞的途径。3.基因工程基本操作程序的四个步骤。4.从基因文库中获取目的基因。5.利用PCR技术扩增目的基因。6.简述基因工程的原理和基本步骤。.通过回顾上节课关于基因工程各工具及作用的相关知识，导入本节课的学习，教学整体思路采用从“整体-部分-整体”的教学思路，首先引用基因工程案例使学生从整体上了解基因工程的四个步骤，接着采用分步探究的形式帮助学生理解各个步骤的原理、方法和过程及注意事项，最后教师引导学生用概念图将所学的知识从整体上再次整合。本节课的重难点为将目的基因导入受体细胞，可通过教材上的图示，以及相
2、关动画，分别阐述将目的基因导入植物细胞、动物细胞和微生物细胞不同的条件和注意事项，形象直观，重点介绍将目的基因导入植物细胞部分。.一、基因工程别名、操作对象、操作水平、操作环境、实质或原理各是什么二、限制酶的作用三、DNA连接酶的作用四、运输基因的载体必须具备的条件五、DNA连接酶与DNA聚合酶的异同.目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的表达和检测一、基因工程的基本操作程序.1.获取目的基因的方法有哪些？2.什么叫基因文库，它包括哪些种类？3.用PCR技术扩增基因需要哪些原料？.1、从基因文库中获取（序列未知）2、利用PCR技术扩增（序列已知）基因文库基因组文库部分
3、基因文库如：cDNA文库聚合酶链式反应（一）目的基因的获取3、人工合成(基因比较小，序列已知)反转录法根据已知的氨基酸序列合成DNA.（1）从基因文库获取目的基因返回根据目的基因的有关信息，如：基因的已知核苷酸序列；基因的功能；基因在染色体上的位置；基因的转录产物mRNA；基因的表达产物蛋白质；.（2）利用PCR技术扩增目的基因原理：DNA双链复制的原理过程：变性（90 95）退火：引物与单链互补结合（55 60）DNA聚合酶作用下延伸（70 75）条件：DNA模板、引物、DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸、能量。.1、基因表达载体包括哪些必需组分？各成分的作用是什么？2、转化的概念，将目的基因导入
4、植物、动物、微生物细胞的方法分别有哪些？.（二）将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法受体细胞植物cell动物cell微生物cell显微注射技术感受态法.1、将目的基因导入微生物细胞 原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少 方法：用Ca2+处理细胞感受态细胞表达载体与感受态细胞混合感受态细胞吸收DNA分子.DNA分子杂交（三）目的基因的检测和鉴定.基因探针，是一段带有检测标记，且序列已知的，与目的基因互补的核酸序列。基因探针通过分子杂交与目的基因结合，产生杂交信号，能从浩翰的基因组中把目的基因显示出来。1、探针需带有一定的标记，可以用什么方法？2、基因探针有哪些用途？.接种实
5、验抗原抗体杂交法DNA-RNA分子杂交法DNA分子杂交法受体是否具有转基因特征个体水平目的基因是否翻译目的基因是否转录目的基因是否导入分子水平方法检测对象.1.获取目的基因u 从基因文库u 利用PCR技术u 人工合成基因工程的基本操作程序2.构建基因表达载体u 目的基因、启动子、终止子、标记基因3.将目的基因导入受体细胞u 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法、显微注射法4.目的基因的检测与鉴定u 检测：是否插入、转录、翻译u 鉴定：是否有转基因特性.1.以下说法正确的是（）A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制
6、酶切点，以便与外源基因连接D、基因控制的性状都能在后代表现出来C.2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是（）A、能复制B、有多个限制酶切点C、具有标记基因D、它是环状DNAD3.有关基因工程的叙述中，错误的是（）A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来B、限制性内切酶用于目的基因的获得C、目的基因须由运载体导入受体细胞D、人工合成目的基因不用限制性内切酶A.4.有关基因工程的叙述正确的是（）A、限制酶只在获得目的基因时才用B、重组质粒的形成在细胞内完成C、质粒都可作为运载体D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料D5.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行
7、碱基互补配对的步骤是（）A、人工合成目的基因B、目的基因与运载体结合C、将目的基因导入受体细胞D、目的基因的检测和表达C.练习1：为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。（1）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和。（2）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用技术，该技术的核心是和。（3）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的作探针进行分子杂交检测，又要用方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。基因枪法（花粉管通道法）植物组织培养脱分化（去分化）耐盐基因（目的基因）一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）
